陳微微 代敏濤 吳旭 聶軍

(遵義醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院(遵義市第一人民醫(yī)院)消化內(nèi)科，貴州 遵義 563000)

胃息肉常好發(fā)于胃竇部及胃體，是生長(zhǎng)在胃黏膜表面并向胃腔凸起的組織，常表現(xiàn)為局部胃黏膜結(jié)節(jié)樣、顆粒樣凸起，表面光滑、界限清楚，直徑常<2 cm，胃息肉的臨床表現(xiàn)缺乏特異性，單純的胃部息肉常無明顯的臨床表現(xiàn)，當(dāng)機(jī)體合并其他消化道疾病，表現(xiàn)為腹部飽脹感、慢性反流、腹部疼痛及消化不良等癥狀，常在胃鏡檢查時(shí)發(fā)現(xiàn)。根據(jù)胃息肉的組織病理學(xué)特征將其分為增生性息肉、腺瘤性息肉、炎性息肉、胃底性息肉，胃息肉被認(rèn)為是癌前病變的征象，特別是直徑>2 cm的胃腺瘤性息肉〔1，2〕。胃癌是臨床嚴(yán)重的惡性腫瘤之一，治療預(yù)后較差，嚴(yán)重威脅生命安全，我國(guó)是胃癌高發(fā)國(guó)家，發(fā)病率與死亡率約占世界總發(fā)病與總死亡率的50%，疾病負(fù)擔(dān)相對(duì)較重，是癌癥防治重點(diǎn)〔3〕。研究表明，胃息肉和腫瘤抑制基因與癌基因的突變有關(guān)，基因突變導(dǎo)致腫瘤進(jìn)展加快，臨床針對(duì)直徑>0.5 cm的胃息肉為防止癌變的可能，應(yīng)行胃鏡下切除、活檢，并行幽門螺桿菌(HP)根除治療，對(duì)胃息肉惡性進(jìn)展的早期進(jìn)行預(yù)防、治療具有重要意義〔4，5〕。叉頭框蛋白(Fox)a2為鼠疫DNA結(jié)合蛋白，其在個(gè)體胚胎發(fā)育的多個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)揮重要作用，相關(guān)研究表明，F(xiàn)oxa2在諸多腫瘤中，如乳腺癌、肝細(xì)胞癌中均呈現(xiàn)低表達(dá)〔6，7〕。本研究旨在探討Foxa2在老年胃息肉患者機(jī)體中的表達(dá)，并分析其與老年胃息肉惡性進(jìn)展的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1納入對(duì)象 本研究嚴(yán)格遵循本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，選取遵義市第一人民醫(yī)院2015年10月至2018年9月內(nèi)鏡中心胃鏡檢查患者，根據(jù)計(jì)算機(jī)隨機(jī)抽取65例胃部息肉患者，隨機(jī)抽取同時(shí)期我院胃腸外科胃癌手術(shù)標(biāo)本35例，根據(jù)鏡檢病灶組織的病理類型進(jìn)行分組，將炎性或增生性胃息肉患者65例納入觀察1組，將進(jìn)展期胃癌患者35例納入觀察2組。觀察1組男43例，女22例；年齡60～80歲，平均(70.85±5.32)歲。觀察2組男23例，女性12例；年齡60～80歲，平均(70.76±5.27)歲。選擇該時(shí)期內(nèi)體檢健康者45例為對(duì)照組，其中男28例，女17例；年齡60～80歲，平均(71.52±6.89)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①胃鏡檢查明確胃部息肉存在；②臨床資料完整；③入組受試者均簽訂知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴心、腦、腎等重要臟器功能受損者；②凝血功能異常者；③伴其他部位惡性腫瘤者。3組一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2Foxa2檢測(cè)方法 采用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)胃息肉組織中Foxa2表達(dá)情況，方法選用標(biāo)準(zhǔn)生物素-鏈霉卵白素-過氧化氫酶法進(jìn)行組織染色，取石蠟4 μm進(jìn)行切片、脫蠟、水化，采用pH為6.0的0.01 mol/L檸檬酸鹽緩沖液對(duì)其進(jìn)行熱修復(fù)抗原，在室溫下冷卻15～20 min，3 ml/L Triton-X 100處理30 min，30 ml/L過氧化氫-甲醇封閉內(nèi)源性過氧化物酶活性，切片經(jīng)兔抗人Foxa2抗體與小鼠抗人E-鈣黏蛋白(cadherin)抗體在4℃條件下孵育12 h，沖洗之后，加入生物素標(biāo)記的山羊抗小鼠二抗工作液，再次在室溫下孵育0.5 h；加入鏈霉卵白素工作液，在室溫下孵育0.5 h；加入二氨基聯(lián)苯胺(DBA)顯色，然后使用蘇木精輕度復(fù)染、脫水、封片。

1.3陽性表達(dá)判定 磷酸鹽緩沖液(PBS)代表一抗視為陰性對(duì)照，利用染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞的占比率聯(lián)合判定：染色強(qiáng)度主要采用0～3分4個(gè)等級(jí)：0分為陰性；1分為弱陽性；2分為中度陽性；3分為強(qiáng)陽性；陽性細(xì)胞百分比分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0分為陽性細(xì)胞≤5%；1分為6%～25%；2分為26%～50%；3分為51%～75%；4分為>75%。Foxa2陽性表達(dá)：染色強(qiáng)度×陽性細(xì)胞占比≥2分。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行單因素方差分析、χ2檢驗(yàn)、雙變量Spearman相關(guān)性檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.13組Foxa2表達(dá) 對(duì)照組、觀察1組、觀察2組Foxa2表達(dá)分別為(3.58±1.28)、(33.11±8.01)、(96.32±0.91)，3組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2 931.831，P<0.001)。

2.23組Foxa2陽性率比較 觀察2組Foxa2陽性率〔35例(100%)〕>觀察1組〔30例(46.15%)〕>對(duì)照組〔2例(4.44%)〕，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.3老年胃息肉惡性進(jìn)展與Foxa2的相關(guān)性 Foxa2表達(dá)與老年胃息肉患者惡性進(jìn)展呈正相關(guān)(r=0.538，P<0.001)。

3 討 論

近年來，全球胃癌發(fā)病率呈逐年下降趨勢(shì)，但盡管如此，我國(guó)胃癌的發(fā)病率仍處于較高水平，因此未來相當(dāng)一段時(shí)間內(nèi)，胃癌仍是我國(guó)腫瘤防控的重要公共衛(wèi)生問題之一〔8〕。因胃癌屬于慢性疾病，起病隱匿，疾病進(jìn)展漫長(zhǎng)復(fù)雜，患者偶可伴有消化道類似癥狀外，諸多胃癌患者無明顯癥狀，發(fā)現(xiàn)時(shí)已處于疾病晚期，錯(cuò)過治療的最佳時(shí)期〔9，10〕。因此，早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療對(duì)確定患者治療方案及改善預(yù)后具有重要意義。

胃息肉是胃黏膜的良性凸起，主要是由間質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞及其他膠原成分組成，諸多患者常伴隨非特異性臨床癥狀，如腹脹、腹痛等，常包括胃底腺息肉、增生性息肉、炎性息肉等病理類型〔11〕。針對(duì)臨床檢查發(fā)現(xiàn)的胃鏡下息肉是否需要切除應(yīng)根據(jù)胃息肉是否發(fā)生癌變決定，了解胃息肉的發(fā)生機(jī)制及與癌變的關(guān)系，探尋臨床可用于篩選胃息肉癌變風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)指標(biāo)，對(duì)降低臨床胃息肉癌變的概率具有重要意義〔12，13〕。本研究結(jié)果顯示，F(xiàn)oxa2表達(dá)與老年胃息肉患者惡性進(jìn)展呈正相關(guān)。分析其原因?yàn)椋R床常見的用于評(píng)估胃癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)與預(yù)后的指標(biāo)主要有血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、胃干細(xì)胞與胃癌干細(xì)胞等，其主要為非特異性的廣譜分子標(biāo)志，與細(xì)胞的增殖密切相關(guān)，其中血管內(nèi)生長(zhǎng)因子主要反映腫瘤中小血管生成情況，據(jù)相關(guān)研究證實(shí)，Hedgehog及Wnt信號(hào)通路在胃腸道息肉發(fā)生過程中發(fā)揮重要作用，F(xiàn)oxa2又稱為肝細(xì)胞核因子3β，作為一種DNA結(jié)合蛋白，在個(gè)體胚胎發(fā)育過程的諸多環(huán)節(jié)中發(fā)揮重要作用〔14～16〕。趙金磊等〔17〕研究指出，F(xiàn)oxa2在肝癌、肺腺癌、乳腺癌等諸多惡性腫瘤的組織中表達(dá)缺失，可發(fā)揮抑癌基因的功能，其研究結(jié)果顯示，胰腺癌組織中Foxa2蛋白陽性呈現(xiàn)低表達(dá)，其陽性表達(dá)率較癌旁組織低，可發(fā)揮抑癌基因的功能，與胰腺癌細(xì)胞增殖、遷移與侵襲發(fā)生密切相關(guān)。王立斌等〔18〕研究指出，在肝細(xì)胞癌組織和細(xì)胞中Foxa2呈現(xiàn)低表達(dá)，可使HepG2細(xì)胞體外增殖與裸鼠體內(nèi)瘤體生長(zhǎng)受到顯著抑制。Foxa2亞族蛋白對(duì)胃腸道內(nèi)內(nèi)分泌細(xì)胞與杯狀細(xì)胞的發(fā)育具有重要意義。Foxa2表達(dá)與胃息肉惡性進(jìn)展的關(guān)系：正常胃黏膜中Foxa2僅少量存在腺體細(xì)胞中。

本研究仍具有不足之處：納入的樣本數(shù)量較少，且屬于單中心研究，上述因素均會(huì)導(dǎo)致本研究結(jié)果具有一定偏倚，因此希望在未來能夠就此展開多樣本、多中心的研究，對(duì)本研究結(jié)果加以證實(shí)，提高數(shù)據(jù)的真實(shí)性。

綜上，F(xiàn)oxa2表達(dá)與老年胃息肉惡性進(jìn)展呈正相關(guān)，臨床可將Foxa2作為老年胃部息肉惡性進(jìn)展的預(yù)測(cè)診斷指標(biāo)。