郜 文，孫秀梅，金衍健，郝 青，胡紅美，李鐵軍，郭遠(yuǎn)明

(1.浙江海洋大學(xué)海洋與漁業(yè)研究所，浙江 舟山 316021；2.浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江省海洋漁業(yè)資源可持續(xù)利用技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 舟山 316021)

擬除蟲菊酯農(nóng)藥是一種含有苯氧基的環(huán)丙烷酯的新型殺蟲劑,具有廣譜、高效和低毒等特點(diǎn)。近年來被廣泛使用在農(nóng)作物和漁業(yè)養(yǎng)殖中,在漁業(yè)養(yǎng)殖中的使用(主要用于清塘、毒殺雜魚和有害生物等)而殘留在水體中,進(jìn)入水體中的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥(PYRs)不僅會對地表水造成污染,也會在水生生物體內(nèi)富集,最終通過食物鏈進(jìn)入魚類和人體中,而造成潛在危害[1]。

目前擬除蟲菊酯類檢測常用方法有氣相色譜法[2-3]、氣相色譜質(zhì)譜[4-6]。現(xiàn)有分析方法中，涉及的擬除蟲菊酯農(nóng)藥種類較少，且前處理過程較繁瑣，為進(jìn)一步提高富集效果，本研究建立了環(huán)境樣品底泥中10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥提取檢測方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

正己烷、乙酸乙酯、丙酮、二氯甲烷均為色譜純；實(shí)驗(yàn)用水，符合GB/T 6682-2008一級水要求；鹽酸溶液，優(yōu)級純；銅粉，200目，純度99.7%；乙二胺-N-丙基甲硅烷(PSA)填料：40 μm～63 μm；佛羅里土固相萃取柱：1000 mg，6 mL；PSA-佛羅里土復(fù)合固相萃取柱；無水硫酸鈉，氯化鈉均為分析純(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

擬除蟲菊酯類標(biāo)準(zhǔn)溶液：聯(lián)苯菊酯、胺菊酯、丙烯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯和氟胺氰菊酯均為有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度分別為100 μg/mL，溶劑正己烷。

1.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，配有電子轟擊離子(EI)源；電子天平；離心機(jī)：轉(zhuǎn)速可達(dá)5000 r/min；旋渦混合器；固相萃取裝置；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；超聲波儀。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品的前處理

在裝有5 g濕泥樣的離心管中加入10 mL水，再加入20 mL正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮(8∶1∶1)，渦旋混合，浸泡30 min，超聲萃取30 min；5000 r/min離心5 min，上層有機(jī)相過無水硫酸鈉柱收集于旋蒸瓶中；下層加入20 mL正己烷∶乙酸乙酯∶丙酮(8∶1∶1)，重復(fù)提取一次, 合并有機(jī)相。

向提取液中加入適量銅粉，至銅粉不再發(fā)黑，充分渦旋混合脫硫。提取液于40 ℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入2 mL正己烷復(fù)溶,使用PSA-佛羅里土復(fù)合固相萃取柱凈化，待氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析。

1.3.2 樣品的分析測定

提取凈化后的樣品進(jìn)行氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析，升溫程序：初始溫度70℃，保持1 min；以20 ℃/min升至200 ℃，保持4min；再以15 ℃/min 升至250 ℃，保持1min；然后以10℃/min 升至280℃，保持2min。進(jìn)樣量：1 μL。進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣。多反應(yīng)監(jiān)測模式。溶劑延遲時間：5 min。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取溶劑的確定

因10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的穩(wěn)定性不一樣，采取以濕樣進(jìn)行提取。因?yàn)闈駱又泻写蠹s30%-60%的水，假如使用親水性有機(jī)溶劑(丙酮和乙酸乙酯)或者疏水性和親水性有機(jī)溶劑按比例進(jìn)行提取，渦旋震蕩時就能充分的接觸；假如用非極性疏水性有機(jī)溶劑正己烷提取，會出現(xiàn)排斥現(xiàn)象，考慮10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的極性和溶解度不同，本次實(shí)驗(yàn)采用混合溶劑提取。加入標(biāo)準(zhǔn)使用液濃度為1.0PPM的擬除蟲菊酯混合標(biāo)準(zhǔn)0.2毫升相同濃度的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥進(jìn)行加標(biāo)實(shí)驗(yàn)，每次實(shí)驗(yàn)平行測定6次，計(jì)算平均回收率和RSD值，實(shí)驗(yàn)考察兩種提取方式，一種是濕樣中先加入10 mL水樣，再加入溶劑進(jìn)行提取；另一種提取方式采用濕樣直接加混合溶劑進(jìn)行提取。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，加10毫升水之后用正己烷：乙酸乙酯：丙酮(8:1:1)提取效率達(dá)到75%以上，滿足實(shí)驗(yàn)要求。

2.2 有機(jī)碳、硫化物對擬除蟲菊酯類農(nóng)藥提取效率的影響

取二種類型泥樣，淡水養(yǎng)殖底泥和海水養(yǎng)殖底泥，分別測定其有機(jī)碳含量,并進(jìn)行正己烷：乙酸乙酯：丙酮(8∶1∶1)提取，將提取液分成二等份，氮吹干，依次向其中添加適量標(biāo)準(zhǔn)工作溶液并用正己烷定容至1 mL，得到濃度分別為10 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、500 μg/L的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。不除雜時，不同有機(jī)碳含量的基質(zhì)對擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的定量存在較大基質(zhì)效應(yīng)。

取淡水養(yǎng)殖底泥，提取后加入活化銅粉脫硫，并經(jīng)過PSA-佛羅里土固相萃取柱凈化后，濃縮用正己烷定容至1 mL，得到理論擬除蟲菊酯類農(nóng)藥濃度為50 μg/L的溶液。進(jìn)行儀器檢測，用標(biāo)準(zhǔn)工作溶液曲線定量，結(jié)果顯示除雜凈化過程可以減少擬除蟲菊酯類農(nóng)藥測定過程中的基質(zhì)效應(yīng)。

2.3 方法驗(yàn)證

通過配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)，確定氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法擬除蟲菊酯在10 μg/L～1000 μg/L濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，R2>0.996。通過空白樣品加標(biāo)的方法，以10倍信噪比(S/N)計(jì)算，氣相色譜質(zhì)譜法檢出限為：本方法底泥中擬除蟲菊酯的定量限為1.0-10μg/kg。不同添加水平下，氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥在底泥中的平均回收率為78.21%-109.2%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.23%-11.38%(n=6)之間。

3 結(jié)論

通過對樣品提取和凈化條件的優(yōu)化，建立了底泥中10種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的固相萃取-氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。樣品經(jīng)過經(jīng)正己烷-乙酸乙酯-丙酮混合溶劑超聲提取，銅粉除去硫化物，PSA-佛羅里土復(fù)合固相萃取柱凈化，經(jīng)由氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜定性定量分析，方法靈敏度高、檢測結(jié)果重復(fù)性好，可用于底泥中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留狀況監(jiān)測。