邵娜娜，楊勇莉*

（1.青海大學(xué)研究生院，青海 西寧 810000；2.青海大學(xué)附屬醫(yī)院，青海 西寧 810000）

子宮頸癌是威脅女性健康最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，且呈年輕化趨勢(shì)，該病主要由高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV)持續(xù)感染所致。本綜述在以往研究的基礎(chǔ)上，全面分析了常規(guī)檢查技術(shù)及細(xì)胞免疫化學(xué)染色技術(shù)在宮頸病變中的應(yīng)用，總結(jié)了常規(guī)檢查的優(yōu)勢(shì)和局限性，并重點(diǎn)討論腫瘤生物標(biāo)記物p16/ki67雙染在宮頸病變中的作用機(jī)制及表達(dá)意義，為臨床的個(gè)體化診治提供了清晰的診治思路。

1 p16、Ki67的功能

1.1 p16基因的功能：

p16是一種抑癌基因[1]，通過(guò)抑制細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶CDK4/CDK6，來(lái)阻止視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白pRb的磷酸化。生理上，非磷酸化的pRb結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子E2F，攔截細(xì)胞進(jìn)入S期，從而抑制細(xì)胞增殖。在此通路中, pRb負(fù)反饋抑制p16的表達(dá)。所以，p16的高表達(dá)，可被認(rèn)為是HPV感染和病毒致癌基因的激活以及病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞周期失調(diào)的標(biāo)志。

1.2 ki67基因的功能：

Ki67是細(xì)胞增殖核抗原[2]，除了G0階段，其在細(xì)胞周期G1，S，G2和M期表達(dá)，有絲分裂后，大量的表位被降解或丟失，因此Ki67只在有絲分裂和增殖階段表達(dá)。因免疫組織化學(xué)P16/ Ki67雙染是基于抗體、抗原特異性結(jié)合的原理，主觀因素相對(duì)較少，具有重復(fù)性，所以診斷結(jié)果更加客觀。當(dāng)出現(xiàn)雙染陽(yáng)性，則提示細(xì)胞周期紊亂或存在宮頸高級(jí)別病變。

2 p16/Ki67雙染在早期篩查中的應(yīng)用

2.1 p16/Ki67在TCT檢測(cè)中的應(yīng)用

在全球范圍內(nèi)，宮頸癌篩查基于宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）和HPV的共同檢測(cè)。細(xì)胞學(xué)是篩查宮頸病變的主要方式，然而，由于觀察人員醫(yī)療水平不同, 具有主觀性，存在一定的假陽(yáng)性率。

2.2 p16/Ki67在HPV檢測(cè)中的應(yīng)用

目前，HPV檢測(cè)已用于宮頸癌的常規(guī)篩查。然而，HPV感染與大多數(shù)病菌的感染不同，大多數(shù)HPV感染是短暫的，它們能自發(fā)消退而不發(fā)展宮頸癌。雖然HPV檢測(cè)的靈敏度高，但只能表明病毒在體內(nèi)，無(wú)法區(qū)分感染是一過(guò)性還是持續(xù)性，因此特異性上存在一定的限制。

2.3 p16/Ki67在陰道鏡檢查中的應(yīng)用：

通過(guò)陰道鏡放大的作用，可以直接觀察陰道和宮頸上皮結(jié)構(gòu)。因觀察者在解釋鏡下特點(diǎn)的可變性相對(duì)較高，有一定的主觀性，另外，不能直接看到宮頸管中的病變。當(dāng)出現(xiàn)高危型HPV感染、細(xì)胞學(xué)異常時(shí)，患者容易有過(guò)多的診治，從而增加了的陰道鏡檢查和侵入性的操作?；诂F(xiàn)有的研究[3]，p16/ Ki67共同表達(dá)，表明轉(zhuǎn)化細(xì)胞，提示存在子宮頸上皮的病變。

3 p16/Ki67雙染在宮頸病變中ASC-US、LSIL的應(yīng)用

3.1 根據(jù)最新研究

CIN2可用P16免疫組化進(jìn)行分流，若陽(yáng)性者按HSIL處理，陰性者按LSIL處理。然而，細(xì)胞學(xué)產(chǎn)生許多模棱兩可的結(jié)果，如ASCUS、LSIL，其組織病理學(xué)具有多樣性，可以是炎癥到浸潤(rùn)癌各個(gè)階段的病變，且重復(fù)性較差, 是臨床診治的難題。

3.2 對(duì)于ASCUS和LSIL的患者

臨床上推薦行HR-HPV檢測(cè)對(duì)其分流, 若為陽(yáng)性則行陰道鏡, 若為陰性則加強(qiáng)隨訪。p16/Ki67陽(yáng)性表達(dá)水平隨宮頸級(jí)別病變的加重而升高，可以提升HSIL+檢測(cè)的特異性，又具有和HPV檢測(cè)相似的敏感性，可成為分流ASCUS、LSHL的有效檢測(cè)手段。

隨著我們對(duì)HPV引起的生物分子變化，免疫細(xì)胞化學(xué)p16/Ki67雙染在早期宮頸癌篩查中表現(xiàn)出巨大的潛力。當(dāng)然，為了更好的評(píng)估這些生物標(biāo)志物的應(yīng)用，還應(yīng)考慮其他相關(guān)因素，比如年齡、病毒載量、病毒基因分型、免疫微環(huán)境等對(duì)病變發(fā)展的影響，還需要大數(shù)據(jù)進(jìn)行全面的分析。