鄭思遠 翟玉瑩

(沈陽工學(xué)院，遼寧 撫順 113122)

1 豆瓣綠無病毒苗的培育

1.1 外植體的取得

將長度在0.5cm左右的豆瓣綠頂芽置于清水中沖洗干凈，在實驗室的超凈工作臺上用1%的升汞(按每100mL加吐溫-80,10滴)作表面滅菌6min,對豆瓣綠頂芽作初步殺菌處理，殺菌處理后用無菌水進行沖洗，每次3min沖洗6次，最后將豆瓣綠頂芽放置于無菌紗布或無菌濾紙上進行吸水。在解剖鏡下切取莖尖0.1 ～0.62mm后迅速將其置于MS+BA 1 +NAA0.8+蔗糖3% +瓊脂1%,pH值5.8的培養(yǎng)基上,在15～ 18℃、光照800lx的條件下培養(yǎng)，放置時注意生長點向上，保障植株的正常生長。經(jīng)40～60d形成大量的愈傷組織進而形成幼芽，轉(zhuǎn)入MS+BA 1 +NAA0.3+蔗糖3%+瓊脂1%,pH值5.8的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，溫度15～ 18℃,光照800 lx,30d后在電鏡檢視下，檢查豆瓣綠頂芽是否含有病毒，如果檢測后發(fā)現(xiàn)病毒存在則停止培養(yǎng)。

1.2 繼代培養(yǎng)

將檢測中未發(fā)現(xiàn)病毒的頂芽利用MS+BA1+NAA0.4+蔗糖3%+瓊脂1%配比的培養(yǎng)液培養(yǎng)脫毒芽在培養(yǎng)液中會不斷生長形成更多不定芽。在培養(yǎng)液配比不變并且溫度保持在18～25℃,光照800～100 lx的條件下培養(yǎng)物會不斷生長出小苗，在4周以后大約擴大5倍以上。

1.3 生根培養(yǎng)

可以將繼代培養(yǎng)的大于2cm的苗轉(zhuǎn)接到1/2MS+IBA1+蔗糖2%+瓊脂1%的培養(yǎng)液中進行生根培養(yǎng)，溫度18～ 25℃、光照1000～ 1500 lx，4～5周后便有大量生根等，這些根基成熟之后便可栽培。

1.4 煉苗

在滅菌并施用1/2MS大量元素營養(yǎng)液的珍珠巖中種植生根苗，保持溫度15～20℃，相對濕度85% ,光照強度1000～ 1200 lx,2周后將環(huán)境濕度逐漸改變?yōu)樽匀粷穸龋?周便可栽培。

2 豆瓣綠無病毒苗的無土栽培技術(shù)

無土栽培技術(shù)(soilless culture)是指用基質(zhì)替代天然土壤,或者僅培育苗時使用基質(zhì),在定植以后通過人工營養(yǎng)液進行灌溉的一種栽培方法。因這種無土栽培技術(shù)可人工創(chuàng)造良好的植株根際環(huán)境從而取代土壤環(huán)境，并有效防止土壤連坐病害或土壤鹽分積累造成的生理生長障礙，充分滿足作物對物質(zhì)營養(yǎng)、水分和氣體等環(huán)境條件的需要，因此可以達到省水、省肥、省工、高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的特點，無土栽培使用的基本材料可以循環(huán)利用，最大的好處可以幫助企業(yè)或者工廠降低成本。

2.1 栽培工具

無土栽培專用盆、瓷盆、南泥盆、泥盆、塑料盆等。

2.2 栽培基質(zhì)

干凈的河沙、珍珠巖、砼石苔蘚等。

2.3 培養(yǎng)液

KNO3：400mg/L；NH4NO：350mg/L；KH2PO4：80mg/L；MgSO4·7H2O ：75mg/L；CaCl2·4H2O ：85mg/L；FeSO4·7H2O ：20mg/L。

2.4 管理

從最開始的種植、施肥、除蟲除草，到后期的修剪、加工都屬于栽培管理，首先要對品種的優(yōu)良程度、生長環(huán)境的適宜度進行選擇，還要在此過程中不斷除草，而現(xiàn)今許多種植者為了提高工作效率，過多地使用農(nóng)藥，導(dǎo)致生長出來的豆瓣綠植物中的農(nóng)藥量超標，導(dǎo)致植物出現(xiàn)本質(zhì)上的危害，適當(dāng)?shù)厥┓适强梢缘?，但必須保證植物中的農(nóng)藥以及有害物質(zhì)不超過國家規(guī)定的范圍。引進大量先進的機械化技術(shù)可以提高工作效率，例如采用新興的技術(shù)，加大對于互聯(lián)網(wǎng)的應(yīng)用，從而降低勞動成本，不僅很好地節(jié)約了資源，還使得工作效率大大提高。豆瓣綠植物的一道重要工序便是栽培管理方式，也是最為核心的步驟。完善豆瓣綠無病毒苗質(zhì)量管理體系林業(yè)種苗植物的品質(zhì)，首先要檢測農(nóng)藥的殘留量是否符合國家的相關(guān)標準；其次，對于植物的養(yǎng)護也需要專業(yè)的人員來進行，來應(yīng)對隨時出現(xiàn)的植物病蟲害以及自然災(zāi)害的問題，同時也要保障豆瓣綠植物的生命活力，及時更新舊植物保證植物的可持續(xù)性循環(huán)。最后，觀賞植物管理認證體系是種植者最基本的保障，同時也是實現(xiàn)觀賞性植物可持續(xù)的基本保障。

3 結(jié)語

在對豆瓣綠的外植體選取時,可以選取豆瓣綠的頂芽、基本芽和帶葉柄的葉片作為外植體培養(yǎng)，成功率較高。一般工廠化快速繁殖中推薦使用葉片進行外植體替代頂芽進行種苗。培養(yǎng)基的使用注意事項，關(guān)注細胞分裂素時主要關(guān)鍵性物質(zhì)，無論選取哪部分作為外植體在繼代培養(yǎng)過程中，較高濃度的6-BA都將導(dǎo)致玻璃化苗出現(xiàn)，因此，一定要注意快速繁殖誘導(dǎo)化分化和增殖的最佳適合培養(yǎng)基質(zhì)均為：MS+6-ba 0.5mg/l+NAA 0.1 mg/l,確保較高的平均增殖率。合適的試管苗形態(tài)既能夠提高煉苗成活率，還能快速提高種苗能力，根系數(shù)量伸長增多可以提高煉苗成活率,有利于穴盤苗成苗的出售，最大限度縮短育苗時間。

豆瓣綠作為一種觀賞性植物，同時具備一定的藥用價值，對于豆瓣綠植株的培育具有實踐性意義，長期的分株或扦插的無性繁殖方式會導(dǎo)致豆瓣綠植物容易發(fā)生病毒病，培育無毒苗同時結(jié)合無土栽培方式，不僅提高了豆瓣綠植株的產(chǎn)量，提高了豆瓣綠植物的經(jīng)濟價值，同時增強了豆瓣綠植物的抗病毒以及抗病蟲害的能力，無土栽培技術(shù)不受空間等因素的限制，使得豆瓣綠植物的培育更具有靈活性，值得實際推廣。