■張新宇 張海華 鐘 偉 韓菲菲 蔡熙姮 李光玉*

（1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所特種經(jīng)濟(jì)動物分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉林長春130112；2.河北科技師范學(xué)院動物科技學(xué)院，河北秦皇島066004）

銅在機(jī)體中主要以輔酶的形式存在，參與動物毛皮生長、毛色形成、造血、繁殖和免疫等生命活動[1]。有報道表明，日糧中添加銅可以提高家畜生長性能[2]，但微量元素銅對烏蘇里貉生長性能影響的研究鮮有報道。目前市場上可用于飼料添加劑的銅源種類繁多，為貉生產(chǎn)中選擇適合銅源增添很大困難，因此研究并明確銅源和銅水平對育成期雄性烏蘇里貉生產(chǎn)性能的影響，對指導(dǎo)生產(chǎn)具有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加適宜的銅能夠提高動物的生產(chǎn)性能，但不同動物種類對不同銅源的吸收利用有一定的差異[3-6]。胡二永[7]研究表明，在仔豬日糧中添加60 mg/kg 甘氨酸銅與200 mg/kg CuSO4具有相似的促生長效果，但甘氨酸銅組豬糞中銅含量較低，更有利于環(huán)保。也有學(xué)者證實(shí)，在仔雞養(yǎng)殖中蛋氨酸銅的利用效率高于堿式氯化銅且高于硫酸銅[8]。毛皮動物銅源利用規(guī)律與傳統(tǒng)家畜相似，鐘偉等[9]研究發(fā)現(xiàn)，銀狐飼糧中添加檸檬酸銅的促生長效果高于甘氨酸螯合銅、蛋氨酸螯合銅和硫酸銅。吳學(xué)壯等[10]和劉志等[11]在水貂和藍(lán)狐的研究中表明，蛋氨酸銅的促生長效果更優(yōu)異于堿式氯化銅和硫酸銅。烏蘇里貉作為我國飼養(yǎng)的主要毛皮動物，關(guān)于銅方面研究較少，其對不同銅源的利用與其他動物相比是否存在差異仍不清楚。本試驗(yàn)擬選用硫酸銅、堿式氯化銅及蛋氨酸銅作為銅源，研究不同銅源對育成期烏蘇里貉生長性能和血清生化指標(biāo)的影響，為貉健康養(yǎng)殖生產(chǎn)實(shí)踐提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物及分組

選擇農(nóng)業(yè)部長白山野生生物資源重點(diǎn)野外科學(xué)觀測試驗(yàn)站飼養(yǎng)的烏蘇里貉，隨機(jī)選取(60±5)日齡、健康、體重相近雄性烏蘇里貉60 只，隨機(jī)分成4 組(Ⅰ～Ⅳ組)，每組15 只，每只單籠飼養(yǎng)，各組初始體重組間差異不顯著（P＞0.05）。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計與試驗(yàn)飼糧

采用單因素試驗(yàn)設(shè)計，分別添加硫酸銅40 mg/kg(Ⅰ組)、堿式氯化銅40 mg/kg(Ⅱ組)、混合銅40 mg/kg(Ⅲ組)和蛋氨酸銅40 mg/kg(Ⅳ組)，混合銅源是堿式氯化銅和蛋氨酸銅，銅含量比值為1∶1(以銅元素計)。

參考狐NRC(1982)[12]、張顯華等[13-14]以及生產(chǎn)實(shí)踐中飼料效果較好的育成期烏蘇里貉飼料配方配制基礎(chǔ)日糧，組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)開始前，按常規(guī)免疫程序?qū)游镞M(jìn)行免疫。預(yù)飼期7 d，正式試驗(yàn)期62 d，開始于2018年7月25日至2018年9月25日。每日定時定量飼喂，早07：00與15:30各飼喂1次，自由飲水，定時清潔打掃籠舍。

1.4 指標(biāo)測定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時，每組隨機(jī)選取8只健康烏蘇里貉，稱重后，后肢靜脈采血10 ml，置于促凝采血管中，3 500 r/min離心8 min，將分離出的血清分裝在1.5 ml編好號的Eppendorf 管中，-80 ℃保存，備用于血清生化指標(biāo)的檢測。血清中的血糖(GLU)、乳酸脫氫酶(LDH)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)的測定采用試劑盒，以上試劑盒采購于中生北控，按照試劑盒說明，使用VITALIB-E全自動生化分析儀測定。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

血清中總超氧化物酶（T-SOD）、銅鋅超氧化物歧化酶（Cu-Zn SOD）、銅藍(lán)蛋白（CP）活力的測定采用試劑盒，以上試劑盒采購于南京建成生物科技有限公司，按照試劑盒說明，使用紫外分光光度計測定酶活力。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，試驗(yàn)數(shù)據(jù)通過SAS 9.4 中單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，采用Duncan's 法進(jìn)行比較，其中P＜0.05 為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同銅源對育成期烏蘇里貉生長性能的影響

不同銅源對育成期烏蘇里貉不同階段體重和日增重的影響見表2、表3，銅源對第18、33、47、62 d 的體重的影響沒有顯著差異(P＞0.05)，但是Ⅲ組在第62 d獲得最大體重，銅源對不同階段日增重也沒有顯著影響(P＞0.05)，所有動物的日增重呈現(xiàn)先升高，再降低的趨勢，在34～47 d時日增重在育成期最高。

表2 銅源對育成期烏蘇里貉不同階段體重的影響(g)

表3 不同銅源對育成期烏蘇里貉不同階段平均日增重的影響(g/d)

2.2 不同銅源對育成期烏蘇里貉血清指標(biāo)的影響

由表4、表5 所示，Ⅲ組血清中GLU 含量有高于Ⅰ組的趨勢(P=0.08)，其余各組差異不顯著(P＞0.05)。Ⅲ、Ⅳ組血清中ALP 含量顯著高于Ⅰ組(P=0.05)。Ⅰ組血清中LDH 顯著高于Ⅳ組(P=0.04)，不同銅源對血清ALT 和AST 含量沒有顯著差異(P＞0.05)，銅源對血清中Cu-Zn SOD 與CP 含量影響不顯著(P＞0.05)，但是Ⅲ組血清中T-SOD 含量顯著高于Ⅳ組，Ⅳ組血清中T-SOD 含量極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P＜0.000 1)。

表4 不同銅源對育成期烏蘇里貉血清生化指標(biāo)的影響

表5 不同銅源對育成期烏蘇里貉血清抗氧化能力的影響

3 討論

3.1 不同銅源對育成期烏蘇里貉生長性能的影響

微量元素銅在機(jī)體代謝中具有重要作用，飼糧中添加適宜水平的銅有利于提高動物的生長性能和營養(yǎng)物質(zhì)消化率，并且不同銅源的促生長效果也不同[15-16]。國內(nèi)外學(xué)者[17-20]研究表明，在豬、雞等飼糧中添加不同形式銅，如堿式氯化銅、硫酸銅、檸檬酸銅或蛋氨酸銅發(fā)現(xiàn)，有機(jī)銅促進(jìn)生長效果更為明顯。本試驗(yàn)中，添加相同劑量不同形式的銅源對不同階段的烏蘇里貉生長性能差異不顯著，但與硫酸銅(硫酸銅為100%)組相比，堿式氯化銅銅、混合銅和蛋氨酸銅組的62 d 體重分別提高1.75%、3.83%、3.35%。國內(nèi)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，蛋氨酸銅、堿式氯化銅和硫酸銅對豬、雞和水貂等單胃動物的生長性能無顯著影響，但具有促生長趨勢，其中蛋氨酸銅的功能優(yōu)于堿式氯化銅，優(yōu)于硫酸銅[21-24]。無機(jī)銅進(jìn)入體內(nèi)后以銅離子的形式和氨基酸形成螯合鹽能被機(jī)體吸收，而有機(jī)銅通過細(xì)胞的胞飲作用進(jìn)入，降低了微量元素之間的拮抗作用，減少了體內(nèi)轉(zhuǎn)化途徑，提高能量的利用率和飼料利用率[25]。試驗(yàn)中混合銅組烏蘇里貉在第62 d 獲得最大體重，可能是與血清銅離子通過兩種方式被機(jī)體吸收有關(guān)，具體原因還有待進(jìn)一步研究。

3.2 不同銅源對育成期烏蘇里貉血清指標(biāo)的影響

血糖是身體細(xì)胞、組織和器官的重要能量來源，要維持生命體的活動，血糖必須維持一定水平。血清ALP 與骨的鈣化密切相關(guān)，在生理性骨骼發(fā)育階段，ALP 活力會顯著增高[26]。LDH 在血清中含量較少，主要儲存于內(nèi)臟中，當(dāng)內(nèi)臟壞死后，會釋放大量的乳酸脫氫酶，導(dǎo)致血清中乳酸脫氫酶含量上升[27]。血清AST 和ALT 濃度可以反映肝臟健康情況的重要指標(biāo)，當(dāng)肝細(xì)胞受損時，會釋放AST與ALT，導(dǎo)致血清中兩種轉(zhuǎn)氨酶的濃度升高[28]，TSOD 與CP 與機(jī)體的自由基消除有關(guān)。試驗(yàn)中血糖含量有變化的趨勢，硫酸銅會降低血糖濃度，可能會使機(jī)體消耗增加，減少能量儲存，從而體重增長緩慢。血清中ALP 含量差異顯著，在生長階段，骨骼未發(fā)育完全，ALP 含量越高，越利于體重的升高。硫酸銅組中的血清LDH 顯著升高，可能是有內(nèi)臟細(xì)胞的破裂有關(guān)，在相同的銅水平下，硫酸銅更容易危害動物健康。銅源對血清中CP 與Cu-Zn SOD 含量影響，但是對T-SOD 含量有影響，這可能與陰離子集團(tuán)相關(guān)，具體原因還需要進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

綜上所述，銅源對烏蘇里貉的生長發(fā)育、含銅酶活力沒有顯著影響，但是添加有機(jī)銅的組別可以提升機(jī)體生長潛力與消除自由基的能力，添加硫酸銅的組別更容易危害動物健康。市場中有機(jī)銅價格高于無機(jī)銅，因此在實(shí)踐生產(chǎn)中，為提高生長性能和降低飼養(yǎng)成本，建議有機(jī)銅與無機(jī)銅混合使用。