陳 瑞

河南大學(xué)附屬鄭州頤和醫(yī)院檢驗(yàn)科，鄭州 450047

子癇前期是一類妊娠性高血壓疾病，其在所有妊娠婦女中發(fā)病率約為5%～10%，是母體和胎兒死亡的主要原因之一［1］。子癇前期臨床定義為新發(fā)高血壓（收縮壓高于140 mmHg或者舒張壓高于90 mmHg）和新發(fā)蛋白尿。研究表明子癇前期的發(fā)生始于妊娠中期，早于臨床癥狀出現(xiàn)前［2-3］。早期診斷并預(yù)測(cè)子癇前期的嚴(yán)重程度可通過嚴(yán)格的監(jiān)測(cè)和及時(shí)有效的干預(yù)可減輕或避免母親和胎兒嚴(yán)重的并發(fā)癥。因此弄清子癇前期的發(fā)病機(jī)制并發(fā)覺有效的生物標(biāo)志物預(yù)測(cè)子癇前期的發(fā)生對(duì)于優(yōu)生優(yōu)育尤為關(guān)鍵。近期研究證實(shí)母胎免疫以及母體免疫平衡紊亂在子癇前期中扮演重要角色，趨化因子是一類參與炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子，可調(diào)控炎癥白細(xì)胞募集過程［4］。CXCL16是趨化因子超家族新成員，其在炎癥性疾病中顯著上調(diào)，且有助于內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂和肝臟損傷［5］。而內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂和過度炎癥在子癇前期病因?qū)W中扮演重要作用，因此推測(cè)CXCL16 可能參與了其發(fā)生發(fā)展過程。據(jù)此本研究將探究血清可溶性CXCL16在子癇前期患者中的變化及其與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2017年3月—2019年3月于河南大學(xué)附屬鄭州頤和醫(yī)院婦產(chǎn)科就診且明確診斷為子癇前期的妊娠孕婦58例作為研究組，同期健康體檢妊娠孕婦30例為對(duì)照組。并依據(jù)疾病嚴(yán)重程度將研究組分為輕度子癇前期組（30例）和重度子癇前期組（28例）。排除合并慢性疾病史、肥胖史、吸煙史、合并感染以及自身免疫性疾病的孕婦。子癇前期診斷及分級(jí)依據(jù)第七版《婦產(chǎn)科學(xué)》中的標(biāo)準(zhǔn)［6］：（1）輕度子癇前期：妊娠20周后出現(xiàn)4 h內(nèi)連續(xù)測(cè)定兩次BP≥140/90 mmHg；尿蛋白≥300 mg/24 h或隨機(jī)尿蛋白(+)；可存在上腹不適以及頭痛等臨床癥狀。（2）重度子癇前期：BP≥160/110 mmHg；尿蛋白≥2.0 g/24 h或隨機(jī)尿蛋白≥(++)；血清肌酐＞106μmol/L，血小板＜100×109/L；LDH升高；ALT或AST升高；持續(xù)性頭痛或其它腦神經(jīng)或視覺障礙，持續(xù)性上腹不適。

1.2 標(biāo)本采集及處理

采集所有子癇前期患者治療前、體檢孕婦體檢當(dāng)日清晨空腹靜脈血6 ml于干燥管中，室溫放置20 min后，于中低速離心機(jī)中3 500 rpm 離心15 min 后，分離血清于凍存EP 管中，放入-80℃冰箱中保存，用于血清CXCL16 濃度的測(cè)定。 人CXCL16 測(cè)定 ELISA 試劑盒購(gòu)自美國(guó)Cloud-Clone Corp 公司，所有測(cè)定步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。同時(shí)記錄研究對(duì)象血液生化和血液常規(guī)指標(biāo)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，Spearman 分析指標(biāo)間的相關(guān)性，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組和對(duì)照組一般資料比較

子癇前期患者和健康對(duì)照組間年齡、BMI和孕周等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但子癇前期患者收縮壓和舒張壓均高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 研究組和對(duì)照組一般資料情況

2.2 研究組和對(duì)照組CXCL16及血液學(xué)指標(biāo)比較

與對(duì)照組相比，子癇前期患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)并未出現(xiàn)顯著變化，而PLT則顯著下降。此外，血清肝臟損傷相關(guān)酶類ALT和AST則均顯著升高，血清腎臟損傷標(biāo)志物肌酐亦顯著增加。CXCL16 濃度在子癇前期患者中顯著高于健康孕婦，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

2.3 輕度子癇前期組和重度子癇前期組患者CXCL16水平間的差異

分析發(fā)現(xiàn)輕度子癇前期患者血清CXCL16 濃度(1.53±1.25) pg/ml 顯著低于重度子癇前期患者(2.67±1.46) pg/ml，但高于健康對(duì)照組(0.53±0.35) pg/ml，（P＜0.05）。此外，重度子癇前期患者亦顯著高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1。

表2 研究組和對(duì)照組血清CXCL16和血液學(xué)指標(biāo)的比較

圖1 輕度子癇前期組、重度子癇前期組和健康對(duì)照組間血清CXCL16濃度比較

2.4 子癇前期患者血清CXCL16水平與臨床指標(biāo)間的關(guān)系

Spearman 相關(guān)性結(jié)果表明，子癇前期患者血清CXCL16濃度與ALT、AST和血肌酐均呈顯著正相關(guān)性，而與收縮壓、舒張壓和PLT間并無顯著相關(guān)性，見表3。

表3 子癇前期患者血清CXCL16水平與臨床指標(biāo)間的相關(guān)性

2.5 CXCL16的受試者診斷曲線

受試者診斷曲線分析發(fā)現(xiàn)CXCL16 區(qū)分子癇前期患者和正常孕婦時(shí)曲線下面積高達(dá)0.895 1（95% CI 為0.831 8 to 0.958 5），最佳界值為0.85 pg/ml，其靈敏度為77.59%，特異度為86.67%，見圖2。

圖2 CXCL16的受試者診斷曲線

3 討論

本研究通過檢測(cè)子癇前期患者和健康孕婦血清CXCL16 濃度，分析發(fā)現(xiàn)CXCL16 在子癇前期孕婦中異常上調(diào)，此外血清CXCL16 的濃度還與疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān)，即重度子癇前期患者顯著高于輕度子癇前期患者，且在輕度子癇前期患者中相較對(duì)照組已經(jīng)出現(xiàn)了異常高水平變化。CXCL16 具有多重生物學(xué)功能，主要以膜結(jié)合或可溶性的方式分泌表達(dá)，表達(dá)CXCL16 的細(xì)胞主要有巨噬細(xì)胞、T 細(xì)胞、B 細(xì)胞、樹狀細(xì)胞、上皮細(xì)胞、纖維細(xì)胞、血小板、血管平滑肌細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞［7］。研究發(fā)現(xiàn)CXCL16 可參與調(diào)控炎癥反應(yīng)、組織損傷和纖維化過程，異常上調(diào)的CXCL16 可通過刺激IFN-α和TNF-α等細(xì)胞因子參與炎癥反應(yīng)［8］。而與健康孕婦Th2細(xì)胞免疫占主導(dǎo)地位不同的是，子癇前期孕婦則是Th1細(xì)胞免疫占據(jù)優(yōu)勢(shì)，因此該類人群常對(duì)胎兒表現(xiàn)出過度的系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)［9］。有研究表明子癇前期孕婦細(xì)胞滋養(yǎng)層微粒體中多形核白細(xì)胞可分泌大量促炎細(xì)胞因子，并出現(xiàn)在母體外周血循環(huán)中，與胎盤凋亡和壞死密切相關(guān)，而內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂正是以這種方式被誘導(dǎo)發(fā)生的。

既往研究已經(jīng)報(bào)道了在包括炎癥性腸病和動(dòng)脈粥樣硬化等多種炎癥性疾病患者中CXCL16 循環(huán)水平顯著高于健康對(duì)照組［10］。因此本研究中發(fā)現(xiàn)的子癇前期患者中異常高水平CXCL16 可能與在其病因?qū)W機(jī)理中扮演重要作用的系統(tǒng)性炎癥存在關(guān)聯(lián)。子癇前期患者存在廣泛的血管痙攣現(xiàn)象，而這與血流灌注不足相關(guān)。既往已證實(shí)CXCL16/ROCK1信號(hào)通路可加速腎臟組織中缺血性損傷，基于此表明CXCL16 可能有助于子癇前期中組織低氧損傷加?。?1］。此外，Marques 等［5］還發(fā)現(xiàn)上調(diào)的CXCL16 會(huì)造成內(nèi)皮損傷，而本研究中發(fā)現(xiàn)的異常高水平CXCL16 可能亦會(huì)對(duì)子癇前期病因?qū)W中重要機(jī)理之一的內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙發(fā)揮促進(jìn)作用。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)CXCL16 與ALT 和AST 存在顯著正相關(guān)關(guān)系，先前研究證實(shí)CXCL16 在肝臟內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)且在肝炎細(xì)胞損傷中發(fā)揮一定的作用［12］，提示其可能在子癇前期患者肝臟損傷中也發(fā)揮一定的效應(yīng)。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)激活的CXCL16通路可增加腎小管間質(zhì)損傷，而CXCL16與血肌酐間的正相關(guān)性提示其可能參與了子癇前期腎損傷過程［13］。Lekva等［14］也發(fā)現(xiàn)血清CXCL16在子癇前期孕婦中異常上調(diào)，但該研究并未分析不同嚴(yán)重程度子癇前期孕婦間的差異。另ROC曲線發(fā)現(xiàn)了0.85pg/ml的最佳診斷界值，敏感性和特異度均較高。在20% 左右的HELLP 綜合征或子癇患者中并未出現(xiàn)蛋白尿或高血壓，在這些病例中血清CXCL16則有希望作為子癇前期診斷的生物標(biāo)志物。

綜上所述，本研究初步發(fā)現(xiàn)子癇前期患者存在異常高表達(dá)的CXCL16，并與疾病嚴(yán)重程度以及肝臟或腎臟損傷存在關(guān)聯(lián)，且診斷性能較好，或有希望成為潛在生物標(biāo)志物。