董 林 包 進 趙昕亞 張瑞生 徐 菲

(南京醫(yī)科大學附屬南京醫(yī)院/江蘇省南京市第一醫(yī)院輸血科，南京市 210006，電子郵箱：1262725610@qq.com)

輸血是臨床疾病治療的重要手段之一，在輸血之前需要進行相應的交叉配血，以檢驗患者和供血者雙方的血型以及兩者的血液成分相容性，這也是輸血科或者血庫的主要工作，理論上需要供受雙方的紅細胞和血清完全相容才可以進行輸注。而在實際工作中，因患者輸血次數(shù)增加、病情變化等因素，會造成意外抗體的出現(xiàn)，從而導致血型鑒定以及交叉配血困難，進而延遲患者輸注血制品的時間，對患者的治療造成很大的影響。意外抗體，即不符合傳統(tǒng)的ABO血型Landsteiner規(guī)則的血型抗體，也被稱為意外抗體[1]，主要為血清中抗A和抗B以外的抗體，此種抗體可能會導致患者發(fā)生溶血性輸血不良反應，從而對患者的生命造成威脅[2]。本研究總結(jié)196例血清意外抗體的特點，以探討意外抗體檢測的意義，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 病例來源 2017年7月至2019年7月我院輸血科收到的存在意外抗體的標本共196例，均為交叉配血不合(包括主側(cè)和/或次側(cè)凝集)、血型正反定型不符或意外抗體篩查陽性，且經(jīng)南京市紅十字血液中心鑒定出意外抗體。交叉配血供血者血液來自南京市紅十字血液中心。

1.2 方法

1.2.1 儀器和試劑： 血型儀及配套ABO正反定型、Rh血型鑒定卡購自強生公司；反定型細胞、抗人球蛋白檢測卡(意外抗體篩檢卡、交叉配血卡)、意外抗體篩檢試劑(人紅細胞)均購自長春博迅生物科技有限公司；意外抗體鑒定細胞譜試劑購自荷蘭Sanquin公司；37℃孵育器和抗人球蛋白檢測相應離心機均購自長春博研科學儀器責任有限公司；標本離心機購自北京白洋醫(yī)療器械有限公司；生理鹽水(0.9%氯化鈉注射液)購自安徽雙鶴藥業(yè)有限責任公司。

1.2.2 血型鑒定： 將患者全血標本以3 500 r/min離心4 min后，放入血型儀進行全自動血型鑒定。

1.2.3 意外抗體篩查： 將患者全血標本以3 500 r/min離心4 min，分離血清，將血清和意外抗體檢測試劑(人紅細胞)各50 μL加入抗人球蛋白檢測卡中，37℃孵育15 min，900 r/min離心2 min、1 500 r/min離心5 min后讀取結(jié)果。

1.2.4 交叉配血： 將患者和供血者的全血標本分別以3 500 r/min離心4 min，分離血清，并取壓積紅細胞用生理鹽水配置成1%紅細胞懸液。分別將患者血清和供血者1%紅細胞加入抗人球蛋白檢測卡(交叉配血卡)一孔中，另一孔加入患者1%紅細胞和供血者血清，37℃孵育15 min，900 r/min離心2 min、1 500 r/min離心5 min后讀取結(jié)果。

1.2.5 意外抗體的鑒定：出現(xiàn)血型鑒定正反定型不符、意外抗體篩檢陽性、交叉配血不符中的任一種情況，均需重新抽血送至南京市紅十字血液中心進行意外抗體的具體鑒定，方法同意外抗體的篩查，細胞譜試劑為荷蘭Sanquin公司產(chǎn)品。

2 結(jié) 果

2.1 意外抗體的病區(qū)分布 196例意外抗體病例中，來自血液科和ICU的病例最多，其次為心臟科，見表1。

表1 196例意外抗體病例的病區(qū)分布

2.2 意外抗體病例的血型分布 196例意外抗體病例中，B型血型病例最多，占32.1%(63/196)，其次為O型及A型，分別占28.6%(56/196)、24.0%(47/196)，最少為AB型，占15.3%(30/196)。

2.3 意外抗體種類 自身抗體最為常見，其次為自身IgG抗體及Rh類抗體，見表2。

表2 意外抗體種類

3 討 論

輸血已經(jīng)成為一種重要的臨床治療手段，而輸血前的血型鑒定和交叉配血是最為關鍵的操作，只有患者和供血者的血型和交叉配血相合才可以進行輸注。而輸血也被認為是造成意外抗體出現(xiàn)的最主要原因[3]。意外抗體會導致血型鑒定或者交叉配血等疑難情況的出現(xiàn)，只有對患者血清中意外抗體的類型進行確認，血液中心才能夠提供相合的血液給患者進行輸注，以避免不良反應的發(fā)生。

本研究的196例意外抗體病例中，血液科和ICU的病例最多，其次為心臟科。有研究表明,輸注1個單位紅細胞會導致1%的紅細胞致敏，而多次輸血后意外抗體的發(fā)生率也會提高5%～20%[4]。血液科患者由于原發(fā)疾病而出現(xiàn)不同程度的貧血、ICU和心臟科患者由于基礎疾病較為復雜，通常均需要輸血進行治療，因此以上病區(qū)的患者出現(xiàn)意外抗體的概率較大。196例意外抗體病例中，AB型血型的病例最少，其余3種血型相差不大，這可能與人群中AB型血型比例較低有關。

意外抗體主要是由于免疫刺激所致，大部分屬于IgG，此類抗體在鹽水中不容易出現(xiàn)凝集，而采用微柱凝膠法可以產(chǎn)生凝集現(xiàn)象[5]。有研究表明，意外抗體的類型主要是IgG類和Rh類[6]。本研究結(jié)果顯示，IgG和Rh類抗體也是較為常見的意外抗體類型，分別占31.1%、21.4%。在Rh類抗體中，以抗E抗體最為常見，有研究顯示抗E抗體在Rh類抗體中約占57%[7]。本研究中抗E抗體在Rh系統(tǒng)中的比例為50%，與該結(jié)果相近。而抗E抗體陽性通常被認為主要出現(xiàn)在多次輸血的患者中[8]，對于血液科、ICU等需要反復輸血的科室，可以增加對此類患者進行Rh系統(tǒng)抗原表型測定的頻率，從而保障其在緊急用血時可以快速提供相應的血液，以挽救生命。

本研究中，Rh、MNS、Kidd、Lewis系統(tǒng)抗體所占比例依次降低，其中以Rh系統(tǒng)的抗E抗體出現(xiàn)的比例最高，而MNS、Lewis、Kidd系統(tǒng)抗體所占比例較低，均不足10%，這與相關文獻[9-10]報告的結(jié)果類似。MNS系統(tǒng)復雜性僅次于Rh系統(tǒng)，也是第二個被發(fā)現(xiàn)的血型系統(tǒng)。MNS系統(tǒng)的抗M抗體有IgM和IgG兩種類型，較為多見的是IgM，它是一種天然抗體，在4℃以下會激活補體導致變態(tài)反應的發(fā)生，而在37℃無凝集現(xiàn)象的出現(xiàn)，通常被認為沒有臨床意義，因為在交叉配血過程中有37℃孵育的操作，因此會造成漏檢，雖然其陽性率較低，但是在輸血檢驗的過程中也需要加以重視；IgG類抗M抗體較為少見，其通常與IgM類抗M抗體同時混合存在于血漿中，在37℃溫度下有較強的活性，可以與紅細胞上的M抗原反應，因此其對于臨床輸血有著明顯的意義。此外，Kidd系統(tǒng)的抗JK抗體是免疫抗體，通常是由于受到JK抗原刺激產(chǎn)生，在中國人群中較少，在體外和體內(nèi)的活性較弱[11]?？筁ea抗體是Lewis系統(tǒng)最為常見的抗體，和MNS系統(tǒng)抗體一樣，多數(shù)為IgM型，其系統(tǒng)抗原在組織液中可以大量的存在，也可以中和部分抗體，因此抗Lea抗體極少引起輸血不良反應?？筆1抗體也屬于冷抗體系列，在30℃以上一般不會出現(xiàn)凝集反應。

隨著醫(yī)療技術的不斷發(fā)展，以及病情的不斷變化，臨床對于輸血的需求也越來越大，對于血型鑒定的困難也逐漸增多。目前，很多醫(yī)院包括筆者所在醫(yī)院的輸血科，用于意外抗體鑒定的標準細胞僅為三種一組，細胞譜較窄，多數(shù)情況下無法確定血型抗體的類別，只能送到血液中心進行具體確定，使臨床用血不能及時到位。而在交叉配血過程中，傳統(tǒng)的聚凝胺方法時間較短，但是出錯的可能性較大；微柱凝膠法時間雖長，但可以大大提高配血的安全性。在我院，除了特殊緊急情況下進行聚凝胺法檢測外，其余均采用微柱凝膠法進行配血。在輸血前對于意外抗體的篩查十分必要，特別是對于反復輸血或者有妊娠史的患者更加需要重視，及早發(fā)現(xiàn)相應的意外抗體，選擇對應抗原陰性的血液進行輸注，可以有效避免輸血不良反應的發(fā)生。而血型系統(tǒng)的復雜性，也對輸血科的人員技能和設備提出了更高的要求，配備更多更有效的譜細胞，可以及早檢測出相應的血型抗體，減少了配血所需時間，確保了臨床用血的合理、有效、安全。