饒 瑤

（江西科技學(xué)院，江西 南昌 330098）

雞腿菇（Coprinus comatus），學(xué)名“毛頭鬼傘”，通體較白，菌桿細(xì)長，形如雞腿，而且菌肉也與雞絲形態(tài)相似，因此而得名，但其本身卻并無雞肉味。雞腿菇味道鮮美、肉質(zhì)細(xì)膩，烹飪時(shí)久煮不爛，口感滑嫩，是倍受青睞的美食；同時(shí)，雞腿菇也是一種藥用菌，具有降糖、通便消渴的功效，對(duì)糖尿病、痔瘡等有良好的治療效果，還具有安神助眠、提高人體免疫力的作用，對(duì)運(yùn)動(dòng)人群還具有抗氧化、抗疲勞的功效[1]。這些功效主要得益于雞腿菇中含有的多糖，雞腿菇多糖具有抗菌、抗氧化的作用，可以提高人體耐缺氧能力，降低血液的粘稠度，增加心肌收縮力[2]。因此，常被用于運(yùn)動(dòng)員訓(xùn)練后的恢復(fù)和保健，對(duì)運(yùn)動(dòng)員的身體健康，保持運(yùn)動(dòng)機(jī)能具有重要的作用。雞腿菇多糖雖然在運(yùn)動(dòng)恢復(fù)和提升免疫力方面有一定功效，但其作用機(jī)理和臨床研究還不成熟，而且對(duì)于大分子的雞腿菇多糖，其組成成份比較復(fù)雜，多糖的穩(wěn)定性和抗氧化活性還需要進(jìn)一步研究。對(duì)雞腿菇多糖的穩(wěn)定性和對(duì)運(yùn)動(dòng)員身體的抗氧化性活性開展研究，通過試驗(yàn)討論雞腿菇多糖對(duì)減輕疲勞的影響。

1 試驗(yàn)材料和設(shè)備

1.1 材料與試劑

鄰二氮菲，成都化學(xué)試劑廠；硫酸亞鐵、過氧化氫，西安化學(xué)試劑廠；95%乙醇，天津市百世化工有限公司；DPPH（1，1-二苯基-2-三硝基苯肼），日本東京化成工業(yè)株式會(huì)；以上試劑均為分析純。蒸餾水，濟(jì)南青玉元商貿(mào)有限公司；磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉，西安化學(xué)試劑廠；以上試劑均為化學(xué)純。

雞腿菇多糖樣品溶液自行配制，使用南京植佰萃生物科技有限公司產(chǎn)的雞腿菇多糖粉末（多糖含量為50%）。

1.2 儀器與設(shè)備

紫外可見分光光度計(jì)，上海元析儀器有限公司；電熱恒溫水浴鍋，北京化玻聯(lián)醫(yī)療器械有限公司；JA5003分析天平，上海精科天平有限公司；PHS-3C型pH計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司；FA2004電子天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司；RHP-225恒溫（干燥）箱，東莞市環(huán)瑞環(huán)境測試設(shè)備有限公司。

2 雞腿菇多糖抗氧化活性試驗(yàn)

自由基又稱游離基，是一種含有非偶電子的原子團(tuán)[3]，其化學(xué)反應(yīng)的活性極高，由于自由基缺少電子，因此總是在人體中到處搶奪人體細(xì)胞的電子，使正常細(xì)胞發(fā)生畸變，形成各種腫瘤細(xì)胞。人體中的自由基多來自于氧，所以這種自由基“掠奪電子”的現(xiàn)象在化學(xué)中稱之為“氧化”現(xiàn)象，這種氧自由基對(duì)人體的危害極大，會(huì)導(dǎo)致各種疾病產(chǎn)生，危害人體健康。即使在非疾病時(shí)期，對(duì)運(yùn)動(dòng)員來說的疲勞、腦缺血、耐力和體能下降等運(yùn)動(dòng)生理現(xiàn)象也有極大的影響[4]。因此，尋找外部清除自由基的物質(zhì)具有重要的意義。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，多糖類物質(zhì)具有很好的生物活性，具有清除自由基的功效，因此本文就對(duì)雞腿菇多糖的生物抗氧化活性進(jìn)行研究。

2.1 雞腿菇多糖對(duì)羥自由基（·OH）的清除試驗(yàn)

·OH通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生，利用過氧化氫（H2O2）與二價(jià)鐵離子（Fe2+）的混合反應(yīng)，F(xiàn)e2+被羥自由基氧化為Fe3+，產(chǎn)生的·OH氧化效果十分顯著，可以將有機(jī)化合物氧化為無機(jī)狀態(tài)。

因此，通過Fenton反應(yīng)來得到羥自由基[5]，通過比色法測定·OH的清除率。具體試驗(yàn)過程為，取0.75 mol·L-1鄰二氮菲溶液1 mL，在試管中加入0.2 moL·L-1的磷酸鹽緩沖溶液（pH 7.4） 1 mL；分別取濃度10%、20%、30%、40%、50%的雞腿菇多糖樣品溶液1 mL，加入試管混合搖勻，空白組加入1 mL蒸餾水；依次分別加入0.75 moL·L-1FeSO4溶液1 mL和0.01%H2O2溶液1 mL混合搖勻，對(duì)照組用蒸餾水替代H2O2，放入電熱恒溫水浴鍋于（40±2）℃保持30 min，然后使用分光光度計(jì)在540 nm處測量吸光度?！H清除率（OE，%） 的計(jì)算公式為：

式中：X為樣品吸光度；X0為空白吸光度；XC為對(duì)照吸光度。

2.2 雞腿菇多糖對(duì)DPPH·的清除試驗(yàn)

DPPH（1，1-二苯基-2-三硝基苯肼）自由基醇溶液呈紫色，根據(jù)DPPH·有單電子，在520 nm處有一強(qiáng)吸收，其醇溶液呈紫色。當(dāng)有自由自清除劑存在時(shí)，單對(duì)電子被配對(duì)，吸收消失或減弱，抗氧化劑（或稱自由基清除劑）能使單電子配對(duì)，從而使吸光度值消失或減弱，肉眼觀察也會(huì)有紫色溶液褪色的現(xiàn)象。因此通過測定吸光度值的減弱程度來可評(píng)估DPPH·清除劑的活性。將雞腿菇多糖樣品液2 mL加入到含0.1 moL·L-1的DPPH·的95%乙醇2 mL中，混合均勻后在室溫下避光靜置30 min，在520 nm處測量吸光度，空白組用2 mL蒸餾水替代樣品液。DPPH·清除率（DE，%）的計(jì)算公式為：

式中：X、X0分別為雞腿菇多糖樣品組和空白組的吸光值。

3 試驗(yàn)結(jié)果與討論

3.1 雞腿菇多糖對(duì)·OH的清除作用

濃度為10%、20%、30%、40%、50%的雞腿菇多糖樣品溶液對(duì)·OH的清除作用見圖1。

由圖1可知，雞腿菇多糖對(duì)·OH都具有一定的清除活性，且隨著濃度的增加清除作用增強(qiáng)。

3.2 雞腿菇多糖對(duì)DPPH·的清除作用

濃度為10%、20%、30%、40%、50%的雞腿菇多糖對(duì)DPPH·的清除作用見圖2。

由圖2可知，雞腿菇多糖對(duì)DPPH·都具有一定的清除活性，且隨著濃度的增加對(duì)DPPH·的清除作用增強(qiáng)。

4 結(jié)論

通過不同濃度的雞腿菇多糖溶液對(duì)·OH和DPPH·的清除作用試驗(yàn)表明，雞腿菇多糖對(duì)·OH和DPPH·都具有一定的清除活性，且清除率與多糖的濃度成正比關(guān)系，這說明雞腿菇多糖對(duì)運(yùn)動(dòng)員身體內(nèi)的自由基有很好的清除作用，而自由基是人體運(yùn)動(dòng)后出現(xiàn)疲勞的主要原因，雞腿菇多糖可以有效提高人體清除自由基的能力，防止人體細(xì)胞膜的過氧化損傷，減輕運(yùn)動(dòng)員的疲勞。