武月蓮，劉春梅，邊迎秋

（1.通遼市國(guó)家農(nóng)業(yè)科技園區(qū)發(fā)展服務(wù)中心，內(nèi)蒙古 通遼 028000；2.赤峰市阿魯科爾沁旗農(nóng)牧局，內(nèi)蒙古天山 025550；3.興安盟突泉縣突泉鎮(zhèn)街道管理服務(wù)中心，內(nèi)蒙古 突泉 137599）

大豆起源于中國(guó)，其籽粒蛋白質(zhì)含量占38%～45%，脂肪含量占18%～23%，碳水化合物含量約占26%，還有少量的灰分、膳食纖維和維生素等，約占5%左右［1-2］.我國(guó)擁有符合大豆生長(zhǎng)所需的自然地理環(huán)境，且已有5000 多年的栽培歷史［3］.2018 年我國(guó)大豆平均單產(chǎn)1.853 t·hm-2，總產(chǎn)為1528 萬t，約進(jìn)口8231萬t，進(jìn)口總量比國(guó)內(nèi)總產(chǎn)量高出5.39倍.同時(shí)，我國(guó)目前為世界上最大的大豆消費(fèi)國(guó)，對(duì)外存有極高的依賴度［4-5］.由于全國(guó)耕地面積已達(dá)到1.2億公頃紅色警戒線，所以對(duì)于大豆育種研究者而言，提高大豆單產(chǎn)是首要任務(wù)［6］.利用雜種優(yōu)勢(shì)大幅度提高農(nóng)作物產(chǎn)量已被證明是作物遺傳改良最有效的途徑之一［7］.目前，我國(guó)利用自身獨(dú)特的地域優(yōu)勢(shì)廣泛開展大豆雜種優(yōu)勢(shì)利用研究工作，現(xiàn)已達(dá)到世界領(lǐng)先地位［8-9］.雖然我國(guó)在雜種優(yōu)勢(shì)利用方面取得很大的進(jìn)展，但至今，我國(guó)雜交大豆種植面積較少，主要原因并不是產(chǎn)量?jī)?yōu)勢(shì)未突顯出來，而是不育系繁殖和雜交制種產(chǎn)量較低，導(dǎo)致種子價(jià)格過高，故提高不育系結(jié)實(shí)率是大豆雜種優(yōu)勢(shì)利用的關(guān)鍵因素.前人研究認(rèn)為，大豆不育系異交率受傳粉昆蟲種類、群體大小和制種田局部環(huán)境等因素影響［10-11］.而光合作用是植物生長(zhǎng)發(fā)育的基礎(chǔ)，是植物體內(nèi)碳元素來源的重要途徑，同時(shí)也是提高植株產(chǎn)量的生理基礎(chǔ)之一［12］.植物個(gè)體與群體的光合作用最終決定植株的生長(zhǎng)發(fā)育特性和產(chǎn)量品質(zhì)各項(xiàng)指標(biāo)的形成［13］，葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)被稱為研究植物光合作用快速、靈敏、無損傷的探針［14］，當(dāng)環(huán)境條件變化時(shí)，植物體內(nèi)葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化可以在一定程度上反映環(huán)境因子對(duì)植物的影響［15-16］.同時(shí)光合作用中多數(shù)生理生化性狀均可在不同程度上表現(xiàn)出雜種優(yōu)勢(shì).因此本研究以高、中、低異交率的大豆不育系及其同型保持系為試驗(yàn)材料，對(duì)大豆不育系及其同型保持系的光合特性比較分析，初步闡明光合特性與大豆不育系結(jié)實(shí)率之間的關(guān)系，為大豆雜交優(yōu)勢(shì)育種等相關(guān)研究提供理論依據(jù).

1 材料和方法

1.1 供試材料 試驗(yàn)材料為高、中、低異交率的大豆不育系及其同型保持系各1 對(duì)，不育系分別以A1（JLCMS116，高異交率）、A2（JLCMS213，中異交率）、A3（JLCMS9，低異交率）代之，與其相對(duì)應(yīng)的同型保持系分別以B1、B2、B3代之.供試材料均由吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院大豆研究所提供.

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)在內(nèi)蒙古通遼市平安堡村試驗(yàn)田進(jìn)行，于2018年5月12日播種，設(shè)置3個(gè)小區(qū)，各小區(qū)間自然隔離，采用父母本1︰1等行距種植，每小區(qū)6行，行距60 cm，株距10 cm，父母本相間種植.小區(qū)面積為20 m2，試驗(yàn)材料均同一時(shí)期播種，生長(zhǎng)期間采用常規(guī)大田栽培管理措施.于5月25日進(jìn)行田間補(bǔ)苗，7月20日進(jìn)行指標(biāo)測(cè)定.

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 葉綠素含量測(cè)定 利用便攜式葉綠素儀SPAD-502Plus測(cè)量大豆植株自上而下第3處復(fù)葉的中間葉片，每一葉片隨機(jī)選取10處測(cè)量并取平均值.同一品種大豆3次重復(fù).

1.3.2 光合指標(biāo)的測(cè)定 光合指標(biāo)選用LI-6400（Li-Cor.公司）型便攜式光合作用測(cè)定系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定.于上午9時(shí)到11時(shí)對(duì)6個(gè)大豆材料葉片光合氣體交換參數(shù)進(jìn)行測(cè)定，包括凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）、胞間CO2濃度（Ci）和蒸騰速率（Tr）.測(cè)定時(shí)采用固定紅藍(lán)光源進(jìn)行試驗(yàn)，光強(qiáng)為1200 μmol·m-2·s-1，為避免測(cè)定時(shí)環(huán)境CO2濃度的變化對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾，將儀器的進(jìn)氣口與裝有恒定CO2濃度的鋼瓶相接，鋼瓶CO2濃度配制成370 μmol·mol-1，溫度設(shè)定為25℃，空氣流速0.5 L·min-1，相對(duì)濕度60%，選取3 株大豆在主莖第3復(fù)葉的葉片中部進(jìn)行測(cè)定.

1.3.3 葉綠素?zé)晒鈪?shù)的測(cè)定 葉綠素?zé)晒鈪?shù)選用FMS-2（英國(guó)Hansatech公司）脈沖調(diào)制式熒光測(cè)定系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定.在測(cè)定光合指標(biāo)的同時(shí)先測(cè)定光適應(yīng)下的穩(wěn)態(tài)熒光qp 和ETR 等參數(shù)；葉片經(jīng)暗適應(yīng)30 min后，測(cè)定Fo和Fv/Fm等參數(shù).

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 采用Excel2003進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和計(jì)算，用SPSS 20.0 進(jìn)行方差分析、相關(guān)性分析和通徑分析.

2 結(jié)果與分析

2.1 大豆不育系及其同型保持系光合特性比較 由表1可知，各不育系SPAD值、凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率均為A1＞A2＞A3，且A1 葉片SPAD 值和氣孔導(dǎo)度顯著高于A3，分別高出9.80%和19.15%，A1葉片凈光合速率和蒸騰速率顯著高于A2和A3，分別高出10.64%、29.04%和13.17%、20.59%；其同型保持系葉片凈光合速率、氣孔導(dǎo)度與蒸騰速率均為B1＞B2＞B3，且上述3 性狀值B1 均顯著高于B3.各不育系SPAD值和蒸騰速率均低于其同型保持系，但無顯著差異，葉片胞間CO2濃度表現(xiàn)為A1＜A2＜A3，B1＜B2＜B3，但均無顯著差異，說明胞間CO2濃度對(duì)異交結(jié)實(shí)率影響較小.

2.2 大豆不育系及其同型保持系葉綠素?zé)晒鈪?shù)比較 表2為各不育系及其同型保持系葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化趨勢(shì).初始熒光（Fo）是光系統(tǒng)II（PSII）反應(yīng)中心處于完全開放時(shí)的熒光水平，各不育系及其同型保持系葉片初始熒光為A1＜A2＜A3和B1＜B3＜B2，且A3顯著高于A2、A1和B3，B2顯著高于B1、B3和A3；最大熒光（Fm）是PSⅡ反應(yīng)中心處于完全關(guān)閉時(shí)的熒光水平，可反映PSⅡ的電子傳遞情況，A1和A3最大熒光均低于其同型保持系，A2顯著高于其同型保持系，高出4.09%；Fv/Fm為PSII光量子效率，主要反映PSII開始最大光能的利用效率，ETR為相對(duì)電子傳遞速率，各不育系及保持系Fv/Fm和ETR均表現(xiàn)為A1＞A2＞A3、B1＞B2＞B3，且各不育系Fv/Fm均高于其同型保持系，而A1和A2葉片ETR均低于其同型保持系.

表2 不育系及其同型保持系葉片葉綠素?zé)晒鈪?shù)比較Tab.2 Comparison of chlorophyll fluorescence parameters between sterile lines and their maintainers

2.3 大豆不育系及其同型保持系百粒重比較 由圖1 可見，各不育系及其同型保持系百粒重均為A1＞A2＞A3，B1＞B2＞B3，且各不育系百粒重均顯著高于其同型保持系，分別高出31.18%、32.63%和18.19%.

2.4 大豆不育系及其同型保持系各指標(biāo)參數(shù)相關(guān)性分析 由表3可見，SPAD值除與蒸騰速率呈顯著正相關(guān)外，與其他各性狀均無顯著相關(guān)性.凈光合速率與蒸騰速率和ETR呈顯著正相關(guān)水平，與氣孔導(dǎo)度和Fv/Fm呈極顯著正相關(guān)水平.胞間CO2濃度與氣孔導(dǎo)度和Fv/Fm呈顯著負(fù)相關(guān)水平，與蒸騰速率和ETR呈極顯著負(fù)相關(guān)水平.百粒重與凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和Fv/Fm相關(guān)性最高，相關(guān)系數(shù)分別為0.749 5、0.652 6和0.765 7，但均未達(dá)到顯著相關(guān)水平.Fo和Fm與各性狀間也均未達(dá)到顯著相關(guān)水平.

由表4可見，各性狀對(duì)百粒重正向作用大小順序?yàn)閮艄夂纤俾剩?.396 0）＞胞間CO2濃度（0.553 5）＞Fv/Fm（0.036 3）＞ETR（-0.096 4）＞Fm（-0.105 6）＞Tr（-0.232 8）＞Fo（-0.254 2）＞SPAD（-0.460 9）＞氣孔導(dǎo)度（-0.739 8），其中只有凈光合速率（Pn）、胞間CO2濃度（Ci）和Fv/Fm對(duì)百粒重有直接的積極作用.SPAD值、氣孔導(dǎo)度（Gs）、蒸騰速率（Tr）和ETR 直接系數(shù)雖為負(fù)數(shù)，但間接系數(shù)分別為0.565 1、1.392 3、0.677 6 和0.608 9，可通過其他性狀間接對(duì)百粒重產(chǎn)生影響.

表3 大豆不育系及其同型保持系各指標(biāo)參數(shù)相關(guān)系數(shù)Tab.3 Correlation coefficient of each index parameter of soybean sterile line and its maintainer

表4 各性狀相關(guān)系數(shù)的通徑分析Tab.4 Path analysis of correlation coefficient of each character

3 討論

雜種優(yōu)勢(shì)的利用是提高作物產(chǎn)量的有效途徑之一，目前玉米、高粱、油菜和水稻等均已廣泛利用雜交種獲得增產(chǎn)增收，而大豆與這些作物相比，雜種優(yōu)勢(shì)利用研究相對(duì)較晚［17］.為提高大豆不育系產(chǎn)量，本研究以不同基因型大豆不育系及同型保持系的異交率差異為切入點(diǎn)，系統(tǒng)研究光合特性對(duì)大豆不育系異交率的影響.

大豆在生育期間光照與產(chǎn)量密切相關(guān)［12］，作物中90%～95%的干物質(zhì)來自于光合作用的產(chǎn)物［18］，本研究結(jié)果表明，異交率越高各不育系SPAD值、凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率數(shù)值越大，胞間CO2濃度數(shù)值越小，除A2的凈光合速率、A3的氣孔導(dǎo)度高于其同型保持系外，各不育系SPAD值、凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率均低于其同型保持系，說明大豆不育系異交結(jié)實(shí)率與SPAD值、凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率間存在密切關(guān)系，且提高異交結(jié)實(shí)率并非單一光合參數(shù)獨(dú)自作用，而是多種光合參數(shù)共同作用的結(jié)果，同時(shí)表明在消耗同等水分條件下，低異交率不育系干物質(zhì)生成量較少，則需要消耗更多的水分來提高自身干物質(zhì)產(chǎn)量，說明高異交率不育系具有較高的水分利用率，與烏云塔娜研究結(jié)果基本一致［19］.葉綠素?zé)蓞?shù)在葉片光合作用的過程中具有重要作用，尤其能反映光系統(tǒng)II（PSII）對(duì)光能的吸收、傳遞、耗散、分配等過程.本研究結(jié)果表明，各不育系Fv/Fm、ETR均為A1＞A2＞A3，而Fo則為A1＜A2＜A3，說明異交率越高，葉片光作用越強(qiáng)，低異交率不育系葉片發(fā)生了光抑制、PSII受到破壞.高異交率會(huì)改變大豆葉片PSⅡ激發(fā)能的分配方式，通過自身熱消耗更多的激發(fā)能以此來提高大豆百粒重.且高異交率大豆不育系在保持PSⅡ原初光能轉(zhuǎn)換效率和PSⅡ潛在活性的同時(shí)，啟動(dòng)非輻射熱能量耗散機(jī)制，將過剩光能以熱的形式耗散掉，從而阻止凈光合速率過度下降，起到保護(hù)光合機(jī)構(gòu)的作用.本研究相關(guān)性和通徑分析表明，凈光合速率與蒸騰速率和ETR呈顯著正相關(guān)水平，與氣孔導(dǎo)度和Fv/Fm呈極顯著正相關(guān)水平，百粒重與凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和Fv/Fm相關(guān)性最高，且凈光合速率與Fv/Fm直接通徑系數(shù)均為正數(shù)，可直接影響不育系產(chǎn)量，與孫賀祥等［5］研究相似.雖然氣孔導(dǎo)度直接系數(shù)為負(fù)值，但間接系數(shù)達(dá)到1.392 3，也可通過其他性狀對(duì)產(chǎn)量產(chǎn)生影響，胞間CO2濃度與百粒重呈負(fù)相關(guān)水平，說明胞間CO2濃度抑制了百粒重的提高，但通徑分析表明胞間CO2濃度直接系數(shù)為0.553 5，可直接影響大豆不育系產(chǎn)量，因此需降低不育系胞間CO2濃度來增加大豆不育系產(chǎn)量.

4 結(jié)論

在不育系選育的過程中，應(yīng)選用具有較高凈光合速率、氣孔導(dǎo)度和光能轉(zhuǎn)換率以及較低的胞間的CO2濃度的不育系為母本，以提高不育系繁殖產(chǎn)量.