陳 亞，呂紫璇，謝 甜

（重慶市涪陵食品藥品檢驗(yàn)所，重慶 408000）

消疤酊具有活血消腫，散結(jié)化疲。用于燒傷后形成疤痕者。其處方由花粉、益母草、當(dāng)歸、赤芍、黨參、炮山甲、黃芪、甘草、紅花、桃仁、乳香、沒(méi)藥、羌活、蟬衣、地龍、秦艽等組成。處方中赤芍具有清熱涼血，散瘀止痛的功效，其主要有效成分為芍藥苷。消疤酊現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中僅有化學(xué)反應(yīng)鑒別及薄層色譜法鑒別，無(wú)含量測(cè)定項(xiàng)，其專(zhuān)屬性及質(zhì)量可控性差。筆者在檢測(cè)該成分的含量時(shí)選擇了高效液相色譜法[1-4]。該方案簡(jiǎn)捷、精準(zhǔn)、重復(fù)性?xún)?yōu)良，控制消疤酊的質(zhì)量效果顯著。

1 設(shè)備與試劑

高效液相色譜儀（型號(hào)為L(zhǎng)C-20A）；電子天平（型號(hào)為Sartorius-ME235S）；芍藥苷對(duì)照品（中檢院，批號(hào)110736-201842，含量97.4%）；消疤酊（重慶化工廠化工燒傷醫(yī)院，批號(hào)分別為160620，160911，161205）。試劑：色譜級(jí)甲醇，超純水，分析純磷酸二氫鉀。

2 方案與結(jié)論

2.1 色譜環(huán)境

色譜柱：Agilent Eclipse XDB C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動(dòng)相：甲醇-0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液（40:60）；流動(dòng)速度1.0 mL/min；測(cè)試波長(zhǎng)230 nm；柱溫25℃。進(jìn)樣量：10 μL。

2.2 溶液準(zhǔn)備

稱(chēng)量芍藥苷對(duì)照品（含量97.4%計(jì)）10.22 mg，用甲醇溶解并稀釋至100 mL，得質(zhì)量濃度為0.0995 mg/ml的溶液，即得對(duì)照品溶液。取本品5 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，即得供試品溶液。取陰性樣本，依據(jù)前述的制作方法獲得陰性對(duì)比溶液。

2.3 方法學(xué)考查

（1）系統(tǒng)適用性檢測(cè)：挑選2.2項(xiàng)中的3種溶液，按制定色譜環(huán)境加以檢測(cè)。結(jié)論:陰性對(duì)比溶液在和對(duì)照溶液色譜峰相同保留時(shí)間處沒(méi)有顯露吸收峰，表征處方里另外成分無(wú)法影響檢測(cè)。如圖1。

（2）線性關(guān)系考察;精準(zhǔn)稱(chēng)量芍藥苷對(duì)照品（比重97.4%計(jì)）18.48 mg，利用甲醇完全溶解，同時(shí)定容在容積為100 mL量瓶中，獲得的母液質(zhì)量濃度等于0.1800 mg/ml，精準(zhǔn)量出1.0 ml母液；定容在容積是5 ml、10 ml、25 ml、50 ml、100 ml的量瓶中，其質(zhì)量濃度各等于36；18；7.2；3.6；芍藥苷對(duì)比試劑1.8 μg/ml，各量出上文試劑10 μl注射到液相色譜儀，設(shè)定質(zhì)量濃度是橫坐標(biāo)（x）,設(shè)定峰面積是縱坐標(biāo)（y），線性回歸算出方程是：y=12768，x-12096，r=0.9997，證時(shí)芍藥苷質(zhì)量濃度大于1.8，且小于180.0μg/ml，線性關(guān)系可觀。

圖1 高效液相色譜圖（1）陰性對(duì)比溶液；（2）對(duì)照液；（3）供試品溶液

精密度檢驗(yàn)：量出2.1制備的對(duì)照液，參照2.3色譜環(huán)境反復(fù)進(jìn)6次，結(jié)論:峰面積RSD值等于0.53%（n=6),證實(shí)儀器精準(zhǔn)性可觀。

重復(fù)性檢驗(yàn)：精準(zhǔn)量出批號(hào)均是160620的試樣，參照供試品制法制得6組供試液，加以檢測(cè)，結(jié)論:峰面積的RSD值等于0.79%(n=6),證實(shí)重復(fù)性可觀。

穩(wěn)定性檢驗(yàn)：量出相同供試液，制得后0,2,4,8,12,24 h進(jìn)樣。結(jié)論：峰面積的RSD值等于0.96%(n=6)，證實(shí)供試品試劑在24h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收檢驗(yàn)：量出含量已知、批號(hào)是160620的樣液6組，精準(zhǔn)添加濃度等于0.1800mg/m的芍藥苷對(duì)照液，參照供試液制得溶液并檢測(cè)，得出回收率,結(jié)論:芍藥苷回收率平均值 98.96%，RSD%等于0.69%；結(jié)論如表1。

表1 芍藥苷加樣回收檢測(cè)結(jié)論（n=6）

2.4 試樣檢測(cè)

量出3組消疤酊試樣以2 2項(xiàng)中方式制得對(duì)照和供試液，以2.1項(xiàng)中色譜環(huán)境檢測(cè)，將峰面積值記下，算出每種供試品芍藥苷的含量，結(jié)論如表2。

表2 試樣含量檢測(cè)結(jié)論(n=6)

3 討 論

根據(jù)《中國(guó)藥典》2015年版一部“赤芍”項(xiàng)中的含量檢測(cè)方式，故挑選甲醇-0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液（40:60）為流動(dòng)相，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該流動(dòng)相可有效分離芍藥苷與其他雜質(zhì)峰。

該實(shí)驗(yàn)選擇的分析方式簡(jiǎn)捷，結(jié)果精準(zhǔn)無(wú)誤，專(zhuān)業(yè)，重現(xiàn)性客觀，可用于控制該制劑的質(zhì)量。