于學(xué)考，劉海東

（1.四川商務(wù)職業(yè)學(xué)院，四川 成都 611131；2.成都師范學(xué)院體育學(xué)院，四川 成都 611130）

猴頭菇（Hericium erinaceus） 屬于藥食兼用真菌，作為食用菌王國的珍品，以其藥用價(jià)值受到廣大消費(fèi)者的青睞。新鮮的猴頭菇子實(shí)體呈白色球形，干制品的猴頭菇子實(shí)體色澤白中帶黃，其肉質(zhì)、內(nèi)實(shí)，無柄，因其形狀似猴子的頭而得名。猴頭菇富含多種人體必需氨基酸、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)元素[1]，自古就有“山中猴頭，海味魚翅”的說法，與魚翅、熊掌、燕窩并譽(yù)為四大名菜。中醫(yī)認(rèn)為“猴頭菇性平味甘，有利五臟、能夠助消化、滋補(bǔ)身體”，常被用于胃病的治療[2]；而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，猴頭菇還能夠提高人體免疫力、延緩衰老，具有抗疲勞、滋養(yǎng)氣血等功效，猴頭菇子實(shí)體中的多糖是提高人體抗氧化能力和免疫力的活性物質(zhì)來源，也是其藥理活性的主要成分。猴頭菇多糖具有抗腫瘤、抗衰老、提高人體免疫力等作用，可清除人體內(nèi)各類活性氧自由基[3]。而自由基生物醫(yī)學(xué)理論研究表明，人體內(nèi)氧自由基的產(chǎn)生和清除是基本平衡的，當(dāng)機(jī)體內(nèi)的自由基過量時(shí)就會引起細(xì)胞內(nèi)多種物質(zhì)的不良變化等，導(dǎo)致運(yùn)動細(xì)胞損傷，引起衰老、疲勞等現(xiàn)象。通過針對猴頭菇多糖營養(yǎng)成分進(jìn)行測定分析，并對其氧化和還原穩(wěn)定性開展試驗(yàn)，研究分析猴頭菇多糖的含量和相關(guān)的理化性質(zhì)進(jìn)行測定，研究其對運(yùn)動細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用，為猴頭菇多糖產(chǎn)品的研制提供一定的理論依據(jù)。

1 試驗(yàn)試劑

試驗(yàn)主要材料為猴頭菇子實(shí)體粉，提取正常采用水提法制備猴頭菇多糖樣品溶液備用。

2 猴頭菇多糖體外抗氧化活性試驗(yàn)

2.1 對超氧陰離子（O2-）清除能力的測定

用 10 mmol·L-1HCl配置 30 mmol·L-1鄰苯三酚溶液0.4 mL；取pH 8的50 mmol·L-1三羥甲基氨基甲烷緩沖液5.4 mL，加入0.2 mL猴頭菇多糖樣品溶液搖勻；將兩溶液同時(shí)放入水浴鍋在（25±2）℃下靜置15 min，取出后迅速混合均勻，在320 nm處用分光光度計(jì)每隔30 s測量一次吸光度，共計(jì)時(shí)6 min，取12次吸光度的平均值作樣品組；用等量蒸餾水代替猴頭菇多糖樣品溶液，作為空白組；用10 mmol·L-1HCl溶液代替鄰苯三酚溶液，用等量蒸餾水代替猴頭菇多糖樣品溶液，作為對照組進(jìn)行對比試驗(yàn)，清除率（OE，%）計(jì)算公式為：

式中：X為樣品吸光度；X1為對照組吸光度；X0為空白組吸光度。

2.2 對1，1-二苯基-2-苦苯肼自由基（DPPH·）清除能力的測定

用無水乙醇為溶劑配置1 mL，0.03 mg·mL-1的DPPH·溶液，加入猴頭菇多糖樣品溶液2 mL，混合均勻后在室溫下靜置30 min，在520 nm處的測量其吸光度，作為樣品組；以2 mL蒸餾水代替猴頭菇多糖樣品溶液作為空白組；用2 mL無水乙醇混合液作為對照組進(jìn)行對比實(shí)驗(yàn)，DPPH·清除率（DE，%）計(jì)算方式為：

式中：X為樣品吸光度；X2為對照組吸光度；X0為空白組吸光度。

2.3 對羥自由基（·OH） 清除能力的測定

通過芬頓（Fenton） 反應(yīng)來得到·OH[4]，羥自由基和水楊酸的反應(yīng)會產(chǎn)生一種有色物質(zhì)，通過測量這種有色物質(zhì)的吸光度來測量·OH的清除能力。取猴頭菇多糖樣品溶液1 mL，依次加入4 mmol·L-1硫酸亞鐵液1 mL、0.01%H2O2溶液1 mL，每次加入均需混合均勻后再加入下一溶液，將最終的混合溶液放入恒溫水浴鍋，在（35±2）℃下水浴30 min。最后加入4 mmol·L-1的水楊酸溶液1 mL，混合均勻后在520 nm處測量其吸光度，作為樣品組；用1 mL蒸餾水代替1 mL水楊酸溶液，測量猴頭菇多糖樣品溶液的吸光度，作為本底組；用蒸餾水代替抗氧化劑作為空白對照組，·OH清除率（OHE，%）計(jì)算公式為：

式中：X為樣品吸光度；X3為對照組吸光度；X0為本底吸光度。

3 試驗(yàn)結(jié)果與分析

3.1 對超氧陰離子（O2-）清除效果

對猴頭菇多糖樣品進(jìn)行O2-的清除效果，結(jié)果如圖1所示。

由圖1可知，猴頭菇多糖對O2-的清除效果明顯，并隨猴頭菇多糖樣品溶液濃度升高，對O2-的清除效果越好，1 mg·mL-1濃度時(shí)對O2-的清除率可達(dá)到35.2%，當(dāng)濃度達(dá)到了10 mg·mL-1時(shí)O2-清除率可達(dá)58.5%，說明猴頭菇多糖具有較強(qiáng)的清除O2-的活性，且清除效果與多糖濃度成正比。

3.2 對1，1-二苯基-2-苦苯肼自由基（DPPH·）清除效果

對猴頭菇多糖樣品進(jìn)行DPPH·自由基的清除效果，結(jié)果如圖2所示。

由圖2可知，猴頭菇多糖對DPPH·的清除效果明顯，并隨猴頭菇多糖樣品溶液濃度升高，對DPPH·的清除效果越好，1 mg·mL-1濃度時(shí)對DPPH·的清除率可達(dá)42.3%，當(dāng)濃度達(dá)到10 mg·mL-1時(shí)DPPH·清除率可達(dá)74.1%，說明猴頭菇多糖具有較強(qiáng)的清除DPPH·的活性，且清除效果與多糖濃度成正比。

3.3 對羥自由基（·OH） 清除效果

對猴頭菇多糖進(jìn)行·OH的清除試驗(yàn)，結(jié)果如圖3所示。

由圖3可知，猴頭菇多糖對·OH的有較高的清除率，是一種較好的·OH清除劑。并且隨著多糖的濃度升高，對·OH的清除效果越好，1 mg·mL-1的猴頭菇多糖對·OH的清除率為22.3%，10 mg·mL-1的猴頭菇多糖對·OH的清除率達(dá)55.6%，說明猴頭菇多糖也是一種較好的·OH清除劑。

4 結(jié)論

以猴頭菇子實(shí)體為原料，對猴頭菇子實(shí)體的體外抗氧化性進(jìn)行了研究。通過對O2-、DPPH·、·OH的清除效果試驗(yàn)表明，猴頭菇多糖具有良好的清除多種自由基的能力，且清除效果與多糖的濃度成正比關(guān)系。這說明猴頭菇多糖有良好的體外抗氧化活性，可以對運(yùn)動細(xì)胞氧化損傷直到一定的保護(hù)作用。