張桐棟

摘 要：隨著生活水平的提高，人們越來越關注生活中所食用生物產品的營養(yǎng)價值。脂肪酸作為油脂的主要成分，具有很多特殊的生理功能。本文著重比較了不同脂肪酸衍生化方法對多種油脂中脂肪酸組分的定性定量分析結果，同時提供了一種可用于微量油脂檢測的脂肪酸分析方法，以期為相關領域的研究和檢驗人員提供參考和借鑒。

關鍵詞：油脂;魚油;植物油;脂肪酸;氣相色譜-氫火焰離子化檢測器

Abstract：With the improvement of living standards， people are paying heavy attention to the nutritional value of biological products. Fatty acids as the main component of oils and fats， have some special physiological functions. The objective of this article is focusing on comparing the qualitative and quantitative analysis results of different fatty acid derivatization methods for fatty acid components in various oils. This work may provides a fatty acid analysis method that can be used for trace oils and fats; in addition， it provides new ideas for related researchers.

Key words：Oil; Fish oil; Vegetable oil; Fatty acids; GC-FID

中圖分類號：R151.4+1

脂肪酸在人體中具有重要的生理功能，不同油脂的脂肪酸組成具有較大差異。醫(yī)學研究證實，適量攝入多不飽和脂肪酸（PUFA），特別是n-3 PUFA，如二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA），有助于降低冠心病、動脈硬化、癌癥、糖尿病、高血壓、抑郁及其他一系列疾病的發(fā)生率[1-3]。目前，市售的n-3 PUFA主要來自魚油、藻油等海洋生物油脂。常見的其他種類食用油脂，如玉米油、橄欖油，一般也含有特別的脂肪酸組分。

油脂中的脂肪酸組成和含量一般使用氣相色譜（GC）進行分析檢測，為提高GC檢測靈敏度，通常將油脂進行前處理，即把脂肪酸衍生為?；ィㄒ话銥榧柞ィ?。目前，應用最廣的脂肪酸衍生化方法主要是H2SO4催化法和BF3催化法，可以有效甲酯化幾乎所有的脂質，如甘油酯、游離脂肪酸。但是這類脂肪酸衍生化方法一般需要利用較多的原料油脂，才能進行準確的甲酯化分析，不能滿足某些實驗室對油脂進行微量分析的需要。此外，不同衍生化方法對于不同油脂中脂肪酸的分析效果也具有一定差異，需進行比較研究。本文在總結前人相關工作的基礎上，提供一種油脂中脂肪酸的微量測定方法，并利用不同衍生化方法對多種食用油脂中脂肪酸組成進行對比分析，以期為國內相關領域的研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器。配備自動進樣器的Agilent 7890B氣相色譜儀（FID檢測器），采用60 mFFAP色譜柱，購自蘭州中科安泰分析科技有限公司。

試劑。10 mg·mL-1脂肪酸甲酯混標，購自Sigma公司;正己烷、甲醇等分析純有機溶劑，購自賽默飛世爾（中國）有限公司;濃硫酸等其他試劑采用國藥集團化學試劑有限公司產品;市售國產魚油、進口魚油、玉米油、橄欖油均為正規(guī)途徑購買;藻油為某生物公司惠贈。

1.2 實驗方法

1.2.1 H2SO4催化衍生法

參考其他學者的研究并進行適當改進[4]。將10 mg

油脂與1 mL正己烷加入到樣品瓶中，漩渦混勻后移取100 μL溶液至裝有聚四氟乙烯內襯的8 mL進口玻璃反應瓶中，氮氣吹干溶劑。加入2 mL H2SO4-CH3OH（2%，m/m）溶液，在80 ℃烘箱中反應2～2.5 h，

每30 min漩渦混勻。反應結束后降至室溫，加入1 mL正己烷、1 mL飽和氯化鈉溶液，2 500 r·min-1離心5 min，

吸取上清液。然后加入0.5 mL正己烷，重復提取2次，合并上清液。氮氣吹干溶劑后，加入1 mL正己烷定容，待GC檢測。

1.2.2 BF3催化衍生法

將10 mg油脂與1 mL正己烷加入樣品瓶中，漩渦混勻后移取100 μL溶液至裝有聚四氟乙烯內襯的8 mL進口玻璃反應瓶中，氮氣吹干。加入2 mL 14% BF3-CH3OH溶液，在70 ℃烘箱中反應1 h，每20 min漩渦混勻。反應結束后降至室溫，加入1 mL正己烷、1 mL飽和氯化鈉溶液，2 500 r·min-1離心5 min，吸取保留上清液。然后加入0.5 mL正己烷，重復提取2次，合并上清液。氮氣吹干后，加入1 mL正己烷定容，待GC檢測。

1.2.3 GC-FID運行參數(shù)

柱箱初始溫度為100 ℃;7.5 ℃·min-1升溫至250 ℃，保持30 min;He為載氣;流速1.5 mL·min-1;進樣量2 μL。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析

進行平行實驗，結果取平均值。利用外標法進行脂肪酸甲酯的數(shù)據(jù)分析，標準溶液的濃度選?。?0.0、7.5、5.0、2.5 mg·mL-1和1.0 mg·mL-1。利用這5個濃度梯度做外標法標準曲線。

2 結果與分析