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        動(dòng)物藥材鑒別與質(zhì)量評(píng)價(jià)方法之進(jìn)展與策略

        2020-03-03 18:46:29王紅麗
        光明中醫(yī) 2020年3期
        關(guān)鍵詞:方法質(zhì)量

        王紅麗

        動(dòng)物藥材是指源于動(dòng)物機(jī)體、動(dòng)物器官或者動(dòng)物以常規(guī)生理活動(dòng)產(chǎn)出的藥材,自古以來(lái),此類藥材就是中藥材中的重要構(gòu)成部分,如牡蠣、水蛭、甲魚等。在《黃帝內(nèi)經(jīng)》《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載的動(dòng)物藥材更是逾百種,約占中藥材總數(shù)的20%。由此可見(jiàn),動(dòng)物藥材的應(yīng)用有著較長(zhǎng)一段時(shí)間的歷史,并且動(dòng)物藥材的應(yīng)有有著較為豐富的經(jīng)驗(yàn)。伴隨著動(dòng)物藥材應(yīng)用、研究的不斷深入,時(shí)至今日,臨床上經(jīng)常使用的動(dòng)物藥材多達(dá)300余種,有藥理、用藥方法記錄的動(dòng)物藥材更是近2000種。如此龐大的基數(shù),動(dòng)物藥材的用法、藥理、質(zhì)量鑒別等內(nèi)容自然受到了人們的廣泛關(guān)注。動(dòng)物藥材中含有多種大分子物質(zhì),其質(zhì)量鑒定、藥理分析和一般的植物藥材有著諸多不同之處,其鑒別方法復(fù)雜,鑒別難度相對(duì)較大。尤其是近幾年,動(dòng)物藥材成分含量鑒定、質(zhì)量評(píng)價(jià)鑒定等方面的可靠研究數(shù)據(jù)屈指可數(shù),從業(yè)者對(duì)于動(dòng)物藥材的質(zhì)量鑒定多停留在經(jīng)驗(yàn)判定等層面上,鑒定方法的科學(xué)性、規(guī)范性都有待進(jìn)一步提升。

        1 動(dòng)物藥材鑒別方法以及質(zhì)量評(píng)價(jià)方法

        1.1 動(dòng)物藥材的性狀鑒別性狀鑒別主要是指從其表面特征或者結(jié)構(gòu)特征來(lái)判斷其質(zhì)量或真假,性狀鑒別是目前鑒別動(dòng)物藥材最直接也是最基本的方法,該方法對(duì)于經(jīng)驗(yàn)的依賴性相對(duì)較高,但使用方便,所以在業(yè)界得到了廣泛應(yīng)用。然而性狀鑒別法本身存在著諸多缺點(diǎn),而且性狀鑒別的結(jié)果存在一定的主觀性,鑒別方法不夠規(guī)范,且只能夠鑒別性狀完整的動(dòng)物藥材,難以有針對(duì)性的區(qū)分同屬性動(dòng)物藥材,尤其是膠類、甲殼類或者非法炮制的動(dòng)物藥材[1-4]。

        1.2 動(dòng)物藥材的顯微鑒別所謂顯微鑒別法就是指利用顯微技術(shù),通過(guò)微觀層面的分析來(lái)鑒別動(dòng)物藥材的品質(zhì)、真假,目前常用的顯微鑒別方法主要為粉末鑒別方法和組織鑒別方法。因動(dòng)物藥材本身的組織構(gòu)成相對(duì)復(fù)雜,并且傳統(tǒng)顯微技術(shù)也存在一定的局限性,所以在業(yè)界,“掃描電鏡”得到了廣泛應(yīng)用。顯微鏡技術(shù)的發(fā)展有利于提高動(dòng)物藥材的鑒別水準(zhǔn),比如對(duì)蜈蚣爪刺、頭殼進(jìn)行鑒別,就需要應(yīng)用電子目鏡才能夠起到良好效果。國(guó)內(nèi)學(xué)者在這方面有著諸多研究,計(jì)算機(jī)圖像處理技術(shù)、顯微攝影技術(shù)也得到了有效應(yīng)用,為動(dòng)物藥材的研究提供了可靠的參考依據(jù)。雖然傳統(tǒng)顯微鏡存在諸多局限性,但是由傳統(tǒng)顯微鏡得出的成果,在動(dòng)物藥材鑒別方面仍舊有著較高的應(yīng)用價(jià)值[5]。

        1.3 動(dòng)物藥材的理化鑒別因動(dòng)物藥材本身的成分復(fù)雜、組織構(gòu)成復(fù)雜,所以理化鑒別通常只能夠作為一種輔助參考方法。舉個(gè)例子,動(dòng)物藥材“熊膽”的鑒別,以“研磨粉末”的方式,將熊膽粉末在紫外燈(365nm)下觀察黃白色熒光,一般偽造品則不能夠發(fā)出黃白色熒光,呈現(xiàn)棕黃色熒光,但是該方法并不能作為可靠且權(quán)威的鑒定結(jié)果,具體還需要結(jié)合其他方法進(jìn)行完善。國(guó)內(nèi)學(xué)者成功以“茚三酮顯色法”測(cè)定了多種動(dòng)物藥材,并且在實(shí)踐中可直接對(duì)水蛭、鹿茸等成分復(fù)雜的藥材進(jìn)行有效鑒別,結(jié)果可靠,但理化鑒別方法的要求相對(duì)較高[6,7]。

        1.4 動(dòng)物藥材的光譜鑒別光譜鑒別又可詳細(xì)分為紫外光譜鑒別、原子光譜鑒別、紅外光譜鑒別、核磁共振光譜鑒別等方法,光譜鑒別在實(shí)踐中呈現(xiàn)出取樣量少、效率高等等優(yōu)勢(shì),并且可有效檢定出一種或者多種分子的含量,在動(dòng)物藥材的真假鑒別備以及質(zhì)量檢定中的應(yīng)用尤為廣泛[9-11]。目前,已經(jīng)實(shí)現(xiàn)應(yīng)用連續(xù)光源原子吸收光來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜動(dòng)物藥材微量元素含量的測(cè)定,同時(shí)通過(guò)不同紅外光譜鑒別方法、紫外光譜鑒別方法,可實(shí)現(xiàn)對(duì)不同蟾蜍藥材的鑒別。并且,紅外光譜和其他鑒別技術(shù)的聯(lián)用,也可實(shí)現(xiàn)對(duì)冬蟲(chóng)夏草等珍貴藥材的鑒定。

        1.5 動(dòng)物藥材的生物鑒別

        1.5.1 電泳鑒別方法電泳鑒別方法可揭示在同一電場(chǎng)條件下,動(dòng)物藥材中各種不同成分的相對(duì)質(zhì)量。如今,電泳鑒別方法已經(jīng)在SDS-PAGE、HPCE等方面得到了延伸,實(shí)現(xiàn)了對(duì)水蛭、地龍、全蝎等動(dòng)物藥材的有效鑒別,并且可對(duì)其質(zhì)量的判斷、真假的判斷提供詳實(shí)的參考依據(jù)。如采用SDS-PAGE鑒別方法,可直接揭示出不同鹿茸的藥理差異以及質(zhì)量差異,還可揭示出人工牛黃、金錢白花蛇、定蝮蛇的蛋白含量,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)其真?zhèn)蔚呐卸?;HPCE鑒別方法能夠結(jié)合動(dòng)物藥材藥效試驗(yàn),檢定土鱉蟲(chóng)的藥效以及藥理,并確定其中固定含有的化合物成分[11-13]。值得注意的是,HPCE通過(guò)分析藥理來(lái)揭示質(zhì)量的方法,開(kāi)創(chuàng)了動(dòng)物藥材鑒別的先河,為動(dòng)物藥材的進(jìn)一步鑒別備提供了可靠的參考依據(jù)以及新的發(fā)展思路。

        1.5.2 生物免疫印記鑒別生物免疫印記鑒別是一種以動(dòng)物藥材中的特異蛋白質(zhì)作為抗原的一種鑒別技術(shù),它通過(guò)制備被檢動(dòng)物藥材的抗原特異性抗體,實(shí)現(xiàn)對(duì)動(dòng)物藥材真?zhèn)蔚呐卸?。生物免疫印記鑒別的應(yīng)用目前仍舊處于起步階段,僅能夠用作于對(duì)幾種豹骨的鑒別。

        1.6 動(dòng)物藥材的條碼鑒別條碼鑒別主要指DNA條碼鑒別技術(shù),隨著生物信息技術(shù)的發(fā)展,目前該項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)日趨成熟,并為動(dòng)物藥材鑒別技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展提供一定參考依據(jù)。在2010版、2015版《中華人民共和國(guó)藥典》中,就收錄了DNA條碼鑒別方法。我國(guó)學(xué)者通過(guò)應(yīng)用DNA條碼鑒別,實(shí)現(xiàn)了對(duì)多種鹿茸樣本的區(qū)分以及測(cè)定,目前DNA條碼鑒別技術(shù)已經(jīng)廣泛用于鱉甲、穿山甲、紫河車、金錢白花蛇等動(dòng)物藥材的鑒別研究。

        1.7 鑒別技術(shù)聯(lián)用鑒于動(dòng)物藥材本身的復(fù)雜性,業(yè)界通過(guò)多種鑒別技術(shù)聯(lián)用的方式也取得了一定的進(jìn)展,這些方法在2015版《中華人民共和國(guó)藥典》中有著較為詳細(xì)的記錄,如HPLC-MS、SC-MS技術(shù)的聯(lián)用,可實(shí)現(xiàn)對(duì)多種來(lái)源的蜂蠟進(jìn)行有效分析,并可構(gòu)建出簡(jiǎn)單、直觀的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。又如SRM、HPLC方法的聯(lián)用,可實(shí)現(xiàn)對(duì)林蛙油、金錢白花蛇、僵蠶、鱉甲等動(dòng)物藥材中的特質(zhì)含有元素進(jìn)行測(cè)定,并為相關(guān)動(dòng)物藥材的鑒別提供可靠參考標(biāo)準(zhǔn)。

        2 動(dòng)物藥材鑒別面對(duì)的問(wèn)題以及對(duì)策

        2.1 動(dòng)物藥材鑒別現(xiàn)存問(wèn)題首先,動(dòng)物藥材本身的主要成分多為多糖或者蛋白質(zhì),其中含有的特異物質(zhì)分離難度、純化難度較大,國(guó)內(nèi)這方面的研究薄弱,直接導(dǎo)致動(dòng)物藥材的成分和其藥理無(wú)法直接對(duì)應(yīng);其次,針對(duì)各種動(dòng)物藥材,目前缺少對(duì)各種成分的專屬測(cè)定方法,無(wú)法實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量、高效率的測(cè)定,同時(shí)也導(dǎo)致動(dòng)物藥材鑒別無(wú)法構(gòu)建一個(gè)通用且實(shí)用的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。

        2.2 動(dòng)物藥材鑒別發(fā)展對(duì)策鑒于動(dòng)物藥材本身的特質(zhì),未來(lái)需要構(gòu)建起一種以“單一成分”為主要指標(biāo),同時(shí)指向多種成分的測(cè)定方法,并以此為基礎(chǔ)來(lái)構(gòu)建動(dòng)物藥材鑒別標(biāo)準(zhǔn)體系。多數(shù)主治功能明確以及藥理明確的動(dòng)物藥材,其主要成分多為核苷、蛋白質(zhì)、多糖、多肽,此類成分在對(duì)各種疾病的治療中,呈現(xiàn)出多元化的藥效以及特殊功能。如蟾蜍糖蛋白能夠應(yīng)對(duì)腎臟疾病、心臟疾??;蛇毒蛋白酶可應(yīng)對(duì)多種血栓類疾?。或笊呔彼狨ッ改軌驊?yīng)對(duì)多種血管疾病。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,為動(dòng)物藥材的鑒別提供了可靠的技術(shù)支持以及研究支持,動(dòng)物藥材鑒別技術(shù)的發(fā)展需要考慮到多種指標(biāo)、多種技術(shù)、多種層次的內(nèi)容,制定出可行性、實(shí)用性、科學(xué)性較高的技術(shù),并通過(guò)多種技術(shù)的聯(lián)用來(lái)應(yīng)對(duì)各種技術(shù)方法存在的不足之處。另外,亟需構(gòu)建起標(biāo)準(zhǔn)化評(píng)價(jià)體系,摒棄傳統(tǒng)依靠經(jīng)驗(yàn)的判斷方法,找到不同特異性特征的關(guān)聯(lián)性,以動(dòng)物藥材的藥理來(lái)指導(dǎo)鑒別工作[14,15]。

        3 結(jié)語(yǔ)

        綜上所述,動(dòng)物藥材是我國(guó)醫(yī)療事業(yè)中的重要構(gòu)成部分,在臨床醫(yī)學(xué)、醫(yī)療研究等方面有著卓著的應(yīng)用價(jià)值,且在實(shí)踐中也體現(xiàn)出活性強(qiáng)、療效強(qiáng)、應(yīng)對(duì)范圍廣等優(yōu)勢(shì),如今已經(jīng)得到了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注以及廣泛重視。所以,需要進(jìn)一步確保動(dòng)物藥材的科學(xué)性、安全性,合理區(qū)分不同藥材的藥理、質(zhì)量,以技術(shù)來(lái)打擊市面上的違法炮制動(dòng)物藥材,改善如今中藥研究落后的局面。質(zhì)量評(píng)價(jià)體系、鑒別技術(shù)規(guī)范的構(gòu)建對(duì)于動(dòng)物藥材鑒別發(fā)展有著至關(guān)重要的意義,廣大從業(yè)者在探尋不同技術(shù)方法的同時(shí),還要分析以動(dòng)物藥材中活性成分或者特異成分的專屬性檢驗(yàn)方法,以不斷推動(dòng)動(dòng)物藥材鑒別技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化、現(xiàn)代化發(fā)展,為動(dòng)物藥材市場(chǎng)的產(chǎn)業(yè)化轉(zhuǎn)型奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。相信在技術(shù)不斷發(fā)展的背景下,動(dòng)物藥材鑒別領(lǐng)域能夠得到有效延伸,且該領(lǐng)域也必然會(huì)得到更多的關(guān)注以及支持。

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