(三門峽市中心醫(yī)院，河南 三門峽 472000)

性激素具有促進(jìn)性器官發(fā)育、維持性征及性功能等作用，其水平對(duì)于診治相關(guān)疾病，了解患者內(nèi)分泌功能具有重要價(jià)值[1]。性激素檢測(cè)常規(guī)6項(xiàng)為：促卵泡激素(FSH)、促黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、睪酮(TESTO)、孕酮(PROG)、催乳素(PRL)[2]。其常用檢測(cè)方法是化學(xué)發(fā)光免疫法，但不同儀器不同系統(tǒng)間發(fā)光原理差異致使性激素檢測(cè)結(jié)果不盡相同[3]。因此為能更準(zhǔn)確服務(wù)于臨床，有必要對(duì)不同方法進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)和一致性探討。目前臨床占有率較高的三種方法為直接化學(xué)發(fā)光免疫分析法(CLIA)、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法(CLEIA)及電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(ECLIA)。本次研究旨在比較CLIA、CLEIA及ECLIA檢測(cè)性激素水平的結(jié)果差異。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取三門峽市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科2015年3月～2018年3月門診患者經(jīng)CLIA檢測(cè)性激素水平后剩余無溶血新鮮血清標(biāo)本240份。女194例，男46例；年齡3～65歲，平均(25.31±8.67)歲。樣本濃度范圍：FSH 1.17～142.26 IU/mL，LH 0.25～150.48 IU/mL，E2 8.23～164.23 pg/mL，TESTO 0.02～14.19 ng/mL，PROG 0.11～23.43 ng/mL，PRL 0.15～82.73 ng/mL。

1.2 儀器與試劑

CLIA應(yīng)用西門子拜耳ADVIA Centaur 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑及標(biāo)準(zhǔn)品，CLEIA應(yīng)用安圖全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光酶免儀A2000及其配套試劑及標(biāo)準(zhǔn)品，ECLIA應(yīng)用羅氏cobas e411全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀及其配套試劑及標(biāo)準(zhǔn)品。精密度評(píng)估時(shí)，三臺(tái)儀器均使用Bio-Rad公司生產(chǎn)的免疫學(xué)定值質(zhì)控品檢驗(yàn)。

1.3 方法

1.3.1 參考EP15-A2文件[4]，對(duì)3臺(tái)儀器應(yīng)用配套標(biāo)準(zhǔn)品校正，應(yīng)用Bio-Rad公司低(批號(hào)：40231)、中(批號(hào)：40232)、高(批號(hào)：40233)免疫學(xué)定值質(zhì)控品每天各檢測(cè)3次，連續(xù)檢測(cè)5d。計(jì)算總變異系數(shù)(CV)，CV =標(biāo)準(zhǔn)偏差/平均值×100%。

1.3.2 參考EP9-A2文件[5]，每天應(yīng)用CLEIA及ECLIA測(cè)定同樣7份標(biāo)本，連續(xù)檢測(cè)20 d。當(dāng)2種方法間測(cè)定值差異超過平均偏差4倍時(shí)，重復(fù)測(cè)定，若重復(fù)測(cè)定值差異小于8.3%采用首次測(cè)定結(jié)果，若差異大于8.3%剔除標(biāo)本。比較CLIA、CLEIA、ECLIA檢測(cè)性激素水平結(jié)果，計(jì)算CLEIA及ECLIA與CLIA間和CLEIA與ECLIA間的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)r2。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 三種儀器6種性激素項(xiàng)目總CV

三種儀器6種性激素項(xiàng)目不精密度CV 均小于1/3TEa(8.30%)，符合CLSI室間質(zhì)評(píng)定值范圍[7]。見表1。

表1 三種儀器6個(gè)性激素項(xiàng)目總CV %

2.2 三種方法檢測(cè)性激素水平結(jié)果

FSH、LH、TESTO、PRL檢測(cè)三種方法相互間結(jié)果一致(r2≥0.95)；E2檢測(cè)三種方法相互間結(jié)果不一致(r2<0.95)；PROG檢測(cè)CLEIA與ECLIA結(jié)果一致(r2≥0.95)，CLIA與CLEIA、ECLIA與CLIA間結(jié)果不一致(r2<0.95)。見表2。

表2 三種方法檢測(cè)性激素水平結(jié)果

3 討論

性激素的化學(xué)本質(zhì)是脂質(zhì)，與細(xì)胞漿內(nèi)特定受體蛋白結(jié)合，生成激素-受體復(fù)合物，與細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)相作用，影響DNA的轉(zhuǎn)錄及復(fù)制，從而調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝和分化[2]。CLIA是將化學(xué)發(fā)光測(cè)定技術(shù)與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測(cè)分析的技術(shù)。CLEIA 以酶標(biāo)記生物活性物質(zhì)進(jìn)行免疫反應(yīng)，酶反應(yīng)底物作為發(fā)光劑，在信號(hào)試劑作用下發(fā)光，用發(fā)光信號(hào)測(cè)定儀進(jìn)行發(fā)光測(cè)定。ECLIA指由電化學(xué)反應(yīng)引起的化學(xué)發(fā)光過程，反應(yīng)在電極表面進(jìn)行，發(fā)光底物激發(fā)光反應(yīng)。本次研究中三種儀器不精密度CV 均小于1/3TEa，符合CLSI室間質(zhì)評(píng)定值范圍，可進(jìn)行比較。三種方法檢測(cè)FSH、LH、TESTO、PRL結(jié)果一致(r2≥0.95)；檢測(cè)E2相互結(jié)果不一致(r2<0.95)；檢測(cè)PROG時(shí)CLEIA與ECLIA結(jié)果一致(r2≥0.95)，CLIA與CLEIA、ECLIA與CLIA間結(jié)果不一致(r2<0.95)。研究結(jié)果提示不同化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)性激素水平時(shí)存在差異。因不同儀器的抗體來源、包被方式、發(fā)光原理等差異，不同檢測(cè)方法檢測(cè)性激素項(xiàng)目時(shí)結(jié)果可出現(xiàn)差異。因此，為保證臨床檢驗(yàn)結(jié)果的唯一性及一致性，有多種化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)儀器的醫(yī)院應(yīng)定期對(duì)不同儀器的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，考慮結(jié)果可比性因素。對(duì)能夠結(jié)果具有一致性的項(xiàng)目，以一種檢測(cè)方法為主；而檢測(cè)結(jié)果不一致的項(xiàng)目，建議與其它如酶聯(lián)免疫法、免疫放射法等檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，選擇結(jié)果最具相關(guān)性的化學(xué)發(fā)光免疫法。