杜媛媛

【摘? 要】目的： 分析染色體微陣列技術(shù)對(duì)于胎兒先天性心臟?。╟ongenital heart defect，CHD）產(chǎn)前診斷的價(jià)值，為提高CHD的產(chǎn)前檢出率降低懷孕風(fēng)險(xiǎn)提供參考。方法：選擇在我院經(jīng)超聲檢查確診為胎兒CHD的單胎孕婦89例，診斷時(shí)間為2016年8月至2019年8月，先對(duì)符合研究條件的89例胎兒進(jìn)行染色體核型分析，再用染色體微陣列（chromosome microarray analysis，CMA）檢測(cè)核型分析無異常的胎兒，將檢測(cè)數(shù)據(jù)與國際公共數(shù)據(jù)庫中的指標(biāo)對(duì)比，對(duì)拷貝數(shù)變異（copy number variants，CNVs）性質(zhì)進(jìn)行判斷。結(jié)果：經(jīng)染色體核型分析，有6例胎兒的染色體顯示異常，檢出率為6.74%（6/89），用CMA檢測(cè)其余83例核型分析正常的胎兒。從心臟單發(fā)異常的胎兒中檢測(cè)到1例致病性CNVs，為Xp22.33微重復(fù)（369.51kb），檢出率為2.00%（1/50）;從心臟復(fù)雜異常的胎兒中檢測(cè)出2例致病性CNVs，分別為Xp22.33微缺失（355.87kb）和22q11.21微缺失（3.17Mb），檢出率為6.06%（2/33）。結(jié)論： 染色體核型分析無法實(shí)現(xiàn)對(duì)全基因組的快速檢測(cè)，對(duì)于亞顯微的異常染色體以及未知染色體的檢測(cè)效果不理想。CMA技術(shù)具有較高的分辨率，可以明顯提高致病性CNVs的檢出率，對(duì)于CHD胎兒的產(chǎn)前診斷有重要價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】染色體微陣列;產(chǎn)前診斷;先天性心臟病

先天性心臟?。╟ongenital heart defect，CHD）是新生兒中發(fā)病率較高的一種先天缺陷疾病，其發(fā)生和染色體異常（微缺失、微重復(fù)等）或者基因突變密切相關(guān)，因此對(duì)CHD的研究需要與全基因測(cè)序以及遺傳學(xué)等內(nèi)容聯(lián)系起來，以應(yīng)用于臨床的診斷和治療中。染色體微陣列（chromosome microarray analysis，CMA）與傳統(tǒng)染核型分析相比，具有分辨率高，檢測(cè)快等優(yōu)勢(shì)，臨床診斷一般先進(jìn)行核型分析，如果未發(fā)現(xiàn)異常，再進(jìn)行CMA檢測(cè)，以進(jìn)一步提高診斷的準(zhǔn)確率。為進(jìn)一步了解CMA對(duì)產(chǎn)前診斷CHD的價(jià)值，進(jìn)行如下研究。

1 資料和方法

1.1基本資料

選擇經(jīng)我院超聲檢查確診胎兒CHD的單胎孕婦89例，診斷時(shí)間為2016年8月至2019年8月。年齡分布：20～30歲64.04%（57/89），31～38歲35.96%（32/89），中位年齡（28.3±1.6）歲，20周≤孕周≤31周，平均（25.8±1.3）周，包括胎兒心臟單發(fā)異常54例，復(fù)雜異常35例。排除影響研究結(jié)果合理性的其他因素，開展研究前醫(yī)生將研究相關(guān)事項(xiàng)均詳細(xì)告知孕婦及家屬，經(jīng)其同意后開展研究。

1.2方法

核型分析：抽取胎兒臍血并進(jìn)行血細(xì)胞離心處理，將細(xì)胞培養(yǎng)10天至14天，在生長良好的狀態(tài)下加入秋水仙堿，收集細(xì)胞，用G顯帶方法觀察染色體，確定其核型。再用CMA檢測(cè)核型分析無異常的細(xì)胞：選擇USA生產(chǎn)的Affymetrix品牌CytoScan 750k芯片試劑盒，拷貝數(shù)探針數(shù)量約75萬，SNPs探針數(shù)量約20萬，可以全面覆蓋已知基因。將檢測(cè)的結(jié)果用Affymetrix配套的芯片平臺(tái)軟件進(jìn)行分析，得到的數(shù)據(jù)與國際公共數(shù)據(jù)庫中的指標(biāo)對(duì)比，對(duì)CNVs性質(zhì)進(jìn)行判斷。所有操作保證在無菌狀態(tài)下進(jìn)行，本研究中CNVs閾值為300kb，同時(shí)對(duì)新生兒進(jìn)行3～6個(gè)月隨訪。

2 結(jié)果

2.1核型分析：89例檢測(cè)結(jié)果中有6例胎兒的染色體顯示異常，檢出率為6.74%（6/89）。見表1。

2.2 CMA檢測(cè)：83例核型檢測(cè)正常的對(duì)象中，從心臟單發(fā)異常的胎兒中檢測(cè)到1例致病性CNVs，為Xp22.33微重復(fù)（369.51kb），檢出率為2.00%（1/50）;從心臟復(fù)雜異常的胎兒中檢測(cè)出2例致病性CNVs，分別為Xp22.33微缺失（355.87kb）和22q11.21微缺失（3.17Mb），檢出率為6.06%（2/33）。

2.3 隨訪結(jié)果：單發(fā)異常的54例胎兒中共有39例生產(chǎn)，15例引產(chǎn)（3例核型異常、1例致病性CNVs、11例孕婦要求）;復(fù)雜異常的35例胎兒均實(shí)施引產(chǎn);進(jìn)行3～6個(gè)月隨訪未發(fā)現(xiàn)新生兒有其他異常。

3 討論

G顯帶技術(shù)可以對(duì)400至550條染色體帶進(jìn)行核型分析，對(duì)于10Mb以上的染色體異?？梢詼?zhǔn)確的檢測(cè)，但是對(duì)于異常不明顯的染色體往往無法精確檢測(cè)。而CMA的檢測(cè)速度、基因覆蓋面以及分辨率都明顯高于傳統(tǒng)核型分析技術(shù)，因此可以作為進(jìn)一步判斷染色體是否異常的重要依據(jù)，可提高核型正常的CHD胎兒檢出率，為進(jìn)行準(zhǔn)確的產(chǎn)前風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供數(shù)據(jù)參考。

綜上所述，染色體核型分析無法實(shí)現(xiàn)對(duì)全基因組的快速檢測(cè)，對(duì)于亞顯微的異常染色體以及未知染色體的檢測(cè)效果不理想。CMA技術(shù)對(duì)于核型正常染色體的微缺失或者微重復(fù)等異常的檢測(cè)更為精確，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)產(chǎn)前CHD，對(duì)于降低孕期風(fēng)險(xiǎn)保障分娩安全有重要價(jià)值。

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