孟維維 夏 琦

沈陽(yáng)市第七人民醫(yī)院皮膚科，遼寧沈陽(yáng)，110000

大皰性類天皰瘡(bullous pemphigoid，BP)是一種獲得性自身免疫性大皰病，常見(jiàn)于60歲以上老人，臨床表現(xiàn)為水腫性紅斑或外觀正常皮膚表面水皰大皰。其發(fā)病機(jī)制涉及固有免疫、體液免疫、細(xì)胞免疫、補(bǔ)體系統(tǒng)等方面[1]。近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)的研究，人們發(fā)現(xiàn)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制因子(suppressors of cytokine signaling，SOCSs)家族在炎癥介質(zhì)激活、釋放過(guò)程中具有重要作用[2]。SOCS-1、SOCS-3是SOCSs家族中的重要成員，與人體固有免疫及適應(yīng)性免疫調(diào)節(jié)過(guò)程密切相關(guān)[3]，可能與大皰性類天皰瘡的發(fā)病機(jī)制有關(guān)，但其在大皰性類天皰瘡中的表達(dá)情況尚鮮有報(bào)道，基于此本研究通過(guò)檢測(cè)大皰性類天皰瘡患者血清及皰液中SOCS-1、SOCS-3的表達(dá)情況及臨床意義，以期進(jìn)一步闡明大皰性類天皰瘡的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取2017年1月至2018年12月本院收治的42例大皰性類天皰瘡患者為BP組研究對(duì)象，男18例，女24例，年齡45～80歲，平均(63.14±10.02)歲，納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合大皰性類天皰瘡的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；②經(jīng)臨床、組織病理及免疫熒光等確診；③首次就診；④患者均自愿配合本次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有其他感染或過(guò)敏情況；②有免疫抑制劑及糖皮質(zhì)激素治療史；③有其他自身免疫疾病、感染性疾病患者；④惡性腫瘤疾病患者。BP患者入院后，根據(jù)患者疾病嚴(yán)重程度采取不同的治療方案(局限性BP患者：采用糖皮質(zhì)激素、抗生素等治療；泛發(fā)性BP患者：外用糖皮質(zhì)激素、系統(tǒng)用糖皮質(zhì)激素聯(lián)合甲氨蝶呤等免疫抑制劑治療。同時(shí)選取30例II度燙傷患者為對(duì)照組研究對(duì)象，男16例，女14例，年齡45～80歲，平均(62.25±11.26)歲。兩組受試者性別、年齡、體重指數(shù)等一般資料相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究以通過(guò)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均已簽署知情同意書(shū)。

1.2 樣本采集與保存 空腹采集BP患者活動(dòng)期(24 h內(nèi)新發(fā)未感染水皰)、緩解期(皮損完全消退)及對(duì)照組肘靜脈血5 mL，在離心機(jī)上(3000 r/min，15 min)離心后取上清，并置于-70 ℃冰箱中保存待測(cè)。同時(shí)采集BP患者活動(dòng)期及對(duì)照組患者吸皰液0.5～1 mL，3000 r/min離心5 min后，取上清，保存于-70℃冰箱中待測(cè)。

1.3 SOCS-1、SOCS-3水平檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunoserbent assay，ELISA)檢測(cè)血清及皰液中SOCS-1、SOCS-3蛋白表達(dá)水平，SOCS-1、SOCS-3檢測(cè)試劑盒購(gòu)自廈門慧嘉生物科技有限公司，檢測(cè)過(guò)程嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 自身免疫性皰病嚴(yán)重程度評(píng)分(autoim-mune bullous skin disorder intensity score，ABSIS)判定 患者BP疾病嚴(yán)重程度依據(jù)德國(guó)學(xué)者Pfütze制定的ABSIS評(píng)分體系對(duì)受累總面積進(jìn)行評(píng)價(jià)，ABSIS由三部分組成，第一部分為皮膚嚴(yán)重程度評(píng)分，計(jì)0～150分；第二部分為口腔黏膜損害嚴(yán)重程度評(píng)分，計(jì)11分，第三部分為患者主觀感受評(píng)分，計(jì)45分，具體評(píng)分過(guò)程參照Pfütze等[5]關(guān)于大皰性類天皰瘡評(píng)分過(guò)程。評(píng)分過(guò)程均由2名專業(yè)醫(yī)生根據(jù)體檢資料統(tǒng)一進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 一般資料與既往病史 兩組受試者性別、年齡、BMI等一般資料相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 一般資料及既往病史比較

2.2 大皰性類天皰瘡患者血清中SOCS-1、SOCS-3的表達(dá)水平 活動(dòng)期BP患者血清中SOCS-1、SOCS-3表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組、緩解期BP患者(P<0.05)，緩解期BP患者血清中SOCS-1、SOCS-3表達(dá)水平與對(duì)照組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 大皰性類天皰瘡患者血清中SOCS-1、SOCS-3水平比較

注：①：與對(duì)照組比較，P<0.05；②：與緩解期患者比較，P<0.05

2.3 大皰性類天皰瘡患者皰液中SOCS-1、SOCS-3的表達(dá)水平 BP組患者皰液中SOCS-1、SOCS-3表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表3。

2.4 BP患者血清及皰液中SOCS-1與SOCS-3表達(dá)的相關(guān)性 BP患者血清中SOCS-1與SOCS-3水平呈正相關(guān)(r=0.543，P<0.05)，皰液中SOCS-1與SOCS-3水平呈正相關(guān)(r=0.633，P<0.05)。見(jiàn)圖1。

表3 大皰性類天皰瘡患者皰液中SOCS-1、SOCS-3水平比較

注：①與對(duì)照組比較，P<0.05

圖1 BP患者血清及皰液中SOCS-1、SOCS-3水平的相關(guān)性分析

2.5 BP患者血清及皰液中SOCS-1、SOCS-3與ABSIS評(píng)分的相關(guān)性 血清中SOCS-1、SOCS-3水平與ABSIS評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.419、r=0.585，P<0.05)，皰液中SOCS-1、SOCS-3水平與ABSIS評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.414、r=0.498，P<0.05)。見(jiàn)圖2。

圖2 BP患者血清及皰液中SOCS-1、SOCS-3水平與ABSIS評(píng)分的相關(guān)性分析

3 討論

類天皰瘡是一類由自身抗體介導(dǎo)的慢性復(fù)發(fā)性大皰病[6]。BP是類天皰瘡疾病中最常見(jiàn)的一種臨床亞型，好發(fā)部位為軀干和四肢，少數(shù)患者可伴眼瞼、齒齦、口唇等黏膜受累[7]。典型臨床特征為外觀正常或水腫性紅色斑片基礎(chǔ)上張力性水皰，其特點(diǎn)為皰壁厚、不易破、皰液清澈，偶見(jiàn)血皰的形成，通常伴有不同程度的瘙癢等，組織病理表現(xiàn)為表皮下水皰，并伴有多種炎性細(xì)胞浸潤(rùn)[8]。BP的發(fā)生與免疫、遺傳、藥物及環(huán)境等諸多因素有關(guān)，其中自身免疫紊亂在BP發(fā)病中起關(guān)鍵作用[9]。

SOCSs家族是一類能夠反饋性阻斷細(xì)胞因子信息轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程的負(fù)性調(diào)節(jié)因子，在體內(nèi)可阻斷增強(qiáng)的細(xì)胞因子效應(yīng)，在調(diào)節(jié)細(xì)胞因子、控制細(xì)胞分化等方面具有重要作用，與自身免疫及超敏反應(yīng)等密切相關(guān)[2]。SOCS-1、SOCS-3均為SOCS家族中的重要成員。其中SOCS-1與IFN-γ信號(hào)通路抑制及T淋巴細(xì)胞活化有重要作用，組織中SOCS-1表達(dá)異常升高可增強(qiáng)組織對(duì)炎癥反應(yīng)的易感性，損傷組織[10]。SOCS-3可以被IL-6、IL-10、IL-12等多種炎性介質(zhì)誘導(dǎo)，并抑制IL-2及TNF-γ引起的炎癥反應(yīng)[11]。正常條件下，SOCS-1、SOCS-3的表達(dá)極低，但在炎癥因子誘導(dǎo)條件下，其表達(dá)水平均顯著升高。王絲墨等[12]研究表明，SOCS-1、SOCS-3在慢性根尖周炎病損組織中表達(dá)水平較高，且其表達(dá)水平與患者疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，活動(dòng)期BP患者血清中SOCS-1、SOCS-3表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組，BP組患者皰液中SOCS-1、SOCS-3表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組，提示SOCS-1、SOCS-3表達(dá)水平可能與BP患者炎癥反應(yīng)的發(fā)生有關(guān)，在誘導(dǎo)及參與BP局部免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)中起作用。本研究進(jìn)一步通過(guò)Pearson相關(guān)性分析BP患者血清及皰液中SOCS-1與SOCS-3表達(dá)的關(guān)系，結(jié)果顯示血清及皰液中SOCS-1與SOCS-3水平均呈正相關(guān)，提示血清及皰液中SOCS-1與SOCS-3可能共同調(diào)節(jié)，共同誘導(dǎo)及參與BP疾病的發(fā)生。

目前臨床針對(duì)自身免疫性大皰病病情嚴(yán)重程度的評(píng)估，有2種專門的評(píng)分指標(biāo)：ABSIS與大皰性類天皰瘡疾病面積指數(shù)評(píng)分(bullous pemphigoid disease area index，BPDAI)，兩者均已經(jīng)過(guò)效度檢驗(yàn)[13]。劉藝迪等[14]研究表明，ABSIS評(píng)分兼具客觀與主觀的評(píng)分項(xiàng)目，既能定量又能定性地反映BP疾病的嚴(yán)重程度。本研究結(jié)果顯示，BP患者血清中SOCS-1、SOCS-3水平與ABSIS評(píng)分呈正相關(guān)，皰液中SOCS-1、SOCS-3水平與ABSIS評(píng)分呈正相關(guān)，提示BP患者血清及皰液中SOCS-1、SOCS-3表達(dá)水平可能與BP疾病嚴(yán)重程度有關(guān)。

綜上所述，大皰性類天皰瘡患者血清及皰液中均呈現(xiàn)較高的SOCS-1、SOCS-3表達(dá)水平，且二者均與ABSIS評(píng)分呈正相關(guān)，推測(cè)二者可能參與大皰性類天皰瘡疾病的發(fā)生發(fā)展，可作為臨床評(píng)估大皰性類天皰瘡疾病的血清學(xué)指標(biāo)。然而本研究樣本數(shù)量較少，下一步準(zhǔn)備擴(kuò)大樣本容量，從不同角度進(jìn)行深入分析BP疾病具體生物學(xué)發(fā)病機(jī)制，從而為此類疾病的研究及治療提供理論依據(jù)。