李登紅，陸建偉，王洪濤，莊子檳

1 巴迪泰（廣西）生物科技有限公司 （廣西南寧 530031）；2 廣西中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院檢驗科 （廣西南寧 530022）

降鈣素原（procalcitonin，PCT）是無激素活性的降鈣素 前肽物質(zhì)，為分子量為13 kD的糖蛋白。健康人血漿中PCT含量極低[1]，其在人體內(nèi)的半衰期為25～30 h，穩(wěn)定性好[2]。PCT水平在有系統(tǒng)性癥狀的細菌感染后會快速升高，其他情況，如重大手術、嚴重燒傷和新生兒也會升高，但是其會很快回復到基線水平；而病毒性感染、細菌定植、局灶感染、變態(tài)反應性疾病、自身免疫疾病和移植排斥反應通常不會誘導PCT水平大幅度升高（數(shù)值＜0.5 ng/ml）。因此，通過評估PCT水平，臨床醫(yī)師能夠進行是否會發(fā)展為重度膿毒癥和膿毒性休克的危險性評估。

目前，測定PCT的方法主要有凝膠層析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗法、放射免疫法、金標法、免疫熒光法、免疫化學發(fā)光法等[3]。羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法）已進入中國市場多年，因其產(chǎn)品質(zhì)量可靠、穩(wěn)定，深受廣大醫(yī)院用戶的信賴。超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）是巴迪泰公司研發(fā)的POCT試劑盒，采用時間分辨免疫熒光與干化學層析技術，結合抗體、抗原的特異度反應，檢測下限能夠達到0.01 ng/ml，通過配套的熒光免疫分析儀，將結果定量顯示出來。為了評估超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）的性能，以羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法）為對照，對超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）開展準確度、精密度、相關性、一致性方面的評價，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

110例樣本均來源于2019年3—4月廣西中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院門診、急診以及住院的患者，其中男60例，女50例；年齡1～85歲；包含一定數(shù)量的健康人群和輕、重度炎癥患者，剔除嚴重溶血、黃疸以及體積小的樣本。

1.2 儀器與試劑

參照組試劑及儀器：羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法）及配套校準品、質(zhì)控品（Roche diagnostics GmbH），羅氏 cobas e411分析儀（Roche diagnostics GmbH）。

試驗組試劑及儀器：超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）及配套校準品、質(zhì)控品[巴迪泰（廣西）生物科技有限公司]，全自動干式熒光免疫分析儀（A5000）[巴迪泰（廣西）生物科技有限公司]。

參照試劑和試驗試劑的陽性標準均為PCT≥0.5 ng/ml。

1.3 方法

1.3.1 精密度評估

參考EP15-A2文件，兩種試劑均檢測兩個水平的血清樣品配制的血清質(zhì)控品，另外使用兩種試劑分別測試兩種試劑配套的質(zhì)控品，測定3次/d，間隔2 h，連續(xù)測定5 d，計算批內(nèi)和總變異系數(shù)（CV）；根據(jù)原衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評標準，檢測系統(tǒng)不精密度CV＜1/3Tea（10%）。

1.3.2 準確度評估

使用羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法）和超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）同時檢測25例濃度覆蓋檢測范圍的臨床樣本，采用t檢驗統(tǒng)計檢驗結果，計算超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）測定值與羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法）測定值的偏倚，繪制偏移圖，將測量的偏倚與廠家聲明進行比較。

1.3.3 相關性評估

使用羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法）和超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）同時檢測110例濃度覆蓋檢測范圍的臨床樣本，采用線性回歸進行結果分析，以y=a+bx和r的形式給出回歸分析的擬合方程。

1.3.4 一致性評估

Bland-Altman可很好地評價定量數(shù)據(jù)的檢測結果一致性，同時會提供系統(tǒng)誤差與隨機誤差。試驗試劑與參照試劑的每個樣本測定值之差與相應兩試劑的測試均值作散點圖并采用四格表法分析兩種方法的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值和約登指數(shù)。

1.4 統(tǒng)計學處理

基于 OriginPro8 SR4（v8.0951(B951)）和 MedCalc（Version 18.2.1）軟件進行統(tǒng)計分析和作圖，精密度評估用CV表示，準確度評估采用t檢驗，相關性評估采用線性回歸分析，一致性評估應用Bland-Altman和四格表法。

2 結果

2.1 精密度評估結果

兩種方法檢測PCT的精密度見表1，其中兩種檢測方法均小于原衛(wèi)生部臨檢中心要求的1/3Tea（10%）。

表1 試驗試劑與參照試劑檢測結果

2.2 準確度評估結果

通過t檢驗，在置信限P=0.05情況下，t臨界值為2.06，超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）檢測結果均值為6.76 ng/ml，羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法）檢測結果均值為6.35 ng/ml，兩種檢測方法的百分偏倚為6.42%，＜10%，與廠商的聲明相符。

2.3 相關性分析結果

兩種檢測方法的檢測結果回歸方程為：y=0.9777x+0.3365，r=0.987＞0.975，表明在檢測范圍內(nèi)兩種檢測方法的相關性良好，擬合曲線方程見圖1。

2.4 一致性判斷

使用Bland-Altman散點圖進行分析，在檢測范圍內(nèi)，兩種方法的差值偏倚呈現(xiàn)均勻分布，由圖2可以看出共有3個點超出±1.96SD范圍，比例為2.73%，表明兩種方法具有良好的一致性。

采用四格表法計算兩種方法的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值、約登指數(shù)分別為96.36%、94.55%、94.64%、96.30%、0.91，見表2。

圖1 兩種方法檢測結果的線性相關

圖2 兩種檢測方法的Bland-Altman散點

表2 試驗試劑與參照試劑比較（例）

3 討論

新生兒肺炎為新生兒的常見疾病和多發(fā)病癥，主要由細菌、病毒、衣原體及支原體等引起，以細菌較為常見，是引起新生兒死亡的一個重要原因，據(jù)研究報道，新生兒感染性肺炎的病死率為5%～20%[4]。考慮新生兒感染初期臨床表現(xiàn)較隱蔽，少數(shù)表現(xiàn)有咳嗽、咳痰、體溫升高等現(xiàn)象，所以容易被家屬忽視，據(jù)調(diào)查，全世界每年有200萬例以上新生兒死于肺炎，其中在中國西部農(nóng)村新生兒病死率調(diào)查研究中，34.5%的新生兒死于肺炎[5]。因此，新生兒肺炎需盡早確診并及時治療，以確保新生兒生命安全。對于此類患兒展開治療時，針對不同的發(fā)病原因，需采用不同的方式，早期診斷中對感染病原菌進行明確極為關鍵。作為一個敏感指標，PCT與新生兒肺炎病情嚴重程度及病原菌感染類型有一定關系，可用于膿毒血癥的早期診斷中[6-8]。

目前行業(yè)內(nèi)對PCT進行檢測采用電化學發(fā)光法口碑較好，其中羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法），其準確度、精密度、靈敏度、特異度等各項性能都得到廣泛認可[9-10]。超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）使用時間分辨熒光免疫法，以免疫熒光分析儀為檢測平臺，檢測下限達到0.01 ng/ml。本研究選擇羅氏診斷公司生產(chǎn)的羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法）與超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）兩種檢測方法進行系統(tǒng)性的比對分析，以羅氏電化學發(fā)光法作為參考方法，時間分辨免疫熒光法為試驗方法，對兩者的偏倚程度、相關性和一致性進行分析。

本研究結果顯示，超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）擁有良好的精密度，檢測結果的變異系數(shù)＜10%，能夠滿足臨床檢驗的要求；超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）與羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法）之間存在一定的系統(tǒng)性誤差，其偏倚為6.42%，符合廠家的聲明；兩種檢測方法擁有較好的相關性（r=0.987）。Bland-Altman法可得出有2.73%的檢測結果超出了95%的置信區(qū)間，靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值、約登指數(shù)分別為96.36%、94.55%、94.64%、96.30%、0.91，證明兩種方法一致性較好。

綜上所述，超敏PCT（PCT Plus）檢測試劑盒（免疫熒光干式定量法）具有良好的精密度，且與羅氏PCT檢測試劑盒（電化學發(fā)光法）的偏倚較小，兩種檢測方法相關性、一致性均良好，臨床上不同科室應考慮自身需求選擇合適的檢測方法。