董玉鵬，孫 萍，李永才*，畢 陽，張 苗，黃 怡，張婷婷

（甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，甘肅 蘭州 730070）

早酥梨（Pyrus bretchneideri cv. Zaosu）是中國西北地區(qū)主栽的梨品種，其果大核小、果皮翠綠，質(zhì)細(xì)酥脆、汁多味甜，深受消費(fèi)者青睞[1]。然而早酥梨通常采收于夏季高溫時(shí)節(jié)，快速的品質(zhì)劣變及腐敗致使采后果實(shí)損失嚴(yán)重，制約了早酥梨產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展[2]。其中由互隔交鏈孢（Alternaria alte rnata）引起的黑斑病是早酥梨采后主要的病害之一[3]，A. alternata能在室溫或低溫環(huán)境下快速生長而使果實(shí)腐敗變質(zhì)，并在生長過程中產(chǎn)生多種真菌毒素，對人類和動物健康造成潛在安全風(fēng)險(xiǎn)[4]。目前主要采用抑霉唑和噻苯達(dá)唑[5]等化學(xué)殺菌劑控制梨果采后病害，但長期使用化學(xué)殺菌劑會導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性和環(huán)境污染，并危害人體健康[6]。因此，尋求和開發(fā)更加安全、高效的植物源殺菌劑來防治A. alternata引起的早酥梨黑斑病迫在眉睫[7]。

綠葉揮發(fā)物是植物不飽和脂肪酸經(jīng)過催化而形成的一類含有6 個(gè)碳的小分子醛、醇和酯類化合物[8]。其主要參與植物特殊氣味形成，在植物直接和間接防御應(yīng)答中發(fā)揮重要作用[9]，其中很多揮發(fā)物具有抑菌、殺菌作用。孟雪等[10]發(fā)現(xiàn)，綠蘿和常春藤的3 種主要揮發(fā)物α-蒎烯、莰烯和桉樹腦對枝孢霉（Cladosporium sp.）、鏈格孢（Alternaria sp.）、附球菌（Epicoccum sp.）、青霉（Penicillium sp.）和黑曲霉（Aspergillus niger）具有較強(qiáng)的抑菌作用。梁海燕等[11]研究發(fā)現(xiàn)(Z)-3-己烯醛、(Z)-3-己烯醇、(E)-2-己烯-1-醇等7 種綠葉揮發(fā)物均對黃曲霉的菌絲生長有明顯抑 制作用；同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)芳樟醇、檸檬烯、(E)-2-己烯醛等12 種揮發(fā)物對哈茨木霉（Trichoderma harzianum）的生長和產(chǎn)孢量均有抑制作用[12]。其中反式-2-己烯醛（C6H10O）屬于綠葉揮發(fā)物的一種，是大多數(shù)綠色植物受損傷后都能快速合成并釋放的揮發(fā)性物質(zhì)。已有研究表明反式-2-己烯醛能顯著抑制黃曲霉菌（Aspergillus fiavus）[13]和草莓炭疽病菌（Colletotrichum acutatum）[14]的菌絲生長。Menniti等[15]還發(fā)現(xiàn)反式-2-己烯醛對玉米粒儲藏期病原菌串珠鐮刀菌（Fusarium verticillioides）有顯著的抑制作用。目前有關(guān)反式-2-己烯醛對梨果黑斑病菌（A. alternata）的抑菌作用及其機(jī)理鮮見 報(bào)道。因此本實(shí)驗(yàn)以梨果黑斑病菌A. alternata為對象，研究植物源揮發(fā)性物質(zhì)反式-2-己烯醛對A. al ternata生長的抑制和對黑斑病的控制作用，并進(jìn)一步探討其抑菌作用的機(jī)理， 以期為反式-2-己烯醛作為天然防腐殺菌劑在果蔬采后病害控制中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 菌株、材料與試劑

供試鏈格孢Alternaria alternat a分離于貯藏中自然發(fā)病的梨果實(shí)，純化、鑒定后用馬鈴薯葡萄糖瓊脂（potato dextrose agar，PDA）培養(yǎng)基保存待用。

供試早酥梨采摘于甘肅省景泰縣條山農(nóng)場，挑選大小一致、無機(jī)械損傷、無病蟲害的果實(shí)， 紙箱包 裝后運(yùn)達(dá)實(shí)驗(yàn)室，冷庫低溫貯藏待用。

反式-2-己烯醛（純度≥98%） 上海麥克林生化科技有限公司；毒素標(biāo)準(zhǔn)品 上海源葉生物科技有限公司；氯化鈉、硫酸鎂和乙醇等試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

LDZX-30KBS立式壓力蒸汽滅菌鍋 上海申安醫(yī)療器械廠；SW-CJ-2FD超凈工作臺 蘇州安泰空氣 技術(shù)有限公司；DHP-9272B型恒溫培養(yǎng)箱 上海一恒科技有限公司；CX21FSIC光學(xué)顯微鏡、DDS-370型微型電導(dǎo)儀日本奧林巴斯 工業(yè)有限公司；UV2450型紫外分光光度計(jì)日本島津公司；H-1850R型臺式 高速冷凍離心機(jī) 長沙湘儀離心機(jī)有限公司；A WL-1002-M超純水儀 美國艾科浦國際有限公司；U-LH100-3 型熒光顯微鏡 上海永科光學(xué)儀器公司。

1.3 方法

1.3.1 A. alternata孢子懸浮液的配制

參照高春麗等[16]的方法并略作修改，向在無菌操作條件下向培養(yǎng)5 d的A. alternata培養(yǎng)皿中倒入少量無菌水，并加入少量質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.01% Tween-80，用滅菌的涂布器輕刮，將所得溶液通過4 層紗布過濾到滅菌三角瓶中，用無菌水稀釋，在混合器上振蕩15 s，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，配制成1×106個(gè)/mL孢子懸浮液。1.3.2 A. alternata生長及致病性分析1.3.2.1 A. alternata孢子萌發(fā)率的測定

采用紙片擴(kuò)散法測定A. alternata孢子萌發(fā)率，無菌條件下，用打孔器制取直徑為9 mm的質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%瓊脂培養(yǎng)基，置于滅過菌的載玻片上，滴加上述孢子懸浮液20 μL，再用無菌鑷子取一濾紙片（直徑15 mm）置于皿蓋中央，在濾紙片上加入0.5、1.0、1.5 μL/mL和2.0 μL/mL的反式-2-己烯醛溶液各20 μL，以無菌水作對照，于27 ℃孵育，6 h后鏡檢觀察孢子萌發(fā)情況。每次鏡檢100 個(gè)真菌孢子，每次實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。孢子萌發(fā)率計(jì)算如下式所示。

1.3.2.2 A. alte rnata菌絲生長情況分析

采用濾紙片擴(kuò)散法測定菌落直徑，使用直徑為90 mm的培養(yǎng)皿培養(yǎng)，每皿加入PDA培養(yǎng)基20 mL，待培養(yǎng)基凝固后，分別接種27 ℃下培養(yǎng)7 d的直徑為8 mm的菌餅，再用無菌鑷子取一濾紙片（直徑15 mm）置于皿蓋中央，在濾紙片上加入0.5、1、1.5 μL/mL和2 μL/mL的反式-2-己烯醛溶液各20 μL，以無菌水作對照，然后27 ℃條件下恒溫培養(yǎng)5 d，采用十字交叉法測量菌落直徑。每個(gè)處理重復(fù)3 次。

1.3.2.3 早酥梨果實(shí)黑斑病病斑直徑的測定

參照Moscoso-Ramírez[17]和張智毅[18]等的方法略作修改，選擇貯藏于5～10 ℃下的外觀整齊、無病蟲害的早酥梨，先用自來水沖洗后，再用體積分?jǐn)?shù)2%的次氯酸鈉溶液浸泡3 min進(jìn)行表面消毒，然后再用無菌水沖洗后在實(shí)驗(yàn)臺上自然晾干，隨后再用體積分?jǐn)?shù)75%乙醇溶液進(jìn)行表面消毒，最后用高壓滅菌的打孔器（直徑3 mm）在果實(shí)赤道部位均勻打出3 mm×3 mm的傷口3 個(gè)，1 h后用移液槍接種25 μL孢子懸浮液，室溫下晾干，2 h后放于塑料托盤中，快速放入盛有0.5、1、1.5 μL/mL和2 μL/mL反式-2-己烯醛溶液燒杯的塑料密封盒（38 cm×25 cm×14 cm）內(nèi)，立即密封，熏蒸12 h。無菌水作對照，熏蒸結(jié)束后用市售聚乙烯保鮮袋（40 cm×25 cm，厚度0.02 mm）包裝，在室溫（（26±2）℃）下進(jìn)行貯藏，每隔1 d觀察并測定病斑 直徑。每個(gè)處理用果實(shí)10 個(gè)，重復(fù)3 次。

1.3.3A. alternata細(xì)胞膜完整性分析

1.3.3.1A. alternata細(xì)胞膜完整率測定

向1.3.1節(jié)中得到的孢子懸浮液（1×106個(gè)/mL）中分別加入等量的劑量為1、2 μL/mL的反式-2-己烯醛溶液，以無菌水作為對照，混合均勻，（26±2）℃避光靜置30 min后，用0.5 mL磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）（pH 7.0）沖洗后，離心后所得孢子沉淀再重懸于含有20 ng/mL碘化丙啶（propidium iodide，PI）的PBS（pH 7.0）中，在U-LH100-3型熒光顯微鏡下（激發(fā)波長為620 nm）觀察拍照。每次實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

1.3.3.2A. alternata細(xì)胞膜電導(dǎo)率測定

采用微型電導(dǎo)儀測定反式-2-己烯醛對A. alternata電導(dǎo)率的影響。將A. alternata接種于PDA培養(yǎng)基中，27 ℃培養(yǎng)4 d后，取菌絲體3 g在PBS（pH 7.0）中混和均勻。加入劑量為1、2 μL/mL反式-2-己烯醛溶液中分別處理 0、30、60、120、150、180 min后，測定其細(xì)胞膜電導(dǎo)率，用PBS（pH 7.0）作對照。每個(gè)處理重復(fù)3 次。

1.3.3.3A. alternata核酸滲漏量測定

參照Paul等[19]的方法略作修改，A. alternata培養(yǎng)及處理方法同1.3.3.2節(jié)，加入劑量為1、2 μL/mL反式-2-己烯醛溶液中分別處理1、2、3、4、5 h取樣，12 000 r/min離心2 min收集上清液，在260 nm波長處測定吸光度，對照組用PB S（pH 7.0）進(jìn)行校正。每個(gè)處理重復(fù)3 次。

1.3.4A. alternata毒素提取與分析

1.3.4.1A. alternata毒素標(biāo) 準(zhǔn)溶液的配制

標(biāo)準(zhǔn)貯備液：用甲醇準(zhǔn)確定容1 mg標(biāo)準(zhǔn)品至1 mL，配成1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液，密封冷凍儲存于－20 ℃冰箱。

標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別配制10、20、50、100、200 μg/mL和1 000 μg/mL的交鏈格孢酚單甲醚（alternariol monomethyl ether，AME）、鏈格孢酚（alternariol，AOH）的標(biāo)準(zhǔn)溶液，5、50、100、200、500 μg/mL和1 000 μg/mL的交鏈格烯（altenuene，ALT）和騰毒素（tentoxin，TEN）的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，密封保存于－20 ℃冰箱。

1.3.4.2 真菌毒素 的提取與測定

準(zhǔn)確稱取用2 μL/mL反式-2-己烯醛處理后培養(yǎng)4 d的A. alternata菌絲0.50 g（精確至0.01 g），冰浴研磨均勻，置于10 mL無菌離心管中，加入2.5 mL含體積分?jǐn)?shù)0.3%甲酸的乙腈-水（80∶20，V/V）的提取液，漩渦混勻，150 r/min常溫提取30 min，再加入0.25 g無水MgSO4和0.04 g NaCl，劇烈振蕩1 min后，以10 000 r/min離心10 min，取上清液過0.22 μm有機(jī)濾膜，準(zhǔn)確定容至1.2 mL，采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。

色譜條件：色譜柱為C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫為35 ℃；進(jìn)樣量為5 μL；流動相A為去離子水，流動相B為甲醇；梯度洗脫條件為70% A保持1 min后，2 min內(nèi)降至50%后在1 min內(nèi)繼續(xù)降至10%，保持2 min，之后在0.1 min內(nèi)升至90%，保持2 min；流速0.3 mL/min；總運(yùn)行時(shí)間7.1 min。

質(zhì)譜條件：離子源模式：正離子模式，電噴霧離子源（ESI+）；質(zhì)譜掃描方式：多重反應(yīng)監(jiān)測；鞘氣溫度：350 ℃；霧化器壓力：35 psi；鞘氣流量：11.0 L/min；毛細(xì)管電壓：4 000 V，其他參數(shù)通過儀器調(diào)至最優(yōu)。

4 種鏈格孢霉毒素的監(jiān)測離子、錐孔電壓和碰撞電壓等質(zhì)譜參數(shù)如表1所示。

表1 4 種真菌毒素的串聯(lián)質(zhì)譜檢測參數(shù)Table 1 Optimized tandem mass parameters for 4 mycotoxins

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2007軟件計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差，并用Origin 8.0軟件作圖，用SPSS 20.0軟件對得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，采用Duncan’s多重差異顯著分析，以P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 反式-2-己烯醛處理對A. alternata生長及致病性的影響

2.1.1 反式-2-己烯醛處理對A. a lte rnata孢子萌發(fā)和菌絲生長的影響

圖1 反式-2-己烯醛處理對A. alternnaattaa孢 子萌發(fā)（6 h）（A）和菌絲生長（5 d）（B）的影響Fig. 1 Effect of trans-2-hexenal treatment on spore germination (6 h) (A)and mycelial growth (5 d) (B) of A. altern ata

從圖1A可知，反式-2-己烯醛處理顯著抑制了A. alternata孢子的萌發(fā)（P＜0.05），且其抑制效果隨處理劑量的增加而增強(qiáng)，當(dāng)處理劑量為2 μL/mL時(shí)，孢子的萌發(fā)率 僅為對照的13.90%。同時(shí)反式-2-己烯醛熏蒸處理也顯著地抑制了A. alternata菌絲生長（P＜0.05），且其抑制作用 也存在顯著的劑量依賴性，當(dāng)劑量為2 μL/mL時(shí)，其 菌落直徑僅為對照組的36.67%（圖1B）。

2.1.2 反式-2-己烯醛處理 對損傷接種早酥梨黑斑病擴(kuò)展的影響

圖2 反式-2-己烯醛處理對早酥梨黑斑病擴(kuò)展的影響（（26±2）℃、7 d）Fig. 2 Effect o f trans-2-hexenal treatment on lesion diameter of black spot in pear fruit (after storage at (26 ± 2) ℃ for 7 d)

反式-2-己烯醛熏蒸處理顯著抑制了損傷接種A. alternata早酥梨果實(shí)黑斑病的擴(kuò)展（圖2），且病斑直徑與反式-2-己烯醛的處理劑量呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），貯藏7 d時(shí)，2 μL/mL反式2-己烯醛處理組果實(shí)病斑直徑僅為對照組的50%。

2.2 反式-2-己烯醛處理對A. alternata細(xì)胞膜完整性的影響

2.2.1 反式-2-己烯醛處理后PI染色檢測細(xì)胞膜完整率

圖3 反式-2-己烯醛處理后PI染色檢測細(xì)胞膜完整率（A）和PI染色細(xì)胞比例（BB）Fig. 3 Examination of cell membrane integrity after trans-2-hexenal treatment by propidium iodide (PI) staining (A) and PI staining percentage (B)

PI染色結(jié)果表明，對照組A. alternata的熒光強(qiáng)度極其微弱，而反式 -2-己烯醛處理的A. alternata熒光強(qiáng)度隨處理劑量的增加明顯增強(qiáng)（圖3A），表明A. alternata的細(xì)胞膜遭到了嚴(yán)重的破壞。進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析表明，對照組的細(xì)胞膜完整率為89.33%，1 μL/mL反式-2-己烯醛處理的A. alternata細(xì)胞膜完整率較對照下降20%，當(dāng)反式-2-己烯醛劑量達(dá)到2 μL/mL時(shí)，細(xì) 胞膜的完整率僅為52%（圖3B）。

2.2.2 反式-2-己烯醛處理對A. alternata電導(dǎo)率的影響

圖4 反式-2-己烯醛處理對A. alternata細(xì)胞膜電導(dǎo)率的影響Fig. 4 Effect of the trans-2-hexenal on treatment on cell membr ane electrical conductivity of A. alternata

A. alternata對照組的菌絲體電導(dǎo)率隨處理時(shí)間的延長稍有增大，120 min后基本保持不變，而反式-2-己烯醛處理的A. alternata菌絲體電導(dǎo)率顯著高于對照組（P＜0.05），且隨處理時(shí)間延長和處理劑量的增加而逐漸增大（圖4），其中2 μL/mL反式-2-己烯醛處理的A. alternata菌絲體的電導(dǎo)率 在處理后的180 min時(shí)高達(dá)對照組的2.31 倍。

2.2.3 反式-2-己烯醛處理對A. alternata核酸滲漏的影響

圖5 反式-2-己烯醛處理對A. alternata核酸滲漏的影響Fig. 5 Effect of the trans-2-hexenal treatmen t on leakage of nuclear acid from A. alternata

反式-2-己烯醛處理加速了A. alternata核酸外滲（圖5），且隨著反式-2-己烯醛處理劑量的增加，培養(yǎng)液中核酸含量顯著提高（P＜0.05）。處理后5 h時(shí)，2 μL/mL反式-2-己烯醛處理A. alternata后培養(yǎng)液中核酸含量為對照組的2.98 倍。

2.4 反式-2-己烯醛處理對A. alternata毒素產(chǎn)生的影響

圖6 反式-2-己烯醛處理對A. alternaattaa毒素產(chǎn)生的影響（44 dd）Fig. 6 Effect of trans-2-hexenal treatment on mycotoxin production of A. alternata (4 d)

對離體條件下A. alternata生長過程中毒素的產(chǎn)生進(jìn)行分析比較。結(jié)果表明，A. alternata生長過程中，菌絲體中會有大量的AME、AOH、ALT和TEN生成，而反式-2-己烯醛處理顯著抑制了A. alternata菌絲體中AME、AOH、ALT和TEN 4 種主要毒素的產(chǎn)生（圖6），雖然反式-2-己烯醛處理對不同毒素產(chǎn)生的抑制作用存在差異，但反式-2-己烯醛處理后，A. alternata菌絲體中4 種毒素產(chǎn)生量均顯著低于對 照（P＜0.05）。其中，2 μL/mL反式-2-己烯醛處理后A. alternata中AME、AOH、ALT和TEN毒素含量分別為對照的51.09%、86.16%、16.67%和38.85%。

3 討 論

已有研究表明，作為綠葉揮發(fā)物的反式-2-己烯醛具有顯著的抑菌活性和防腐作用。本研究結(jié)果表明：2 μL/mL反式-2-己烯醛熏蒸處理能顯著抑制A. alternata孢子萌發(fā)和菌絲生長（圖1），且能夠有效控制梨果黑斑病的擴(kuò)展（圖2）。這一結(jié)果與趙璐玲等[20]在玉米黃曲霉控制中的研究相似，其發(fā)現(xiàn)0.05 μL/mL反式-2-己烯醛熏蒸12 h能完全抑制儲藏玉米中黃曲霉的生長，而當(dāng)劑量達(dá)到0.1 μL/mL時(shí)，反式-2-己烯醛對獼猴桃貯藏過程中擴(kuò)展青霉（Penicillium expansum）菌絲生長具有顯著的抑制作用[21]。另外Archbold等[22]研究發(fā)現(xiàn)用1.71 mmol/L的反式-2-己烯醛熏蒸處理可以降低無籽葡萄貯藏期間霉菌的發(fā)生率?？梢姺词?2-己烯醛具有廣譜的抗菌活性，但不同病原菌及寄主對反式-2-己烯醛的敏感性存在差異。

完整的細(xì)胞膜是菌體正常生長代謝的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)[23]，大多數(shù)抑菌活性物質(zhì)通過影響細(xì)胞膜完整性而發(fā)揮作用。已有 研究發(fā)現(xiàn)1.08 mg/mL的檸 檬 醛使阪崎腸桿菌細(xì)胞 膜完整率較對照降低15%[24]；0.25 mg/mL的茴香精油能夠破壞志賀氏菌細(xì)胞膜完整性[25]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)2 μL/mL的反式-2-己烯醛處理嚴(yán)重地破壞了A. alternata細(xì)胞膜完整性（圖3）。病原物細(xì)胞膜被破壞后，細(xì)胞膜流動性喪失，細(xì)胞內(nèi)電解質(zhì)泄漏[26]，致使 溶液中的電導(dǎo)率升高，并伴隨一些重要細(xì)胞內(nèi)含物如蛋白質(zhì)、核酸和糖類物質(zhì)流出，嚴(yán)重影響菌體的正常生長。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)反式-2-己烯醛處理顯著提高了A. a lternata膜電導(dǎo)率（圖4）和核酸滲出率（圖5）。同樣地，陶能國等[27]發(fā)現(xiàn)檸檬醛+辛醛混合物能破壞指狀青霉的細(xì)胞膜完整性，增大細(xì)胞膜電導(dǎo)率，導(dǎo)致核酸等細(xì)胞內(nèi)含物泄漏。Li Wusun等[28]研究還發(fā)現(xiàn)242.5 mg/L的對香豆酸甲酯處理能夠引起A. alternata細(xì)胞間電解質(zhì)、可溶性蛋白、糖和核苷酸大量滲漏。有研究認(rèn)為反式-2-己烯醛之所以有較強(qiáng)的抑菌活性 ，可能因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)中的α-、β-不飽和羰基能與病原菌細(xì)胞膜上的親電基團(tuán)（如巰基或氨基）發(fā)生加合反應(yīng)，形成加合物，而使病原菌“失活”[29]。還有研究發(fā)現(xiàn)反式-2-己烯醛是通過抑制己糖或氨基己糖等真菌細(xì)胞壁特有成分的生物合成路徑而破壞細(xì)胞壁達(dá)到抑菌作用[30]。關(guān)于反式-2-己烯醛的作用靶點(diǎn)及具體抑菌機(jī)理，尚需進(jìn)一步研究。

A. alternata作為果蔬采后主要致腐病原物，其不僅能導(dǎo)致果蔬腐爛，而且侵染過程中還會產(chǎn)生多種鏈格孢毒素，部分毒素污染后會造成人和 動物急性或慢性中毒，甚至具有致畸、致癌、致突變作用；因此，抑制真菌毒素產(chǎn)生或加速其降解對保障果蔬安全具有十分重要的意義[31-32]。本研究發(fā)現(xiàn)綠葉揮發(fā)物質(zhì)反式-2-己烯醛處理，能有效地抑制A. alternata 4 種真菌毒素的合成，且抑制作用因毒素種類而不同（圖6）。Yun等[33]報(bào)道肉桂醛可以使肉湯培養(yǎng)中黃曲霉毒素的產(chǎn)量降低60%，同樣有大量研究表明精油中的揮發(fā)性化 合物能抑制真菌毒素的合成[34-35]。但Xu Lingchun等[36]還發(fā)現(xiàn)0.2 μL/mL的肉桂醛處理對A. alternata AOH和AME毒素具有體內(nèi)降解作用。但有關(guān)反式-2-己烯醛對A. alternata 毒素合成的調(diào)控機(jī)理仍需進(jìn)一步研究闡明。

4 結(jié) 論

綠葉揮發(fā)物質(zhì)反式-2-己烯醛能夠顯著抑制A. alternata孢子萌發(fā)和菌絲生長，并有效控制梨果黑斑病的擴(kuò)展，且其作用效果存在劑量依賴性。反式-2-己烯醛處理嚴(yán)重地破壞了A. alte rnata細(xì)胞膜完整性，增加了細(xì)胞膜透性，導(dǎo)致核酸外滲。反式-2-己烯醛處理能顯著抑制A. alternate AME、AOH、ALT和TEN 4 種毒素的合成。