李松 張娟

HBV感染的患者病情進(jìn)展與肝纖維化、免疫應(yīng)答失衡息息相關(guān)。臨床上單純給予抗病毒藥物干預(yù)慢性 HBV 感染，治療效果并不理想，而有效治療干預(yù)的對(duì)象應(yīng)包括慢性 HBV 感染狀態(tài)下參與病情進(jìn)展的HBV DNA 高載量、肝纖維化進(jìn)展和免疫失衡等多種病理過程[1]?？共《镜暮塑账犷愃莆镩L時(shí)間用藥，HBV病毒易產(chǎn)生耐藥性而使藥物治療效果降低。替諾福韋酯作為一種新核苷酸類似物抗病毒藥物，對(duì)耐藥患者的治療有較好療效[2-4]。本研究將探討替諾福韋酯是否可改善HBV感染患者的肝纖維化、Th1/Th2型細(xì)胞因子參與的免疫功能，旨在為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

資料與方法

一、一般資料

選取2015年1月至2018年1月安康市中心醫(yī)院收治的150例乙型肝炎肝硬化患者臨床資料進(jìn)行前瞻性研究。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。②符合 乙型肝炎和肝硬化的西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他病毒性肝炎以及自身免疫性肝炎、酒精性肝炎、遺傳代謝性肝病、藥物性肝炎等; ②合并其他重大疾病的患者，如癌癥、急性腦卒中、重度心律失常等;③合并精神疾病、心理疾病患者。根據(jù)患者入院的先后順序，分為治療組與對(duì)照組，每組各75例。其中，治療組75例，男35例，女40例；年齡32～87歲，平均年齡(58.23±10.32)歲。對(duì)照組75例，男39例，女36例；年齡31～88歲，平均年齡(59.23±10.98)歲。兩組患者的性別、年齡等一般資料相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

二、研究方法

(一)治療方法

對(duì)照組給予普通護(hù)肝治療，具體如下：給予人血白蛋白、肝水解肽、還原型谷胱甘肽、普萘洛爾、安體舒通、呋塞米等常規(guī)對(duì)癥支持治療。治療組在普通護(hù)肝基礎(chǔ)上加用替諾福韋酯治療，口服替諾福韋酯(正大天晴醫(yī)藥公司生產(chǎn))300 mg/d。

(二)檢測方法

治療12周時(shí)采血：(1)檢測兩組患者HBV DNA水平，檢測試劑盒購自南京生物建成研究所，采用美國 ABI公司7 500 Real Time PCR System 儀器檢測。(2)檢測兩組患者肝功能指標(biāo)AST、ALT、總膽紅素(TBil)水平。所有試劑盒均購自南京生物建成研究所，采用ELISA法進(jìn)行測定。(3)采用放射免疫法檢測肝纖維化指標(biāo)，包括：Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)、層黏連蛋白(LN)、透明質(zhì)酸(HA)、Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)。所有試劑盒均購自南京生物建成研究所。(4)檢測Th1/Th2 細(xì)胞因子，包括：干擾素-γ(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)、白介素-4(IL-4)、白介素 -2(IL-2)。所有試劑盒均購自南京生物建成研究所，采用ELISA法 進(jìn)行測定。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用 SPSS 19.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用t檢驗(yàn)分析兩組間計(jì)量資料的比較。采用χ2檢驗(yàn)分析兩組間計(jì)數(shù)資料的比較。

結(jié) 果

一、兩組患者HBV DNA水平比較

治療前，兩組患者HBV DNA水平無明顯差別[(6.50±1.35)對(duì)(6.51±1.32)lg IU/mL，P>0.05]；治療后，對(duì)照組HBV DNA水平較治療前差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而治療組HBV DNA水平較對(duì)照組顯著下降[(2.51±0.32)對(duì)(6.21±0.56)lg IU/mL，P<0.05]。

二、兩組患者肝功能指標(biāo)水平比較

治療后，兩組患者ALT、AST和TBil水平均比治療前降低，且治療組ALT、AST和TBil水平降低幅度比對(duì)照組大(P<0.05)。見表 1。

三、兩組患者肝纖維化指標(biāo)水平比較

治療后，兩組患者Ⅳ-C、LN、HA、PⅢP水平均比治療前降低，且治療組Ⅳ-C、LN、HA、PⅢP水平降低幅度比對(duì)照組大(P<0.05)。見表 2。

四、兩組患者Th1/Th2 細(xì)胞因子水平比較

治療后，兩組患者IFN-γ、IL-10、IL-4、IL-2水平均比治療前降低，且治療組IFN-γ、IL-10、IL-4、IL-2水平降低幅度比對(duì)照組大(P<0.05)。見表3。

討 論

有研究表明[5]，慢性 HBV 攜帶者肝纖維化相關(guān)指標(biāo)HA、Ⅳ -C、P Ⅲ P水平比正常人群升高，當(dāng) HBV DNA 載量上升時(shí)，上述肝纖維化指標(biāo)表達(dá)亦升高。Th 細(xì)胞的兩個(gè)主要亞型是Th1、Th2，而Th1參與細(xì)胞免疫反應(yīng)主要是通過分泌 IFN-γ、IL-2發(fā)揮作用；Th2參與細(xì)胞免疫反應(yīng)主要是通過分泌IL-10、IL-4發(fā)揮作用[6]。正常狀態(tài)下，Th1、Th2細(xì)胞表達(dá)水平處于穩(wěn)定狀態(tài)，但在 HBV 感染后，Th1 細(xì)胞大量凋亡，而 Th2 細(xì)胞對(duì)這種凋亡耐受，結(jié)果導(dǎo)致Th1/Th2 細(xì)胞失衡，最終引起免疫功能紊亂，削弱了機(jī)體清除 HBV病毒的能力。多項(xiàng)研究表明[7-9]，HBV感染的乙型肝炎肝硬化的發(fā)生發(fā)展與體內(nèi)Th1/Th2 細(xì)胞因子密切相關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)，治療后，治療組患者HBV DNA、TBil、AST、ALT水平較對(duì)照組顯著下降，表明替諾福韋酯可有效抑制HBV復(fù)制，改善肝功能。對(duì)于肝纖維化指標(biāo)，治療后兩組患者HA、LN、PⅢP、IV-C水平均比治療前降低，且治療組上述指標(biāo)水平降低幅度比對(duì)照組大，提示替諾福韋酯可抑制患者肝纖維化狀態(tài)。對(duì)于Th1/Th2型細(xì)胞因子，治療后兩組患者IL-4、IL-10、IFN-γ、IL-2水平均比治療前降低，且治療組上述指標(biāo)水平降低幅度比對(duì)照組大，提示替諾福韋酯對(duì)患者具有免疫調(diào)節(jié)作用。

綜上所述，替諾福韋酯對(duì)乙型肝炎肝硬化患者可有效抑制HBV復(fù)制，改善肝功能，抑制肝纖維化和調(diào)節(jié)免疫。本研究的不足之處在于研究的樣本量較少，今后研究中應(yīng)擴(kuò)大樣本量，同時(shí)更加深入和全面研究其作用的機(jī)制。

表1 兩組患者肝功能水平比較(±s)

注：與對(duì)照組同時(shí)期相比，*P<0.05；與治療前相比，#P<0.05

表2 兩組患者肝纖維化水平比較(±s)

注：與對(duì)照組同時(shí)期相比，*P<0.05；與治療前相比，#P<0.05

表3 兩組患者Th1/Th2 細(xì)胞因子水平比較(±s)

注：與對(duì)照組同時(shí)期相比，*P<0.05；與治療前相比，#P<0.05