盧小娟，羅秋平，汪紅艷，汪俊，高婧，孟偉偉

1.深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518108；

2.深圳市龍華區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518109；

3.深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院公共關(guān)系科，廣東 深圳 518108；

4.深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院輸血科，廣東 深圳 518108

乙型肝炎是臨床上常見(jiàn)的傳染性肝疾病，具有發(fā)病率高、傳染性強(qiáng)等特點(diǎn)。乙型肝炎病毒(HBV)作為乙型肝炎發(fā)生的元兇[1-2]，可通過(guò)多種途徑傳播，復(fù)制能力極強(qiáng)，對(duì)肝臟的損傷極大。產(chǎn)婦發(fā)生HBV 感染時(shí)可通過(guò)母嬰傳播將HBV 病毒傳播給胎兒，從而使其體內(nèi)的HBsAg、HBsAb 等HBV 血清標(biāo)志物存在異常表達(dá)[3-4]，并可能發(fā)展為慢性乙肝患者，最終發(fā)展為肝硬化或肝癌，對(duì)其身心健康造成嚴(yán)重影響。本研究通過(guò)對(duì)HBsAg 陽(yáng)性產(chǎn)婦的乙肝感染情況及其對(duì)新生兒HBsAg、HBsAb 等HBV 血清標(biāo)志物的影響進(jìn)行探討，旨在為臨床阻斷HBV 母嬰傳播提供可靠依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017 年10 月至2018 年12月在深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院進(jìn)行產(chǎn)檢的456 例HBsAg陽(yáng)性產(chǎn)婦作為研究對(duì)象，產(chǎn)婦年齡22～36歲，平均(28.47±4.19)歲；孕次1～3 次，平均(1.56±0.41)次；孕周38～39 周，平均(38.14±2.61)周。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)妊娠28 周后經(jīng)乙肝兩對(duì)半檢查明確為HBsAg 陽(yáng)性；(2)丈夫肝功能正常，排除傳遞HBV的可能；(3)在我院進(jìn)行規(guī)范產(chǎn)檢并最終順利分娩；(4)新生兒出生指標(biāo)正常，體溫在36.5℃～37.5℃，體質(zhì)量在2 500 g 以上，Apgar評(píng)分在9分以上。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他病毒感染及肝功能異常者；(2)接受核苷類(lèi)似物、抗病毒治療者；(3)胎兒畸形、低出生體重新生兒、新生兒窒息、早產(chǎn)兒以及多胎妊娠者。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有產(chǎn)婦及家屬均對(duì)本研究知情并簽署知情同意書(shū)。

1.2 觀察指標(biāo) 分娩前1 周采集所有產(chǎn)婦的空腹靜脈血，分娩后采集新生兒的臍帶血分別進(jìn)行乙肝兩對(duì)半、HBV-DNA 定量檢測(cè)。分析所有產(chǎn)婦的HBV感染情況，對(duì)比不同血清學(xué)模式和不同HBV-DNA 載量孕產(chǎn)婦新生兒的HBV-DNA定量檢測(cè)結(jié)果以及血清中HBsAg、HBsAb的表達(dá)情況。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 HBV-DNA 定量檢測(cè) 取非抗凝血3 mL，離心(3 000 r/min，10 min)分離血清后常規(guī)提取血清DNA，采用熒光定量PCR 法進(jìn)行HBV-DNA 定量分析，選擇ABI Prism 7500 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 儀進(jìn)行PCR 擴(kuò)增和結(jié)果分析，試劑盒購(gòu)自中山大學(xué)達(dá)安基因生物有限公司，質(zhì)控品購(gòu)自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。循環(huán)條件：93℃、2 min，93℃、45 s，55℃、1 min，共循環(huán)10 次；之后再按照93℃、30 s，55℃、45 s 的循環(huán)順序循環(huán)30 次。采用儀器自帶軟件計(jì)算和分析結(jié)果，以HBV-DNA＞5×102copies/mL時(shí)判定為陽(yáng)性。

1.3.2 乙肝兩對(duì)半檢測(cè) 取3 mL空腹靜脈血，肝素抗凝后離心分離血清待測(cè)(3 000 r/min，10 min)，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)法進(jìn)行測(cè)定，試劑盒購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)有限公司，儀器選用美國(guó)雅培公司生產(chǎn)的i-2000 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。檢測(cè)項(xiàng)目包括：(1)乙肝表面抗原(HBsAg)；(2)乙肝表面抗體(HBsAb)；(3)乙肝e抗原(HBeAg)；(4)乙肝e抗體(HBeAb)；(5)乙肝核心抗體(HBcAb)。所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，單日質(zhì)控以保證結(jié)果的有效性。常見(jiàn)的乙肝血清學(xué)模式包括：(1)“大三陽(yáng)”：1、3、5 陽(yáng)性；(2)“小三陽(yáng)”：1、4、5陽(yáng)性；(3)其他：包括1陽(yáng)性，1、5陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBsAg 陽(yáng)性產(chǎn)婦的乙肝感染情況及母嬰HBV 傳 播 率 456 例HBsAg 陽(yáng) 性 產(chǎn) 婦 的HBV DNA 水平為(4.66±4.03)×107copies/mL (0.45×106～2.64×108copies/mL)，均為HBV陽(yáng)性(陽(yáng)性率為100.00%)。456 例HBsAg 陽(yáng)性產(chǎn)婦中，小三陽(yáng)(HBsAg、抗-HBe、抗-HBc均為陽(yáng)性)211例，占46.27%，大三陽(yáng)(HBsAg、HBeAg、抗-HBc 均為陽(yáng)性)172 例，占37.72%，其他類(lèi)型(HBsAg 伴抗-HBc 陽(yáng)性) 73 例，占16.01%。456 例HBsAg 陽(yáng)性產(chǎn)婦分娩的新生兒均為單胎(共計(jì)456例)，出生時(shí)有89例新生兒為HBsAg陽(yáng)性，母嬰垂直傳播率為19.52%。

2.2 不同血清學(xué)模式產(chǎn)婦新生兒的乙肝病毒血清學(xué)標(biāo)志物水平比較 不同血清學(xué)模式產(chǎn)婦新生兒臍帶血的HBV DNA 載量水平及HBV DNA 陽(yáng)性率、HBsAg 陽(yáng)性率和HBsAb 陽(yáng)性率比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表1。

2.3 不同HBV DNA 載量孕產(chǎn)婦新生兒的乙肝病毒血清學(xué)標(biāo)志物水平 HBV NDA 載量越高的孕產(chǎn)婦，其新生兒臍帶血的HBV DNA 載量水平及HBV DNA陽(yáng)性率、HBsAg陽(yáng)性率越高，HBsAb陽(yáng)性率越低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表1 不同血清學(xué)模式產(chǎn)婦新生兒的乙肝病毒血清學(xué)標(biāo)志物水平比較[，例(%)]

表1 不同血清學(xué)模式產(chǎn)婦新生兒的乙肝病毒血清學(xué)標(biāo)志物水平比較[，例(%)]

注：與其他血清模式(HBsAg陽(yáng)性、抗-HBc陽(yáng)性)比較，aP＜0.05。

images/BZ_70_206_2439_2273_2497.png大三陽(yáng)小三陽(yáng)其他F/χ2值P值24(11.37)a 31(18.02)a 26(29.21)14.154 1＜0.05 211 172 89 5.74±0.57a 5.26±0.46a 4.95±0.41 89.83＜0.05 48(22.75)a 21(12.21)a 9(10.11)10.900 5＜0.05 55(26.07)a 23(13.37)a 11(12.36)13.005 1＜0.05

表2 不同HBV-DNA載量孕產(chǎn)婦新生兒的乙肝病毒血清學(xué)標(biāo)志物水平比較，例(%)]

表2 不同HBV-DNA載量孕產(chǎn)婦新生兒的乙肝病毒血清學(xué)標(biāo)志物水平比較，例(%)]

注：與HBV DNA載量＜106 copies/mL的產(chǎn)婦比較，aP＜0.05。

＞108 106～107＜106 F/χ2值P值images/BZ_70_206_2914_2273_2972.png12(9.30)a 41(16.80)a 28(33.73)20.969 9＜0.05 129 244 83 6.12±0.55a 5.49±0.48a 4.83±0.44 216.70＜0.05 42(32.56)a 43(17.62)a 4(4.82)25.764 0＜0.05 38(29.46)a 46(18.85)a 5(6.02)17.802 9＜0.05

3 討論

HBV 病毒是一種極具傳染能力的嗜肝性病毒[5]，能夠在肝細(xì)胞中存活并對(duì)其造成損害，是肝細(xì)胞炎癥、肝臟纖維化等肝損傷性疾病的主要致病因素[6]。妊娠時(shí)期作為胎兒孕育生長(zhǎng)的關(guān)鍵階段，期間母體發(fā)生HBV感染后，不僅使產(chǎn)婦的健康受損，同時(shí)也會(huì)導(dǎo)致胎兒發(fā)生HBV感染，進(jìn)而對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育造成不良影響[7]。

本研究將456 例HBsAg 陽(yáng)性產(chǎn)婦作為研究對(duì)象，對(duì)其HBV-DNA定量檢測(cè)結(jié)果及乙肝兩對(duì)半檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行觀察、分析發(fā)現(xiàn)：456 例HBsAg 陽(yáng)性產(chǎn)婦的HBV血清學(xué)模式包括大三陽(yáng)、小三陽(yáng)和HBsAg 伴抗-HBc陽(yáng)性三種，其中小三陽(yáng)211 例，占46.27%，大三陽(yáng)172例，占37.72%，其他類(lèi)型73 例，占16.01%。456 例HBsAg 陽(yáng)性產(chǎn)婦分娩的新生兒有89 例為HBsAg 陽(yáng)性，母嬰垂直傳播率為19.52%。上述結(jié)果說(shuō)明，HBsAg 陽(yáng)性產(chǎn)婦的HBV NDA 載量水平偏高，在臨床上具有較強(qiáng)的傳染性，母嬰傳播率較高，及早明確母體HBV感染，積極進(jìn)行母嬰傳播阻斷是乙型肝炎防控的關(guān)鍵[8-9]。

HBV DNA 載量是衡量HBV 病毒復(fù)制和傳染性的最可靠指標(biāo)，HBV DNA 載量水平越高代表病毒復(fù)制越活躍，傳染性越強(qiáng)[10]。相關(guān)研究結(jié)果表明，HBV DNA 載量水平越高，HBV 母嬰傳播率越高，HBV DNA載量水平是影響HBV母嬰傳播的主要因素。母體HBV DNA載量高于108copies/mL時(shí)，即使對(duì)新生兒采用主、被動(dòng)免疫，其宮內(nèi)感染率也仍能夠達(dá)到40%以上。母體HBV DNA 載量低于106copies/mL 時(shí)，HBV母嬰垂直傳播的危險(xiǎn)性則能夠減少30%左右[11]。本研究結(jié)果顯示，HBV NDA載量越高的孕產(chǎn)婦，其新生兒臍帶血的HBV DNA 載量水平以及HBV DNA 陽(yáng)性率、HBsAg陽(yáng)性率越高，HBsAb陽(yáng)性率越低，這一結(jié)果表明新生兒HBV 感染率隨著產(chǎn)婦血液中HBV DNA載量水平的升高而呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，HBV DNA 載量水平高低是影響HBV母嬰傳播的重要因素[12-13]。

HBsAg 產(chǎn)婦在HBV 感染過(guò)程中，不同的HBV 血清學(xué)模式代表機(jī)體不同的感染就免疫應(yīng)答狀態(tài)[14]。本研究結(jié)果顯示，不同血清學(xué)模式產(chǎn)婦在新生兒臍帶血的HBV DNA 載量水平以及HBV DNA 陽(yáng)性率、HBsAg 陽(yáng)性率和HBsAb 陽(yáng)性率比較存在明顯差異。大三陽(yáng)產(chǎn)婦新生兒臍帶血的HBV DNA 載量水平、HBV DNA 陽(yáng)性率、HBsAg 陽(yáng)性率最高，小三陽(yáng)次之，HBsAg 伴抗-HBc 陽(yáng)性最低。HBsAb 陽(yáng)性率上，大三陽(yáng)最低，小三陽(yáng)次之，HBsAg 伴抗-HBc 陽(yáng)性最高。三種HBV 血清學(xué)模式的差別在于HBeAg 的血清學(xué)轉(zhuǎn)換，HBeAg 陽(yáng)性通常代表HBV 病毒處于活躍期[15-16]，HBV 病毒復(fù)制能力較強(qiáng)速度較快，傳染性較高，這在一定程度上影響了新生兒感染HBV的機(jī)率。

總之，HBsAg 陽(yáng)性產(chǎn)婦多表現(xiàn)為HBV DNA 高病毒載量，傳染性較強(qiáng)，HBV 母嬰傳播率較高，HBV-DNA 載量水平以及血清學(xué)模式是影響HBV 母嬰傳播的重要因素。妊娠期間定期對(duì)HBsAg 陽(yáng)性產(chǎn)婦進(jìn)行乙肝兩對(duì)半檢測(cè)及HBV DNA定量檢測(cè)對(duì)于監(jiān)測(cè)評(píng)估HBV母嬰傳播風(fēng)險(xiǎn)、預(yù)防母嬰傳播發(fā)生都具有重要意義。