張雪嬌 高丁 石衛(wèi)華
尋常型銀屑?。╬soriasis vulgaris ,PV)為臨床常見慢性炎癥性皮膚病,臨床表現(xiàn)為紅色丘疹、銀白色鱗屑,具有病程長,易復發(fā)等特點,約30%銀屑病患者發(fā)病機制與遺傳、免疫、感染及環(huán)境等因素相關[1-3]。目前,部分學者認為PV 發(fā)生、發(fā)展同細胞間信息傳遞異常有關。相關研究指出,Cx26蛋白為縫隙連接功能單位,主要作用于細胞間信息傳遞,Cx26 蛋白高表達可能與PV 發(fā)病相關,但PV 患者Cx26 蛋白水平是否與健康人群有別,臨床研究較少[4-6]。基于此,本研究選取我院PV 患者60 例,旨在探究皮損組織Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達與其皮損面積和嚴重程度指數(shù)(psoriasis area and severity index ,PASI)評分的關聯(lián)性?,F(xiàn)報告如下。
經(jīng)本院倫理委員會審批通過,2018 年7 月—2019 年7 月選取本院PV 患者60 例作為研究組,其中女24 例,男36 例;年齡24 ~65 歲,平均(44.12±8.12)歲;另選同期健康體檢者32例作為對照組,其中女14 例,男18 例;年齡25 ~67 歲,平均(43.78±7.89)歲。兩組基線資料差異無統(tǒng)計學意義(P >0.05)。
納入標準:(1)研究組患者均符合PV 相關診斷標準[7];(2)對照組均為體檢健康者;(3)所有研究對象均知曉本研究,已簽署同意書。排除標準:(1)膿皰型銀屑??;(2)有精神疾病史者;(3)關節(jié)病型銀屑??;(4)血液系統(tǒng)疾病患者;(5)合并其他腎臟疾病者;(6)免疫功能缺陷者。
1.3.1 標本采集 采用環(huán)鉆孔器獲取研究組皮損處組織及對照組正常皮膚組織,進行液氮速凍保存。
1.3.2 檢測方法 采用免疫熒光染色法和B203LED 型光學顯微鏡(重慶奧特光學儀器有限公司)檢測皮損組織Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平,所用免疫組化試劑盒、DAB 顯色試劑盒、基因組擴增試劑盒均購自美國Sigma 公司,由相同檢驗科高年資醫(yī)師嚴格依照儀器、試劑盒說明書完成操作規(guī)程。
(1)比較兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平。(2)比較研究組不同病情程度之間(輕度、中度、重度)Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平。病情程度根據(jù)PASI 評分分級,重度≥30 分、中度15 ~29 分、輕度<15 分[8]。PASI 評分=皮損面積×[0.1×(Dh+Ih+Eh)+0.2×(Du+Iu+Eu)+0.3×(Dl+Il+El)+0.4×(Dt+It+Et)],E:紅斑,I:浸潤,D:鱗屑,h:頭(包括頸),u:上肢,t:下肢,l:軀干。皮疹部位均為5 個等級:0 ~4分。皮損面積為0 ~6 分,總分0 ~72 分,得分越高,皮損越嚴重。(3)Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平與PASI 評分的關聯(lián)性。
研究組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平均高于對照組(P<0.05),見表1。
研究組輕度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平低于中度,中度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平低于重度(P<0.05),見表2。
經(jīng)Pearson 分析可知,PASI 評分與Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平存在明顯正相關關系(r1=0.625,P1=0.004;r2=0.541,P2=0.012)。
Cx 蛋白為細胞縫隙連接基本功能單位,細胞之間通過縫隙連接進行物質(zhì)、信息及能量傳遞交換,Cx 蛋白水平可直接影響細胞增殖、分化、新陳代謝[9-10]。相關研究指出,Cx26 可調(diào)節(jié)細胞間信息傳遞及分化,于機體毛囊外毛根鞘及內(nèi)耳呈現(xiàn)高表達,Cx26異常突變與皮膚損傷、耳聾密切相關[11-12]。本研究結(jié)果顯示,研究組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平均高于對照組,提示PV患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平呈異常高表達狀態(tài)。相關研究指出,PASI 評分系統(tǒng)對評估銀屑病患者病情嚴重程度及預后具有重要臨床意義,評分越高皮損越嚴重[13]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),研究組輕度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平低于中度,中度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平低于重度,可見,隨著銀屑病患者PASI 評分升高,Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平逐漸升高;進一步經(jīng)Spearman 分析可知,PASI 評分與Cx26蛋白含量及信使RNA 表達水平存在明顯正相關關系。可見,Cx26蛋白含量及信使RNA 表達水平與PASI 評分關系密切,動態(tài)監(jiān)測Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平有助于判斷銀屑病患者病情進展及嚴重程度。
表1 兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平比較()
表1 兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平比較()
組別 例數(shù) Cx26 蛋白含量 Cx26 信使RNA研究組 60 0.60±0.04 1.76±0.09對照組 32 0.38±0.03 1.48±0.06 t 值 - 29.752 17.824 P 值 - <0.001 <0.001
表2 研究組不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平比較()
表2 研究組不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平比較()
注:a 表示與中度比較,P <0.05;b 表示與重度比較,P <0.05
病情程度 例數(shù) Cx26 蛋白含量(bp) Cx26 信使RNA(ng/mL)輕度 20 0.48±0.02a 1.56±0.08a中度 26 0.59±0.04b 1.78±0.09b重度 14 0.72±0.05 1.94±0.11 F 值 - 169.432 73.922 P 值 - <0.001 <0.001
綜上所述,PV 患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平與PASI 評分密切相關,可作為評判疾病進展、預后的指標,為臨床治療提供指導依據(jù)。