陳澤衍，陳曉靜，鄭文斌，蘭希，郭偉權(quán)，黃漢蓮，馬雯

1.南方醫(yī)科大學(xué)深圳醫(yī)院檢驗科，廣東 深圳 518110；

2.深圳大學(xué)總醫(yī)院檢驗科，廣東 深圳 518055

原發(fā)性肝癌(primary liver cancer，PLC)是臨床上常見的惡性腫瘤，隨著人們生活水平的提高和生活方式的改變，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢[1]。原發(fā)性肝癌的臨床表現(xiàn)為肝區(qū)疼痛、全身乏力、消瘦、食欲下降等癥狀，且肝癌起病隱匿，病情發(fā)展迅速[2-3]。因此，早期預(yù)測并及時給予治療對原發(fā)性肝癌的發(fā)生發(fā)展及減少患者死亡率起重要作用。目前有關(guān)原發(fā)性肝癌的發(fā)病機制尚不明確，但較多研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性肝癌是由多種病因?qū)е卵寮滋サ鞍?alpha fetoprotein，AFP)、異常凝血酶原(abnormal prothrombin，PIVKA-Ⅱ)含量增高[4]。血清AFP 一直以來都是肝癌診斷的標志物，其與肝癌發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)，在多種腫瘤中能表現(xiàn)出較高濃度，也是多種腫瘤檢測的重要指標。血清AFP 是診斷肝癌的主要檢測指標，但單一檢測AFP 水平會存在特異性不足，檢測效果并不理想[5]。PIVKA-Ⅱ是由于癌細胞對凝血酶原前體合成產(chǎn)生異常，導(dǎo)致凝血酶原前體不足所生成的蛋白質(zhì)，是近年來新發(fā)現(xiàn)的檢測原發(fā)性肝癌的標志物。原發(fā)性肝癌患者血清PIVKA-Ⅱ含量越高，反映其病情越嚴重，說明PIVKA-Ⅱ的水平變化對原發(fā)性肝癌具有診斷價值[6]。因此，血清AFP、PIVKA-Ⅱ的關(guān)系被較多研究關(guān)注[7]。本研究通過觀察AFP、PIVKA-Ⅱ的水平變化，為早期預(yù)測疾病提供依據(jù)，現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019 年5 月～11 月南方醫(yī)科大學(xué)深圳醫(yī)院收治的56 例原發(fā)性肝癌患者作為觀察組。納入標準：(1)符合《原發(fā)性肝癌診斷標準》[8]診斷標準；(2)患者診療及隨訪依從性較好，能夠配合診療。排除標準：(1)有肝移植病史；(2)合并嚴重消化系統(tǒng)其他腫瘤者；(3)嚴重的心、腦、肺、腎臟疾病者。另選取50 例體檢健康者作為對照組。觀察組中男性35 例，女性21 例；年齡33～72 歲，平均(49.24±9.76)歲。對照組中男性28 例，女性22 例，年齡32～76 歲，平均(51.18±9.83)歲。兩組受檢者的性別和年齡比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準，入選受檢者均知情并簽署同意書。

1.2 觀察指標與檢測方法 采集所有受檢者入組后第2天清晨空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min離心10 min后分離血清于2 h 內(nèi)完成檢測，若不能及時檢測，于-80℃凍存?zhèn)錂z。血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平的檢測均使用全自動電泳熒光免疫分析儀(μTASWakoi30)測定，試劑盒均使用日本富士膠片和先存藥株式會社公司生產(chǎn)的配套試劑盒。

1.3 判斷標準 血清正常參考范圍為PIVKA-Ⅱ≤40 mAU/m，AFP≤10 ng/mL，所有陽性值以大于正常范圍為判斷標準，兩項聯(lián)合檢測以一項或兩項均陽性為陽性標準。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0 軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以均數(shù)±標準差表示，組間比較采用t檢驗，并使用受試者工作特征曲線(ROC)分析血清AFP、PIVKA-Ⅱ的診斷效能，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢者的AFP、PIVKA-Ⅱ水平比較 觀察組患者的血清AFP、PIVKA-Ⅱ水平明顯高于對照組，差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，見表1。

表1 兩組受檢者的AFP、PIVKA-II水平比較

表1 兩組受檢者的AFP、PIVKA-II水平比較

組別觀察組對照組t值P值例數(shù)56 50 AFP(mAU/mL)132.63±17.24 2.35±0.78 84.287＜0.01 PIVKA-Ⅱ(ng/mL)1 562.56±129.32 20.08±2.13 53.359＜0.01

2.2 繪制ROC 曲線 AFP 診斷原發(fā)性肝癌的ROC 曲 線 下 面 積 為0.805，95%CI 為0.723～0.888，PIVKA-Ⅱ診斷原發(fā)性肝癌的ROC 曲線下面積為0.678，95%CI為0.577～0.779，AFP+PIVKA-Ⅱ診斷原發(fā)性肝癌的ROC 曲線下面積為0.914，95%CI 為0.890～0.939，AFP、PIVKA-Ⅱ單獨檢測分別和聯(lián)合檢測曲線下面積比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=1.855、2.688，P＜0.05)，見圖1。

圖1 血清AFP、PIVKA-II單獨檢測和聯(lián)合檢測原發(fā)性肝癌的ROC曲線

2.3 血清AFP、PIVKA-Ⅱ單獨檢測和聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的診斷效能 AFP+PIVKA-Ⅱ聯(lián)合檢測的敏感度、特異度及準確度明顯高于AFP及PIVKA-Ⅱ單獨檢測，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 血清AFP、PIVKA-II 單獨檢測和聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的診斷效能(%)

3 討論

原發(fā)性肝癌是發(fā)生在肝臟的惡性腫瘤，也是消化系統(tǒng)最常見的腫瘤，有數(shù)據(jù)統(tǒng)計，肝癌死亡率位居所有腫瘤死亡率的第二位，高發(fā)年齡為50 歲左右，男性多于女性[9-10]。原發(fā)性肝癌早期無明顯癥狀，增加了診斷難度，等到癥狀出現(xiàn)時往往已經(jīng)發(fā)展到晚期，且該病的復(fù)發(fā)率和死亡率偏高。因此，早期診斷并發(fā)現(xiàn)疾病具有重要意義[11]。

臨床上治療原發(fā)性肝癌目前仍舊缺少有效的治療方式，故通過早期的診斷，爭取最佳的治療時間是延緩病情持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵。血清AFP 一直以來都是肝癌診斷的標志物，其與肝癌發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)，在多種腫瘤中能表現(xiàn)出較高濃度，也是多種腫瘤檢測的重要指標。但單一檢測AFP水平會存在特異性不足，檢測效果并不理想[12]。PIVKA-Ⅱ是近年來新發(fā)現(xiàn)檢測原發(fā)性肝癌的標志物，其是由于癌細胞對凝血酶原前體合成產(chǎn)生異常，導(dǎo)致凝血酶原前體不足所生成的蛋白質(zhì)。PIVKA-Ⅱ可參與癌細胞的進展，在原發(fā)性肝癌診斷中敏感性要優(yōu)于AFP，并具有更高的特異性[13-15]。因此，臨床上采取多種血清指標聯(lián)合檢測以提高診斷的準確率。

本研究結(jié)果顯示，原發(fā)性肝癌患者血清AFP水平顯著高于正常人群，且Ⅱ期患者血清AFP水平明顯低于Ⅲ期、Ⅳ期患者，Ⅲ期患者血清AFP 水平低于Ⅳ期患者[16]。提示，血清AFP 在原發(fā)性肝癌患者中含量偏高，且會隨著病情的嚴重程度而升高，可作為診斷原發(fā)性肝癌的重要指標。與周淑燕等[17]研究結(jié)果相似，血清AFP水平隨著疾病的嚴重而升高，其與疾病的嚴重性及病情進展密切相關(guān)。分析其原因可能是，AFP是人體內(nèi)的一種糖蛋白，主要來源于胎兒肝細胞和卵黃囊。胎兒肝細胞由于未發(fā)育完全，會分泌出大量的AFP，在胎兒出生約兩周后，AFP 會在血液里消失，因此，正常人的AFP 含量一般在10 mAU/mL 以下。而原發(fā)性肝癌細胞是沒有分化完成的細胞，所以會在血清里分泌大量AFP。這也充分證明AFP 水平變化在原發(fā)性肝癌的診斷價值。當原發(fā)性肝癌患者病情嚴重，血清PIVKA-Ⅱ水平會隨之升高，可作為原發(fā)性肝癌的發(fā)病機制[18]。分析其原因可能是，PIVKA-Ⅱ是凝血功能異常產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，癌細胞會直接影響凝血功能，導(dǎo)致凝血酶過度表達，從而在血清中產(chǎn)生大量的PIVKA-Ⅱ。原發(fā)性肝癌患者血清PIVKA-Ⅱ含量越高，反映出病情的嚴重程度，也充分說明PIVKA-Ⅱ的水平變化對原發(fā)性肝癌的診斷價值。

本研究結(jié)果顯示，AFP診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線下面積為0.805，95%CI 為0.723～0.888，PIVKA-Ⅱ診斷原發(fā)性肝癌的ROC 曲線下面積為0.678，95%CI為0.577～0.779，AFP+PIVKA-Ⅱ診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線下面積為0.914，95%CI為0.890～0.939；且聯(lián)合檢測AFP+PIVKA-Ⅱ的特異度、準確度分別為92.67%、93.53%。邢瑞青等[18]研究也顯示，AFP+PIVKA-Ⅱ聯(lián)合檢測高于各種指標單獨檢測的診斷效能，對原發(fā)性肝癌早期預(yù)防更有意義，與本研究結(jié)果相似。本研究結(jié)果還顯示，AFP+PIVKA-Ⅱ聯(lián)合檢測的敏感度、特異度及準確度為96.43%、92.86%及94.64%，均明顯高于AFP的82.14%、76.79%、79.62%和PIVKA-Ⅱ的82.14%、75.00%、77.68%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。其原因可能是，AFP+PIVKA-Ⅱ聯(lián)合檢測可為檢驗變量提高敏感性和特異性，更有助于預(yù)測原發(fā)性肝癌嚴重程度，提升診斷效能，且診斷價值高。

綜上所述，在原發(fā)性肝癌患者中AFP、PIVKA-Ⅱ的表達和病情嚴重程度之間存在著密切關(guān)系，為靶向藥物治療原發(fā)性肝癌提供了新思路，且聯(lián)合檢測具有較高的特異度、準確度，臨床應(yīng)用價值高。但本研究時間較短，樣本量不足，為更深入地探討治療機制，后期將開展大樣本、多中心隨機對照研究，以便更好地指導(dǎo)臨床工作。