李 彥，賈燕午

（河南省三門峽市中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 三門峽 472000）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是臨床上常見的一種自身免疫性疾病，由于機(jī)體免疫功能失常，不能正確識(shí)別自身組織，產(chǎn)生大量抗體及免疫復(fù)合物而造成機(jī)體損傷，主要累及皮膚、關(guān)節(jié)、神經(jīng)、血液及身體重要臟器［1-2］?；颊咴缙诔１憩F(xiàn)為發(fā)熱、全身乏力及其他非特異性癥狀，在遭受感染、精神應(yīng)激等情況可加重病情，青年女性為多發(fā)人群［3-4］。系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病與遺傳、感染、環(huán)境等因素均有相關(guān)性，但其發(fā)病原因仍未闡明，因此該病在臨床上尚無(wú)治愈方法，只能通過(guò)早期診斷和治療將傷害降至最低［5-6］。本研究分析系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者抗核抗體（antinuclear antibodies,ANA）與抗可溶性抗原（extractable nuclear antigen,ENA）抗體譜檢測(cè)結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院2016年12月至2018年12月診治的100例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者為A組，同期收集92例其他類型的自身免疫病患者為B組，86例體檢正常健康者為C組。本研究開展前獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且征得檢測(cè)人員同意。A組納入標(biāo)準(zhǔn)：①確診為系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者；②近3周內(nèi)無(wú)阿片類藥物使用史；③臨床資料完整，對(duì)本研究配合者。A組排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并心血管、糖尿病等慢性病患者；②患有腫瘤者；③合并全身性嚴(yán)重感染者。B組中干燥綜合征17例，結(jié)締組織疾病36例，硬皮病7例，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎32例。三組年齡、性別等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。

表1 三組一般資料比較

1.2 標(biāo)本采集與貯存

所有研究對(duì)象（A組、B組、C組）均在采血前一天晚23∶00以后禁食禁水，于檢測(cè)當(dāng)日8∶00～9∶00采取靜脈血，靜置15～20 min后分離血清。具體參數(shù)為：轉(zhuǎn)速4 000 r/min，離心時(shí)間10 min。若當(dāng)日未能檢測(cè)完所有血清，須將未檢測(cè)血清放置于-20℃環(huán)境保存，并于3 d內(nèi)檢測(cè)完畢。

1.3 抗體檢測(cè)

1.3.1 ANA檢測(cè) 將稀釋后的血清（1/100、1/320、1/1 000）置入反應(yīng)區(qū)，反應(yīng)30 min，使用磷酸鹽緩沖溶液進(jìn)行沖洗并浸泡5 min，加入具有熒光標(biāo)記的抗人免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）G抗體，反應(yīng)30 min，再次使用磷酸鹽緩沖溶液進(jìn)行沖洗并浸泡5 min，取出使用甘油進(jìn)行封片處理，在490 nm波長(zhǎng)下觀察ANA熒光及熒光核型，抗體滴度＞1/100即為陽(yáng)性。

1.3.2 抗ENA抗體檢測(cè) 檢測(cè)三組血清內(nèi)15中特異性抗體，使用EUROScan軟件自動(dòng)判別，灰度值＞10即為陽(yáng)性。聯(lián)合檢測(cè)中只要有一種抗體陽(yáng)性即判定為抗ENA抗體陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本次研究應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用方差分析和t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組ANA與抗ENA抗體譜陽(yáng)性率比較

A組和B組ANA與抗ENA抗體譜聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率均高于C組（P＜0.05），且抗ENA抗體譜中dsDNA、His、Sm、nRNP/Sm、Rib和Nuc在A組的陽(yáng)性率高于B組（P＜0.05），見表2。

2.2 三組ANA滴度檢測(cè)結(jié)果比較

在ANA滴度為1/1 000、1/320、1/100時(shí)，A組和B組的陽(yáng)性檢出率均高于C組（P＜0.05），見表3。

2.3 各指標(biāo)檢測(cè)靈敏度、特異度比較

聯(lián)合檢測(cè)靈敏度為92.00%，特異度為89.74%，見表4。

表2 三組ANA與抗ENA抗體譜陽(yáng)性率比較 例（%）

表3 三組ANA滴度檢測(cè)結(jié)果比較 例（%）

表4 各指標(biāo)檢測(cè)靈敏度和特異度比較 %

3 討論

ANA是抗核酸抗原抗體的簡(jiǎn)稱，又被稱為抗核抗體，屬于體內(nèi)一種自身抗體。ANA主要見于體內(nèi)免疫球蛋白（IgM、IgMG、IgMD等）中，它能夠識(shí)別組織中細(xì)胞核成分，常見于自身免疫性疾病患者血清中［7］。有研究指出，ANA可作為風(fēng)濕性疾病病情進(jìn)展和預(yù)后的觀察指標(biāo)，可根據(jù)其滴度水平對(duì)自身免疫性疾病做初步篩選［8］?？笶NA抗體是抗?jié){核糖核蛋白和核糖核蛋白的自身抗體，是由抗U1-RNP抗體、抗Sm抗體、抗r-RNP抗體及其他抗體組成的抗體譜，其與病情進(jìn)展和活動(dòng)性無(wú)明顯關(guān)系，但對(duì)診斷結(jié)締組織性疾病具有較大意義［9］。

本研究發(fā)現(xiàn)，A組和B組的ANA與抗ENA抗體檢測(cè)陽(yáng)性率均高于C組，提示患有自身免疫性疾病患者體內(nèi)ANA與抗ENA抗體異常率較健康人群高，ANA與抗ENA抗體能有效分辨自身免疫性疾病和健康人群，具有較高的敏感度［10］。本次研究還發(fā)現(xiàn)，ANA滴度為1/320時(shí)，A組和B組檢測(cè)陽(yáng)性率均較高，提示ANA滴度為1/320時(shí)指標(biāo)檢測(cè)最為敏感，相較于其他滴度具有更高的檢出率。本研究結(jié)果顯示，在ENA抗體譜中，dsDNA、His、Sm、nRNP/Sm、Rib和Nuc在A組和B組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示ENA抗體譜能特異性分辨系統(tǒng)性紅斑狼瘡性自身免疫病和其他類型的自身免疫性疾病，具有較高的特異度。綜合比較3組ANA與抗ENA抗體的靈敏度和特異度，可以發(fā)現(xiàn)ANA抗體特異度較低，僅可作為系統(tǒng)性紅斑狼瘡的初篩指標(biāo)，抗ENA抗體特異度較高，可在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者初篩完成后作為確診參考指標(biāo)［11］。A組中也存在抗ENA抗體陰性情況，提示抗ENA抗體陰性不能確診為健康人群，原因可能與血液中存在一定的DNA抗原有關(guān)，也可能與早期患者或病情程度較輕患者具有將抗體降至正常水平的能力有關(guān)［12］。

綜上所述，自身抗體聯(lián)合檢測(cè)能提高系統(tǒng)性紅斑狼瘡的確診率，有助于系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的早期診斷和病情監(jiān)測(cè)。