范軍軍

（中國(guó)科學(xué)院腫瘤與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所<中國(guó)科學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院>浙江省腫瘤醫(yī)院 浙江 杭州 310022）

腫瘤在臨床中屬于一類(lèi)較常見(jiàn)的疾病，具有較高的病發(fā)率。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，生活節(jié)奏在不斷加快，腫瘤疾病的病發(fā)率也在持續(xù)上升。就腫瘤疾病的初期癥狀來(lái)看并不十分顯著，往往有臨床癥狀則易被確診為中期或晚期，失去了治療的最佳時(shí)機(jī)。如今，臨床對(duì)于腫瘤疾病還欠缺理想的診斷方法，常規(guī)診斷法主要為磁共振成像、CT 診斷法為主，這些方法盡管具有確診的效果，但所呈現(xiàn)出的漏診率或誤診率也是相當(dāng)高的。近些年以來(lái)，腫瘤診斷加入了病理診斷技術(shù)，其效果顯著，然而，不同的病理診斷技術(shù)所產(chǎn)生的效果也是不同的。常規(guī)技術(shù)具體為活檢穿刺診斷，此類(lèi)診斷法能夠有效對(duì)病灶分期與類(lèi)型加以確定，但為病患帶來(lái)的痛苦也是不可忽略的。就當(dāng)前來(lái)看，免疫組化技術(shù)被臨床診斷所使用，它主要融合了自動(dòng)免疫染色系統(tǒng)、抗原修復(fù)技術(shù)、敏感檢測(cè)系統(tǒng)等不同系統(tǒng)。為比較常規(guī)診斷技術(shù)與免疫組化技術(shù)的臨床價(jià)值，現(xiàn)對(duì)近一年收治的50 例入院診斷的腫瘤病患進(jìn)行分析，具體如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

本次抽取我院2018 年3 月－2019 年3 月收治行病理診斷的50 例腫瘤病患，按不同診斷技術(shù)分成研究組與對(duì)照組，研究組男性病患有15 例，女性病患有10 例，年齡為43 ～75 歲，平均年齡（54.29±5.16）歲；對(duì)照組男性病患有14 例，女性病患有11 例，年齡為42 ～76 歲，平均年齡（54.71±5.47）歲。對(duì)研究組與對(duì)照組病患的一般資料進(jìn)行對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞0.05，可對(duì)比。

1.2 方法

對(duì)照組病患僅運(yùn)用活檢穿刺法進(jìn)行診斷處理，針對(duì)病患的病灶位置與類(lèi)型實(shí)施穿刺活檢，以超聲為基礎(chǔ)進(jìn)行，將組織取出后對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)組織。

研究組病患則運(yùn)用免疫組化技術(shù)進(jìn)行診斷，運(yùn)用的試劑包含透明液、甲醛固定液、浸蠟液、脫水液、樹(shù)膠、蒸餾水、ULTRASEN SITIVETM SP 試劑。首先，取出一塊組織，將其于甲醛溶液浸泡兩小時(shí)，再運(yùn)用透明液處理一小時(shí)，之后使用脫水液脫水1 小時(shí)以及浸蠟液浸泡一小時(shí)，將組織埋于石蠟中，常規(guī)切片處理，厚度為2μm，完成切片動(dòng)作后采用免疫組化染色法進(jìn)行診斷，使用過(guò)氧化氫溶液（3%）于37 攝氏度狀態(tài)下孵育10 分鐘，再用蒸餾水沖洗三分鐘，通過(guò)高壓鍋修復(fù)2 分鐘，注意高壓鍋的溫度為110 攝氏度左右，運(yùn)用PBS 進(jìn)行洗滌處理（5分鐘），于常溫狀態(tài)下孵育2 個(gè)小時(shí)，再運(yùn)用PBS 洗滌，加入U(xiǎn)LTRASEN SITIVETM SP 試劑，孵育后DBA 則開(kāi)始顯色，最終采用樹(shù)膠來(lái)封固。

1.3 評(píng)定方法

判斷檢測(cè)結(jié)果，其中包含glyPican-3（磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3）以及AFP（甲胎蛋白）等，組織免疫化技術(shù)染色后若顯示為棕黃色表明陽(yáng)性。運(yùn)用我院自制的問(wèn)卷調(diào)查表來(lái)評(píng)定病患診斷后的具體指標(biāo)，具體為信任感、心理顧慮以及生理問(wèn)題，得分?jǐn)?shù)越高表明檢查方法對(duì)病患所產(chǎn)生的影響越低，檢查依從性也更高。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 對(duì)比兩組病患的陽(yáng)性率以及滿意度

研究組病患實(shí)施免疫組化染色后，病患細(xì)胞結(jié)構(gòu)屬于變異型，磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3 與甲胎蛋白表達(dá)異常的病患共有20 例，為此，研究組陽(yáng)性率為80.00%，而對(duì)照組陽(yáng)性率為52.00%，研究組診斷滿意度為76.0%，顯著高于對(duì)照組的56.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05，見(jiàn)表1。

表1 研究組與對(duì)照組的陽(yáng)性率以及診斷滿意度 [n（%）]

2.2 對(duì)比兩組病患診斷后的評(píng)分情況

研究組病患的信任感評(píng)分、心理顧慮評(píng)分以及生理問(wèn)題評(píng)分均比對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 比較病患診斷后的評(píng)分情況（±s，分）

表2 比較病患診斷后的評(píng)分情況（±s，分）

組別 例數(shù) 信任感 心理顧慮 生理問(wèn)題研究組 25 90.23±9.66 86.32±3.18 87.29±8.01對(duì)照組 25 71.26±4.73 69.87±2.34 69.00±3.25 t 23.21 24.38 25.13 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

3.討論

近些年以來(lái)，免疫組化技術(shù)在臨床腫瘤疾病的診斷中得到了廣泛的運(yùn)用，同時(shí)也取得了良好的效果，本文對(duì)照組病患采用常規(guī)技術(shù)（活檢穿刺法）進(jìn)行診斷，而研究組病患實(shí)施免疫組化技術(shù)進(jìn)行診斷，對(duì)比兩組病患診斷后的評(píng)分情況，研究組病患的信任感評(píng)分、心理顧慮評(píng)分以及生理問(wèn)題評(píng)分均比對(duì)照組高，其中，研究組信任感評(píng)分為（90.23±9.66）分，對(duì)照組為（71.26±4.73）分，差異顯著有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05。對(duì)比常規(guī)技術(shù)，免疫組化技術(shù)的優(yōu)勢(shì)是相當(dāng)顯著的，此方法在對(duì)于腫瘤疾病的診斷中主要是通過(guò)觀察組織切片抗原數(shù)量級(jí)以及于組織中的分布情況來(lái)進(jìn)行的，對(duì)抗原展開(kāi)定量、定位與定性的研究，因抗體與抗原特異性結(jié)合，為此，臨床可以通過(guò)免疫組化對(duì)抗體加以標(biāo)記處理，以其顯色情況判斷組織細(xì)胞中的抗原。

臨床為了將診斷正確率提升上來(lái)，控制假陽(yáng)性率問(wèn)題的產(chǎn)生，在運(yùn)用免疫組化技術(shù)時(shí)需要依照下方步驟進(jìn)行，首先，要完成組織固定，組織固定可以運(yùn)用中性緩沖甲醛固定液（10%），此類(lèi)固定液與其它固定液相對(duì)比，其固定效果更佳，持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)，同時(shí)組織在三個(gè)月內(nèi)的陽(yáng)性率也十分穩(wěn)定。其次，在對(duì)組織加熱處理要注意將其放置于最佳溫度上（恒溫箱設(shè)置為60～68 攝氏度之間），注意溫度不可過(guò)高。其三，組織在實(shí)施抗原修復(fù)時(shí)要將修復(fù)時(shí)間控制在8 分鐘以內(nèi)，在其斷開(kāi)后保證切片的自然冷卻，再進(jìn)行染色處理。其四，免疫組化技術(shù)在對(duì)組織進(jìn)行染色時(shí)需要對(duì)蘇木精進(jìn)行反復(fù)染色，注意染色顏色不可過(guò)深，這樣會(huì)對(duì)診斷結(jié)果造成影響。與此同時(shí)，免疫組化技術(shù)顯色本身為化學(xué)反應(yīng)，即酶促反應(yīng)，此反應(yīng)可以與抗原-抗體復(fù)合物中的堿性磷酸酶、過(guò)氧化物酶等產(chǎn)生反應(yīng)，以此來(lái)形成有顏色的復(fù)合物，且于細(xì)胞與組織抗原時(shí)間加以沉淀。然而，因腫瘤類(lèi)型較多，不同的組織標(biāo)本來(lái)源也有一定差異性，其抗原的含量均有也不同，顯色反應(yīng)時(shí)間問(wèn)題上也存在一定的差異?；诖?，免疫組化技術(shù)在實(shí)施染色時(shí)要注意切片必須保持濕潤(rùn)狀態(tài)，孵育時(shí)還要控制好孵育盒中的蒸餾水量問(wèn)題，保證盒子的平整度，確?？贵w液體處于均勻狀態(tài)下，減少假陰性的產(chǎn)生。