亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        血管內(nèi)皮生長因子基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥的相關(guān)性

        2020-06-11 11:49:06谷杭芝張徐王光演林蓉蓉胡燕
        關(guān)鍵詞:內(nèi)異癥內(nèi)異等位基因

        谷杭芝,張徐,王光演,林蓉蓉,胡燕

        (溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科,浙江溫州325015)

        子宮內(nèi)膜異位癥(簡稱內(nèi)異癥)是一種婦科的常見疾病,是以宮腔以外部位(卵巢、大網(wǎng)膜、子宮直腸陷凹、腹壁、肺等)的活性子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖、浸潤為特點(diǎn),在育齡期婦女的發(fā)病率為5%~10%,可引起頑固性、進(jìn)展性、慢性盆腔疼痛,可導(dǎo)致不孕、月經(jīng)異常,甚至有惡變的風(fēng)險(xiǎn),嚴(yán)重影響育齡婦女的身心健康[1]。血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是內(nèi)皮細(xì)胞的特異性絲裂原,是目前已知的作用最強(qiáng)的促血管生成因子之一,在血管生成過程中有十分重要的作用,同時(shí)也是一種有效的血管通透性誘導(dǎo)因子[2]。有研究表明VEGF的高表達(dá)與內(nèi)異癥的發(fā)生發(fā)展相關(guān)[3],證明在內(nèi)異癥的發(fā)病過程中VEGF是一個(gè)重要的因子。對(duì)于VEGF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥易感的關(guān)系,國外已有較多關(guān)于VEGF+405G/C、-460C/T、-634G/C、+936C/T、-1154G/A、-2578C/A等位點(diǎn)與內(nèi)異癥的相關(guān)研究已見報(bào)道[4-8]。而VEGF的rs3025040C/T、rs10434G/A兩位點(diǎn)與內(nèi)異癥相關(guān)的研究卻尚未見報(bào)道。本研究采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片斷長度多態(tài)性(polymorphismchainreactionandrestrictionfragmentlengthpolymorphismanalysis,PCR-RFLP)分析技術(shù)對(duì)溫州地區(qū)內(nèi)異癥患者和非內(nèi)異癥婦女的VEGF-rs3025040C/T、rs10434G/A位點(diǎn)基因多態(tài)性進(jìn)行檢測,以探討VEGF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥遺傳易感性的關(guān)系。

        1 資料和方法

        1.1 一般資料 選取2014年3月至2015年3月在溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科接受腹腔鏡手術(shù)的患者150例,術(shù)后標(biāo)本均經(jīng)過病理學(xué)證實(shí)為內(nèi)異癥,列為內(nèi)異癥組。嚴(yán)格按照美國生育學(xué)會(huì)1985年修訂的內(nèi)異癥分期標(biāo)準(zhǔn)(r-AFS)將所有內(nèi)異癥組患者進(jìn)行分期,其中I-II期內(nèi)異癥患者50 例,III-IV期患者100例。隨機(jī)選取同時(shí)期本院健康體檢者150例為對(duì)照組,通過詢問既往史結(jié)合相關(guān)化驗(yàn)檢查后排除內(nèi)異癥。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

        1.2 試劑與儀器 血液基因組DNA提取試劑盒、2×TaqPCRMasterMix、50bpDNAladder、100bpDNAladder、DNAloadingbuffer購自天根生化科技(北京)有限公司,限制性內(nèi)切酶AluI、HaeIII、HpaII購自NEB(北京)有限公司,紫外分光光度計(jì)購自美國Thermo公司,電泳儀購自北京百晶生物技術(shù)有限公司,PCR擴(kuò)增儀購自德國MastercyclergradientEppendorf公司。

        1.3 方法

        1.3.1 基因組DNA提?。簾o菌操作下采集外周靜脈血至少5mL,加入內(nèi)置有0.85mL枸櫞酸鈉的試管中,混勻,放置于4℃冰箱保存?zhèn)溆茫?周內(nèi)檢測)。按照血液基因組DNA提取試劑盒說明書操作提取基因組NDA。

        1.3.2 基因多態(tài)性檢測:基因檢測采用PCR-RFLP技術(shù)。PCR反應(yīng)體積為20μL體系,其中模板1μg,上游引物1μL,下游引物1μL,2×TaqPCRMasterMix10μL,雙蒸水補(bǔ)足至20μL。酶切體系為:PCR擴(kuò)增產(chǎn)物2.5μL、10×Buffer1μL、三蒸水6.3μL、限制性內(nèi)切酶0.2μL,恒溫水浴4h。將酶切產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳,電腦成像系統(tǒng)成像分析。各位點(diǎn)引物序列、限制性內(nèi)切酶及其酶切產(chǎn)物長度見表1-2。

        表1 VEGF基因位點(diǎn)多態(tài)序列

        表2 各位點(diǎn)特異引物及限制性內(nèi)切酶

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 采用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件,組間的基因型及等位基因比較采用χ2檢驗(yàn)。等位基因的相對(duì)危險(xiǎn)度用OR值和95%CI表示。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 對(duì)照組Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn) 應(yīng)用Hardy- Weinberg公式計(jì)算出對(duì)照組中VEGF-rs3025040和VEGF-rs10434基因型頻率觀察數(shù)與期望數(shù),兩者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),表明本研究對(duì)照組資料具有群體代表性(見表3)。

        表3 Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)

        2.2 2組VEGF-rs3025040C/T位點(diǎn)多態(tài)性等位基因和基因型分布及比較 內(nèi)異癥組VEGF-rs3025040C/T位點(diǎn)等位基因C頻率顯著高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=23.762,P <0.001,OR=1.800,95%CI=1.410~2.298),提示在VEGF-rs3025040C/T位點(diǎn)上攜帶有C等位基因的婦女患有內(nèi)異癥風(fēng)險(xiǎn)是攜帶T等位基因婦女的1.800倍。內(nèi)異癥組VEGFrs3025040C/T位點(diǎn)多態(tài)性存在CC、CT、TT3種基因型,2組基因型分布比較結(jié)果顯示,在不同基因型分布上2組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=43.509,P<0.001)。見表4。

        2.3 2組VEG-rs10434G/A位點(diǎn)多態(tài)性等位基因和基因型分布及比較 2組VEGF-rs10434G/A位點(diǎn)等位基因分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=34.084,P<0.001,OR=1.340,95%CI=1.207~1.497),提示在VEGF-rs10434G/A位點(diǎn)上攜帶有A等位基因的婦女更易得內(nèi)異癥。VEGF-rs10434G/A位點(diǎn)多態(tài)性存在GG、GA、AA3種基因型,2組基因型比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=57.550,P<0.001)。見表4。

        表4 VEGF-rs3025040C/T位點(diǎn)和VEGF-rs10434G/A位點(diǎn)基因型和等位基因分布[每組n=150,頻數(shù)(%)]

        3 討論

        VEGF是FERRARA等[2]在牛垂體濾泡星狀細(xì)胞培養(yǎng)液中得到的一種寡二聚體糖蛋白,相對(duì)分子質(zhì)量為35~45kDa。VEGF是內(nèi)皮細(xì)胞的特異性絲裂原,是目前已知的作用最強(qiáng)的促血管生成因子之一,同時(shí)也是一種有效的血管通透性誘導(dǎo)因子[9]。目前已有的研究表明在內(nèi)異癥的發(fā)病過程中VEGF是一個(gè)重要的因子[10]。子宮內(nèi)膜脫落的內(nèi)膜碎片可能具有先天血管生成潛能。人的子宮內(nèi)膜由功能層和基底層組成,是唯一一個(gè)在卵巢類固醇激素-雌激素和孕激素調(diào)節(jié)下隨著月經(jīng)周期而發(fā)生周期性的增殖、分化、退化的器官。在每個(gè)月經(jīng)周期隨著內(nèi)膜的生長,內(nèi)膜血管系統(tǒng)在卵巢類固醇激素,尤其是雌激素的作用下經(jīng)歷著增殖和退化的變化。SHIFREN等[11]檢測了增殖期和分泌期功能層的VEGFmRNA增加程度,表明在每個(gè)月經(jīng)周期都有血管新生的發(fā)生。他進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),雌激素能刺激VEGF的表達(dá),與對(duì)照組相比,加了雌激素后VEGFmRNA的水平顯著升高。從理論上說內(nèi)異癥是由內(nèi)膜碎片在腹腔種植而成的。健康的內(nèi)膜在雌激素的調(diào)節(jié)下展現(xiàn)出了先天的血管生成潛能,并且在同一實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了VEGF的異常表達(dá)和雌激素水平的異常會(huì)促進(jìn)內(nèi)異病灶的新生血管生成。事實(shí)上,VEGF在促進(jìn)內(nèi)異癥的血管新生過程中起到了重要的作用。它是一種血管活性物質(zhì),在很多的生理過程包括創(chuàng)口愈合和內(nèi)膜的血管重建中調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移。在腫瘤的發(fā)生過程中,VEGF濃度與血管密度增加顯著相關(guān)。在正常的內(nèi)膜中,VEGF的mRNA和蛋白表達(dá)水平可被缺氧所驅(qū)動(dòng)[3]。與早期內(nèi)異癥患者和健康人相比,晚期內(nèi)異癥患者的腹腔液中具有更高濃度的VEGF[12]。另外,內(nèi)異癥患者腹腔液和血漿中升高的VEGF濃度與內(nèi)異癥病灶細(xì)胞的增殖活性和微血管密度呈正相關(guān)[13]。內(nèi)異癥病灶和腹腔巨噬細(xì)胞在雌孕激素的作用下會(huì)增加VEGF的表達(dá)[14-15],成為VEGF的來源。此外,不同類型的免疫細(xì)胞通過產(chǎn)生促炎性和血管生成細(xì)胞因子,同時(shí)又增加其在內(nèi)異癥病灶暴露的腹腔液中的濃度來參與血管形成[15]。LIN等[16]發(fā)現(xiàn)內(nèi)異癥病灶的血管形成發(fā)生在分泌VEGF的中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞向病灶和腹腔浸潤之后,闡明了免疫細(xì)胞的重要性,人類的子宮內(nèi)膜功能層具有獨(dú)特的在周期性脫落后出現(xiàn)周期性的增殖和退化的變化,因此子宮內(nèi)膜碎片進(jìn)入腹腔后仍具有血管生成能力。

        人的VEGF基因位于染色體的6p21.3,長14kb,由8 個(gè)外顯子和7 個(gè)內(nèi)含子交替組成。VEGF基因至少有30 個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn),如+405G/C、-460C/T、-634G/C、+936C/T、-1154G/A、-2578C/A等。這些基因多態(tài)性可能通過影響VEGF的轉(zhuǎn)錄或表達(dá)而影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后。對(duì)于VEGF基因多態(tài)性與內(nèi)異癥易感的關(guān)系國外有較多報(bào)道。ALTINKAYA等[5]研究表明+405G/CG等位基因的存在與內(nèi)異癥的發(fā)病有關(guān)。有研究[17-18]指出,VEGF-460C/T和+405G/C多態(tài)存在連鎖不平衡,-460T/+405C單倍型與低啟動(dòng)子活性有關(guān),攜帶+405G等位基因可能增加內(nèi)異癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn);KIM等[8]報(bào)道韓國婦女?dāng)y帶CC基因型的罹患風(fēng)險(xiǎn)增加1.99倍;早期IKUHASHI等[7]研究發(fā)現(xiàn)VEGF+936C/T的T等位基因可能增加III-IV期內(nèi)異癥的患病風(fēng)險(xiǎn),HENIDI等[6]也得到了相似的結(jié)果。而林蓉蓉等[19]研究發(fā)現(xiàn)MIF基因多態(tài)性與腹壁內(nèi)異癥遺傳易感性相關(guān),提示我們基因多態(tài)性與內(nèi)異癥的發(fā)生相關(guān)。劉青等[20]研究發(fā)現(xiàn)攜帶VEGF-1154GG和-2578CC基因型顯著增加內(nèi)異癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),而其中單倍型VEGF-460/-1154/-2578TGC、CAA、TAA和TAC與內(nèi)異癥的發(fā)病明顯相關(guān)。VEGF+936C/T基因多態(tài)性可能與內(nèi)異癥的發(fā)生發(fā)展有關(guān),C等位基因可能是內(nèi)異癥的易感基因[21]。

        而在本研究中新納入的2 個(gè)VEGF多態(tài)性位點(diǎn)rs3025040C/T和rs10434G/A在內(nèi)異癥發(fā)病中均具有顯著性意義,rs3025040C/T的C等位基因和rs10434G/A位點(diǎn)的A等位基因均增加內(nèi)異癥的罹患風(fēng)險(xiǎn),為預(yù)測婦女內(nèi)異癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),篩選出高風(fēng)險(xiǎn)的婦女,盡可能降低發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),或積極干預(yù)減輕病情進(jìn)展奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。但VEGFrs3025040C/T的C等位基因和rs10434G/A位點(diǎn)的A等位基因,如何調(diào)控內(nèi)異癥的發(fā)生發(fā)展,有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

        猜你喜歡
        內(nèi)異癥內(nèi)異等位基因
        羅氏內(nèi)異方治療子宮內(nèi)膜異位癥的研究進(jìn)展
        親子鑒定中男性個(gè)體Amelogenin基因座異常1例
        智慧健康(2021年17期)2021-07-30 14:38:32
        山東大學(xué)齊魯醫(yī)院2007至2017年子宮內(nèi)膜異位癥手術(shù)治療特點(diǎn)及發(fā)展趨勢(shì)
        內(nèi)異方抑制信號(hào)通路改善子宮內(nèi)膜異位癥大鼠缺氧及炎性微環(huán)境
        E-cad啟動(dòng)子區(qū)甲基化與其在子宮內(nèi)膜異位癥的表達(dá)的相關(guān)性分析
        人人健康(2019年7期)2019-05-08 07:25:00
        子宮內(nèi)膜異位癥(內(nèi)異癥)術(shù)后復(fù)發(fā)的相關(guān)因素調(diào)查分析
        內(nèi)異康復(fù)片調(diào)控GPER-Ras-STAT3通路治療子宮腺肌病的機(jī)制
        中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:19
        WHOHLA命名委員會(huì)命名的新等位基因HLA-A*24∶327序列分析及確認(rèn)
        DXS101基因座稀有等位基因的確認(rèn)1例
        青春期子宮內(nèi)膜異位癥的診斷、治療
        国产激情无码Av毛片久久| 亚洲一区二区三区无码久久| 67194熟妇在线永久免费观看| 亚洲精品第一国产麻豆| 国产精品一区二区久久精品蜜臀| 久久国产在线精品观看| 无码精品人妻一区二区三区av| 美女胸又www又黄的网站| 亚洲精品白浆高清久久| 亚洲天堂亚洲天堂亚洲色图| 日韩av激情在线观看| 最新亚洲人成无码网www电影| 亚洲欧美v国产蜜芽tv| 中文字幕在线乱码亚洲| 性色av免费网站| 91麻豆国产香蕉久久精品| 国产美女久久久亚洲综合| av天堂最新在线播放| 免费看黄a级毛片| 亚洲男女免费视频| 亚洲一区有码在线观看| 红桃av一区二区三区在线无码av | 亚洲av成人永久网站一区| 日本成本人片视频免费| 又爆又大又粗又硬又黄的a片| 亚洲av中文aⅴ无码av不卡| 美腿丝袜日韩在线观看| 国产h视频在线观看| 在线欧美不卡| 日本高清在线一区二区三区| 亚洲va久久久噜噜噜久久天堂| 亚洲色欲久久久久综合网| 久久精品中文字幕第一页| 日本成人精品在线播放| 中文无码日韩欧| 亚洲AV永久无码精品导航| 我的极品小姨在线观看| a级国产乱理伦片| 全免费a级毛片免费看视频| 亚洲av日韩一区二三四五六七| 国产高清乱码又大又圆|