熱比古麗?沙吾提 王甜

摘 要：在水質(zhì)環(huán)境的監(jiān)測中，微生物檢測是一項重要內(nèi)容。與化學(xué)檢驗不同，水質(zhì)微生物檢驗是一個不斷變化的生物體。在微生物檢驗中由于檢測結(jié)果的準確性受多方面因素的影響，因此，只有加強對微生物檢驗質(zhì)量的控制，才能確保檢測結(jié)果準確無誤。

關(guān)鍵詞：水質(zhì)微生物檢測 ?影響因素 ?質(zhì)量控制

引言

本文從人員、環(huán)境、儀器設(shè)備、培養(yǎng)基、樣品的采集這五個方面闡述了影響水質(zhì)微生物檢驗的相關(guān)因素，并從各個環(huán)節(jié)著手，希望通過加強水質(zhì)微生物檢測的質(zhì)量控制來提高微生物檢驗工作的質(zhì)量，進而保證檢驗檢測結(jié)果準確可靠。

1 常見水質(zhì)微生物檢測結(jié)果的影響因素

1.1 人員

微生物檢驗人員上崗前應(yīng)接受與其所承擔的工作任務(wù)相適應(yīng)的培訓(xùn)，并對培訓(xùn)技能進行資格確認后取得上崗證。檢驗人員需熟悉所承擔檢驗項目的相關(guān)標準、規(guī)范和操作規(guī)程，能獨立負責(zé)并正確評價檢測結(jié)果;熟練掌握所用儀器設(shè)備的性能和使用方法，并嚴格按照操作規(guī)程進行操作;還應(yīng)熟悉微生物檢驗檢測安全操作知識和消毒知識。

1.2 儀器設(shè)備

微生物實驗室的儀器設(shè)備應(yīng)以一臺一檔的方式建立檔案，檔案則應(yīng)當包含其基本信息。此外，每臺儀器應(yīng)安排保管人員負責(zé)儀器設(shè)備的保管和日常維護。目前，微生物實驗室常用的儀器設(shè)備包括：冰箱、培養(yǎng)箱、高壓滅菌器、超凈工作臺、顯微鏡、溫度計、紫外燈等。使用儀器設(shè)備的人員必須熟悉和掌握操作規(guī)程，防止操作不當造成事故。

1.3 環(huán)境設(shè)施

水質(zhì)微生物檢測很大程度上會受環(huán)境影響，因此需要做到如下幾點。第一，保持實驗室內(nèi)良好的通風(fēng)和無塵狀態(tài)——為減少灰塵、大氣流、溫度變化等因素產(chǎn)生的影響，安裝空調(diào)是解決這些影響因素的最佳方式之一。第二，每次接種前，需將無菌室用紫外燈消毒30分鐘，消毒完畢后關(guān)閉紫外燈，等待30分鐘后人員方可進入無菌室;人員進入無菌室后需打開超凈工作臺后方可工作;工作完畢后需再次將紫外燈打開殺菌。第三，微生物檢驗室應(yīng)盡量避免外來人員出入，以減少空氣流動，避免不潔空氣的帶入。第四，在樣品移至無菌室前，須先將采樣瓶體外壁用酒精棉擦拭，然后換上無菌工作服和拖鞋，戴好手套、口罩等，再將其移至無菌室內(nèi)，從而避免與實驗室內(nèi)部環(huán)境發(fā)生交叉污染。第五，無菌室應(yīng)定期進行沉降菌的測試和環(huán)境的驗證，環(huán)境合格后才能開展檢測工作。沉降菌的測試方法[1]為，采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）配制的培養(yǎng)皿采樣后，置于30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于2d。每批培養(yǎng)基均應(yīng)設(shè)置對照試驗，以檢驗培養(yǎng)基本身是否被污染。

1.4 樣品的采集和保存

1.4.1 樣品的采集

水樣應(yīng)使用121℃經(jīng)15min高壓滅菌處理的玻璃瓶采集。同一水源且同一時間采集幾類檢測指標的水樣時，應(yīng)先采集供檢測微生物指標的水樣，且采樣時應(yīng)直接采集，不得用水樣涮洗已滅菌的采樣瓶，以避免手指和其他物品沾污瓶口[2]。

1.4.2 樣品保存

采集的水樣應(yīng)立即送檢，時間不得超過2小時。如無法及時送檢，應(yīng)將樣品置于冰箱中，但不得超過24小時，否則會影響檢測結(jié)果[3]。

1.5 培養(yǎng)基的制備

培養(yǎng)基是促使微生物生長繁殖、分離微生物純種，以及鑒別微生物的營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基的制備是微生物檢測工作中最為重要的環(huán)節(jié)之一。培養(yǎng)基經(jīng)過稱量-調(diào)整pH值-加熱煮沸-過濾-分裝容器-滅菌-備用等一系列制備過程后，應(yīng)能達到微生物生長所需的要求，如未能達到要求，微生物就不容易生長或不生長。由于培養(yǎng)基富含營養(yǎng)物質(zhì)，易被污染或變質(zhì)，故配好后不宜久置，最好現(xiàn)配現(xiàn)用。此外，培養(yǎng)基的質(zhì)量、配制過程及保存方式都會直接影響檢測結(jié)果的準確性。

2 水質(zhì)微生物檢測結(jié)果的質(zhì)量控制

2.1 提高檢驗人員的素質(zhì)水平

檢驗人員自身素質(zhì)水平的高低會直接影響到微生物檢驗結(jié)果的準確性，因此可采取以下控制措施。

①檢驗人員要嚴格規(guī)范檢驗操作流程，在實驗中對每個操作步驟、每個檢測環(huán)境都做到嚴密監(jiān)控。

②提高每位檢驗人員的素質(zhì)和專業(yè)技能，經(jīng)常針對檢驗人員進行專業(yè)知識和操作技能的培訓(xùn)，確保每位檢驗人員以高度的責(zé)任心做好每個檢驗環(huán)節(jié)，從而提高微生物檢驗的準確性。

③采集樣品時要嚴格控制樣品質(zhì)量，因為樣品質(zhì)量的好壞將直接影響最終檢驗結(jié)果的準確性。因此，在進行檢驗樣品的采集、處理、運送及儲存時，一定要按照操作流程嚴格操作，這樣才能夠有效提高檢驗的質(zhì)量。

2.2 做好培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

①每一批新購進的培養(yǎng)基一定要由專人仔細核對其名稱、規(guī)格、數(shù)量、成分、外觀特征、批號、保質(zhì)期等是否符合要求，并做好記錄[4]。

②每次配制好的培養(yǎng)基應(yīng)填寫好《培養(yǎng)基配置記錄表》，且必須選取部分培養(yǎng)基放置于36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時，無雜菌生長即可待用。如發(fā)現(xiàn)破裂、水分侵入、色澤異常、有菌生長等，均應(yīng)挑出棄用。

③已制備好的的培養(yǎng)基不宜保存過久，應(yīng)存放于4℃冰箱內(nèi)。同時，每批培養(yǎng)基應(yīng)注明名稱及配置日期。

2.3 加強檢測環(huán)境及儀器設(shè)備的管理

微生物實驗室應(yīng)具備監(jiān)測和控制環(huán)境條件的能力——組織人員對環(huán)境進行監(jiān)控，并保存好相應(yīng)的環(huán)境監(jiān)控記錄。同時，應(yīng)保證工作環(huán)境滿足檢驗檢測工作的要求——當環(huán)境條件不利于檢驗檢測工作的開展時，應(yīng)停止檢驗檢測活動，在進行有效處置后方可恢復(fù)。在水質(zhì)微生物檢測工作中，工作環(huán)境要滿足相關(guān)檢驗檢測標準或技術(shù)規(guī)范的要求，特別要對無菌室進行定期消毒，確保檢驗環(huán)境的無菌狀態(tài)，從而保證檢測結(jié)果準確可靠。

凡對檢驗檢測結(jié)果的準確性有顯著影響的儀器設(shè)備，在投入使用前必須經(jīng)過法定計量機構(gòu)的檢定或校準。此外，使用中的儀器設(shè)備需按規(guī)定時間定期檢定并進行日常維護，確保其功能正常并防止性能退化，進而保證檢驗檢測結(jié)果的質(zhì)量。

2.4 實驗室間質(zhì)量控制

為了保證檢驗檢測結(jié)果的準確性，實驗室除內(nèi)部質(zhì)量控制外，還需建立實驗室間質(zhì)量控制制度。開展實驗室間比對能不斷提高實驗室的檢測能力，監(jiān)控實驗室的持續(xù)能力，從而識別并縮小實驗室之間檢測結(jié)果的差異，提高各實驗室間的微生物檢驗質(zhì)量，進而獲得可比性較高的準確檢驗結(jié)果。

參考文獻：

[1] GB/T 16294-2010《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法》[S].

[2] GB 5750.12-2006《生活飲用水標準檢驗方法水樣的采集與保存》[S].

[3] GB 17378.7-2007《海洋監(jiān)測規(guī)范》第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測[S].

[4] 劉榮華.微生物檢測中培養(yǎng)基的制備及注意事項[J].當代臨床醫(yī)刊，2015，28（1）：1236.