李 陽 何永紅 黃宏超 魏文峰

（1.廣東醫(yī)科大學(xué)順德婦女兒童醫(yī)院內(nèi)科，廣東佛山528300；2.廣東省開平市婦幼保健院，廣東江門529300）

心肌肥厚（Cardiac hypertrophy）是形成心力衰竭的病理生理基礎(chǔ)。心肌肥厚表現(xiàn)為心肌細(xì)胞蛋白合成增加、直徑增寬或長度增加、體積增大、纖維組織增生、心肌肌節(jié)數(shù)量增多以及胚胎基因再表達(dá)。目前臨床上一致認(rèn)為心肌肥厚是心力衰竭、腦卒中、冠心病、猝死等的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[1-2]。在臨床上醫(yī)務(wù)人員會常規(guī)選擇血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑（ACEI）、血管緊張素受體阻斷劑（ARB）、醛固酮拮抗劑等藥物治療心肌肥厚及心力衰竭[3]。大量的研究已經(jīng)證明，病理性心肌肥厚是引起病人心力衰竭和猝死的主要原因，如何延緩或逆轉(zhuǎn)這種心肌重構(gòu)、改善預(yù)后一直是心血管領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)所在[4]。本研究旨在探明心肌重構(gòu)的發(fā)生和防控機(jī)制，預(yù)期為心肌肥厚性疾病的治療提供新的思路、方法及實(shí)驗(yàn)依據(jù)，對提高肥厚性心肌疾病病人的生活和生存質(zhì)量、延緩惡性發(fā)展進(jìn)程、改善預(yù)后有積極的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組：40 只成年雄性SD 大鼠購自暨南大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心，并在該中心完成制模。大鼠飼養(yǎng)在SPF 級動物實(shí)驗(yàn)室，溫度為（22±2）℃，12 h循環(huán)晝夜光照。動物分組：40 只SD 雄性大鼠隨機(jī)分為5 組，即：空白組、模型組、4 mg/（kg·d）瑞舒伐他汀組、厄貝沙坦［15 mg/（kg·d）］組、瑞舒伐他汀組加厄貝沙坦組，每組8 只?？瞻捉M皮下注射生理鹽水1mL，其他各組異丙腎上腺素每天2mg/kg 腹部皮下注射，自由飲水及進(jìn)食，連續(xù)14d 得到心肌肥厚模型。造模成功后第1 天，將瑞舒伐他汀和厄貝沙坦研磨成粉，溶于少量蒸餾水中制成懸液，采用灌胃法給藥；空白組和模型組大鼠均用等量生理鹽水灌胃。每日上午定時1 次，共8 周。

1.2 觀察指標(biāo)：取各組大鼠8 周后腹主動脈血2mL，酶聯(lián)免疫檢測試劑盒檢測血漿血管緊張素II含量；游離大鼠心臟及左室并稱重，計(jì)算心臟質(zhì)量指數(shù)、左室質(zhì)量指數(shù)；HE 染色觀察5 組心肌組織病理切片左室橫截面細(xì)胞面積；采用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒檢測ANF mRNA 及AT1mRNA 表達(dá)；Bio-Rad GelDoc EZ 凝膠成像系統(tǒng)采用Western 印跡法檢測心肌AT1 蛋白受體的表達(dá)。目的基因相對表達(dá)量=目的基因光密度值/GAPDH 光密度值。目的蛋白表達(dá)量=目的蛋白光密度值/β-actin 光密度值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：運(yùn)用SPSS 17.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用單因素方差分析，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 5 組大鼠心臟質(zhì)量指數(shù)、左室橫截面細(xì)胞面積、血管緊張素II 及左心室質(zhì)量指數(shù)比較：結(jié)果詳見表1。

表1 心臟質(zhì)量指數(shù)、左室橫截面細(xì)胞面積、血管緊張素II及左心室質(zhì)量指數(shù)比較 （±s）

表1 心臟質(zhì)量指數(shù)、左室橫截面細(xì)胞面積、血管緊張素II及左心室質(zhì)量指數(shù)比較 （±s）

注：#表示與空白組比較，P＜0.05；與模型組比較，*P＜0.05；與聯(lián)合組比較，#P＜0.05

左心室質(zhì)量指數(shù)（mg/g）空白組 8 3.62±0.21 214.8±18.4 69.8±13.6 2.77±0.11模型組 8 4.46±0.37# 553.7±40.9# 116.2±26.1＃ 3.45±0.21#瑞舒伐他汀組 8 4.12±0.29* 438.1±36.3* 89.5±19.5* 3.17±0.18*厄貝沙坦組 8 3.99±0.26* 441.6±37.1* 93.2±20.1* 3.31±0.20*聯(lián)合組 8 3.76±0.20* 352.4±26.7* 80.3±16.6* 3.06±0.16*組別 n 心臟質(zhì)量指數(shù)（mg/g）左室橫截面細(xì)胞面積（μm2）血管緊張素II（pg）

2.2 5 組大鼠AT1R 蛋白、AT1RmRNA 及ANFmRNA表達(dá)比較：結(jié)果詳見表2。

3 討論

近年來，國內(nèi)外文獻(xiàn)均報(bào)道他汀類藥物可以通過調(diào)控多條不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑（包括通過減少AT1 受體的表達(dá)和/或抑制心肌細(xì)胞的血管緊張素I 轉(zhuǎn)化酶的活性而實(shí)現(xiàn)）抑制心肌肥厚的發(fā)生、發(fā)展，減輕心室重構(gòu)，改善心室的收縮及舒張功能，從而延長由心肌肥厚到心衰的過渡期，降低心臟疾病的死亡率，為防治心肌肥厚開創(chuàng)了新的途徑[5-6]。研究表明他汀類藥物除具降血脂作用，還具有抗炎、抗氧化、改善血管內(nèi)皮功能、抗心肌重構(gòu)、穩(wěn)定動脈粥樣硬化斑塊、治療心衰等其他心血管保護(hù)作用[7]。國內(nèi)外文獻(xiàn)均報(bào)道他汀可以通過對多條不同信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)控，發(fā)揮改善心室重構(gòu)及抗心肌肥厚的作用。而ARB 類藥物抑制心肌細(xì)胞增生，延遲或逆轉(zhuǎn)心肌肥厚的作用目前已經(jīng)得到廣泛認(rèn)同，這2 種不同藥理作用機(jī)制的藥物聯(lián)合應(yīng)用理論上應(yīng)能產(chǎn)生累積或協(xié)同效應(yīng)[8-9]。

表2 5 組大鼠AT1R 蛋白、AT1RmRNA 及ANFmRNA 表達(dá)比較 （±s）

表2 5 組大鼠AT1R 蛋白、AT1RmRNA 及ANFmRNA 表達(dá)比較 （±s）

注：#表示與空白組比較，P＜0.05；與模型組比較，*P＜0.05；與聯(lián)合組比較，#P＜0.05

組別 n AT1R 蛋白 ANFmRNA AT1RmRNA空白組 8 0.61±0.12 0.51±0.08 0.57±0.10模型組 8 1.09±0.22# 1.03±0.21# 0.95±0.20#瑞舒伐他汀組 8 0.87±0.15* 0.85±0.15* 0.79±0.16*厄貝沙坦組 8 0.82±0.14* 0.77±0.12* 0.81±0.17*聯(lián)合組 8 0.68±0.13* 0.63±0.14* 0.67±0.14*

瑞舒伐他汀及厄貝沙坦作為臨床常用的抗心肌肥厚藥物，但目前很少有研究關(guān)于二者聯(lián)合用藥能否有效發(fā)揮協(xié)同抗心肌肥厚作用[10]。本實(shí)驗(yàn)通過注射異丙腎上腺素構(gòu)建心肌肥厚大鼠模型，觀察瑞舒伐他汀、厄貝沙坦以及聯(lián)合用藥的抗心肌肥厚作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組心臟質(zhì)量指數(shù)、左室橫截面細(xì)胞面積、血管緊張素II 及左心室質(zhì)量指數(shù)明顯高于空白組；而瑞舒伐他汀組、厄貝沙坦組及聯(lián)合組明顯低于模型組，且聯(lián)合組降低最顯著，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示瑞舒伐他汀組和厄貝沙坦能夠有效逆轉(zhuǎn)模型大鼠心肌肥厚，且二者聯(lián)合效果更佳。其原因可能是由于瑞舒伐他汀作為HMG-CoA 還原酶抑制劑，可通過下調(diào)AT1 受體的基因表達(dá)來抑制心肌細(xì)胞肥大；而厄貝沙坦可通過阻斷Ang Ⅱ與AT1 受體結(jié)合及降低心肌Ang Ⅱ水平及AT1受體的親和力，從而逆轉(zhuǎn)左室肥厚，二者聯(lián)合作用可以更加顯著地逆轉(zhuǎn)模型大鼠心肌肥厚[11]。此外，我們的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組AT1R 蛋白、AT1RmRNA及ANFmRNA 表達(dá)明顯高于空白組；而瑞舒伐他汀組、厄貝沙坦組及聯(lián)合組明顯低于模型組，且聯(lián)合組降低最顯著。提示瑞舒伐他汀聯(lián)合厄貝沙坦可以通過降低AT1R 蛋白、AT1RmRNA 及ANFmRNA途徑顯著改善高血壓模型大鼠心肌重構(gòu)作用。其可能機(jī)制是瑞舒伐他汀、厄貝沙坦通過影響AT1 受體表達(dá)及阻斷血管緊張素II 與AT1 受體的結(jié)合發(fā)揮更強(qiáng)及有效抗心肌肥厚作用[12]。然而本研究目前只證明兩者聯(lián)合使用可通過下調(diào)AT1 受體的表達(dá)，達(dá)到改善高血壓模型大鼠心肌重構(gòu)作用；對于何種信號通路下調(diào)AT1 受體的表達(dá)仍需要進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，瑞舒伐他汀聯(lián)合厄貝沙坦可改善高血壓模型大鼠心肌重構(gòu)，本研究為二者在臨床上聯(lián)合用藥治療心衰、心肌肥厚提供新的思路及理論依據(jù)，為臨床改善肥厚性心肌患者的生存質(zhì)量、延緩惡性發(fā)展進(jìn)程、改善預(yù)后有積極的意義。