李冬玲 靖邊縣食品檢驗(yàn)檢測(cè)中心 陜西 榆林 718500

1 培養(yǎng)基概述

培養(yǎng)基指的是將給予微生物、植物或動(dòng)物生長(zhǎng)繁殖的不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基有多種形式和形態(tài)，一般含有無(wú)機(jī)鹽、維生素、水、含碳水化合物、含氮物質(zhì)等幾類。因?yàn)榕渲婆囵B(yǎng)基的原料不同，所使用要求和貯存保管方面也有所差異。通常情況下，如果培養(yǎng)基受熱受潮，容易發(fā)生分解變質(zhì)或細(xì)菌污染，所以在貯存培養(yǎng)基時(shí)必須要做好防潮、防熱工作。另外，一些培養(yǎng)基需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌操作，如組織培養(yǎng)基，其貯存時(shí)間較長(zhǎng)，所以需要控制其貯存溫度在3-6℃之間。由于液體培養(yǎng)基長(zhǎng)期保管難度較大，建議改制成粉末進(jìn)行貯存[1]。

2 培養(yǎng)基質(zhì)量控制的要點(diǎn)

培養(yǎng)基的形態(tài)多樣，但是無(wú)論哪種類型的培養(yǎng)基，在使用時(shí)都需要保證其質(zhì)量和性能，并且要保證配制準(zhǔn)確和使用方法正確，如果不能合理進(jìn)行培養(yǎng)基的貯存，會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響。為此，在食品衛(wèi)生檢驗(yàn)過(guò)程中，對(duì)于培養(yǎng)基的質(zhì)量控制，具體應(yīng)從以下幾個(gè)環(huán)節(jié)著手。

2.1 采購(gòu)環(huán)節(jié)

雖然在微生物檢驗(yàn)過(guò)程中需要進(jìn)行培養(yǎng)基的配制，但是實(shí)際上培養(yǎng)基多為商業(yè)化合成培養(yǎng)，因?yàn)橘?gòu)買商業(yè)化合成培養(yǎng)基要比手工配制效率高，在質(zhì)量方面也有一定的保證，另外商業(yè)化合成培養(yǎng)基不容易被污染，實(shí)驗(yàn)誤差比較小。但是仍然需要考慮商業(yè)化合成培養(yǎng)基在生產(chǎn)過(guò)程中存在的偏差，所以實(shí)驗(yàn)室應(yīng)購(gòu)買經(jīng)過(guò)質(zhì)量管理體系認(rèn)證的培養(yǎng)基，建議選擇國(guó)內(nèi)外知名的產(chǎn)品且市場(chǎng)評(píng)價(jià)效果較好的培養(yǎng)基。

2.2 配制環(huán)節(jié)

雖然在實(shí)驗(yàn)室實(shí)際使用過(guò)程中，多采用購(gòu)買的商業(yè)化合成培養(yǎng)基，但也不可忽視培養(yǎng)基配制環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制，因?yàn)榇_保微生物檢驗(yàn)成功的一個(gè)重要前提便是培養(yǎng)基能夠正確配制。在這一環(huán)節(jié)工作中，需要考慮這幾個(gè)方面的問(wèn)題：

首先，在培養(yǎng)基的配制過(guò)程中，必須要嚴(yán)格按照其說(shuō)明書或處方進(jìn)行，同時(shí)也要詳細(xì)記錄整個(gè)配制過(guò)程，主要包括配制的時(shí)間、配制人基本信息、培養(yǎng)基的名稱、培養(yǎng)基的批號(hào)、配制量、PH、滅菌條件以及各成分的生產(chǎn)廠商等，目的是一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基存在問(wèn)題能夠追溯根源。

其次，配制時(shí)要重點(diǎn)關(guān)注培養(yǎng)基的溶解、稱重及分裝，對(duì)于培養(yǎng)基的溶解，應(yīng)確保在溶解前與適量的水混合，避免粘底的情況發(fā)生，然后進(jìn)行加熱溶解，在整個(gè)溶解過(guò)程需要連續(xù)攪拌以便培養(yǎng)基更好地分散。如果培養(yǎng)基中含有瓊脂，在加熱溶解之前需要浸泡一會(huì)。對(duì)于培養(yǎng)基的稱重，應(yīng)選擇干燥的環(huán)境下進(jìn)行，避免培養(yǎng)基受潮，稱量時(shí)應(yīng)選用專門的藥匙進(jìn)行，避免發(fā)生交叉污染。稱量的天平也要選擇對(duì)應(yīng)感量的，并根據(jù)配方進(jìn)行操作，確保準(zhǔn)確的稱取量。配制好的培養(yǎng)基應(yīng)裝在比培養(yǎng)基體積大5倍的容器內(nèi)，且容器建議為玻璃材質(zhì)。

最后，水作為培養(yǎng)基配制過(guò)程中必不可少的原料，應(yīng)保證其PH在5.5-7.5之間，呈偏酸性，在溫度25℃時(shí)電導(dǎo)率要小于25us.cm-1，除了特殊要求以外。同時(shí)還需要定期進(jìn)行水的菌落總數(shù)測(cè)定，不能大于103CFU·mL-1。通常實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水或三級(jí)水，經(jīng)過(guò)冷凝操作或蒸餾的水便是蒸餾水，由于蒸餾水是通過(guò)熱餾分離獲取，所以一般不會(huì)引入其他雜質(zhì)[2]。

2.3 驗(yàn)收環(huán)節(jié)

驗(yàn)收環(huán)節(jié)主要是在培養(yǎng)基采購(gòu)后必要進(jìn)行的質(zhì)量驗(yàn)收，采購(gòu)人員首先需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行初步驗(yàn)收，驗(yàn)收的內(nèi)容為培養(yǎng)基的名稱、生產(chǎn)批號(hào)、有效期、產(chǎn)品包裝等，然后做好培養(yǎng)基數(shù)量和接收日期的記錄工作。在完成初步驗(yàn)收后，根據(jù)《食品微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》，在使用培養(yǎng)基前應(yīng)進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)，主要是培養(yǎng)基微生物性能指標(biāo)和理化指標(biāo)，需要向生產(chǎn)廠商索要培養(yǎng)基的質(zhì)檢報(bào)告，因?yàn)樵谫|(zhì)檢報(bào)告中含有微生物性能測(cè)試指標(biāo)及理化指標(biāo)。

微生物性能指標(biāo)指的是選擇性、特異性和生長(zhǎng)率，生長(zhǎng)率是檢測(cè)目標(biāo)菌生長(zhǎng)能力的重要指標(biāo)，要確保培養(yǎng)基的目標(biāo)菌生長(zhǎng)率低于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最低閾值；培養(yǎng)基的特異性是測(cè)定其指示能力的依據(jù)；而培養(yǎng)基的非目標(biāo)菌抑制能力則需要其選擇性來(lái)指示，此數(shù)值也要符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的限值要求。培養(yǎng)基的理化指標(biāo)只要包括PH值、顏色、凝膠穩(wěn)定性，所以需要生產(chǎn)廠商在培養(yǎng)基的原材料、生產(chǎn)工藝及流程環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格質(zhì)量把控。實(shí)驗(yàn)人員則是在使用前對(duì)這些理化指標(biāo)進(jìn)行詳細(xì)的檢查，確保與生產(chǎn)廠商提供的質(zhì)檢報(bào)告一致，從而滿足實(shí)驗(yàn)要求。

2.4 滅菌操作環(huán)節(jié)

培養(yǎng)基的滅菌操作也是保證培養(yǎng)基質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，這一環(huán)節(jié)主要采用干熱滅菌和濕熱滅菌兩種方式進(jìn)行。干熱滅菌是將培養(yǎng)基包裝好置于溫度160-170℃的電烘箱中加熱，加熱時(shí)間在1-2小時(shí)，以此實(shí)現(xiàn)微生物滅殺；濕熱滅菌則是通過(guò)沸水、飽和水蒸氣等方式進(jìn)行滅菌，其介質(zhì)為高溫高壓水蒸氣，溫度在121℃左右，時(shí)間是15-20分鐘。對(duì)比兩種滅菌方法，濕熱滅菌的穿透力相對(duì)較大，所以常用濕熱滅菌。需要注意的是，在滅菌過(guò)程中，既要保證滅菌效果，又要保證培養(yǎng)基的有效成分不被破壞。

2.5 貯存環(huán)節(jié)

培養(yǎng)基應(yīng)在保存期內(nèi)使用。如果是干粉培養(yǎng)基，在貯存時(shí)要置于陰涼干燥處，避免出現(xiàn)污染、氧化或受潮的情況。如果培養(yǎng)基出現(xiàn)凝結(jié)的情況，不可繼續(xù)使用。在貯存培養(yǎng)基時(shí)，也要確保其營(yíng)養(yǎng)成分和選擇性，滅菌操作后也要及時(shí)冷卻至所需的溫度，不能長(zhǎng)時(shí)間貯存在滅菌鍋中。對(duì)于24小時(shí)內(nèi)未使用完的瓊脂平板，應(yīng)在冰箱中避光密封貯存，溫度是2-8℃，并做好詳細(xì)記錄，包括配制時(shí)間、配制人等，最長(zhǎng)貯存時(shí)間是2-4周，以此確保培養(yǎng)基成分不發(fā)生改變。

3 結(jié)束語(yǔ)

微生物檢驗(yàn)對(duì)保證食品衛(wèi)生安全有著重要的作用，而培養(yǎng)基質(zhì)的安全穩(wěn)定能夠保證微生物檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性，因此需要加強(qiáng)培養(yǎng)基的質(zhì)量控制，需要對(duì)培養(yǎng)基使用的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量把控，為食品微生物檢驗(yàn)提供質(zhì)量可靠的培養(yǎng)基。