張龍開 覃婕媛 趙維波 馬換換 陳曉丹 林偉斌 劉亞鳳 朱海龍 張丹雁

摘要?[目的]對浙江、安徽、湖北、湖南、河北及河南6個產(chǎn)地白術(shù)進(jìn)行性狀特征、揮發(fā)油含量及化學(xué)組分對比分析，為不同產(chǎn)地白術(shù)鑒別及質(zhì)量評價提供參考。[方法]采用傳統(tǒng)性狀鑒定法比較6個不同產(chǎn)地白術(shù)藥材性狀差異;水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，并計算其揮發(fā)油含量;以氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用技術(shù)分析揮發(fā)油組分，峰面積歸一化法計算其相對百分含量。[結(jié)果]各產(chǎn)地白術(shù)藥材在形狀、大小及表面特征等方面存在一定差異;揮發(fā)油含量為0.58% ～ 1.22%，由高到低分別為湖南（1.22%）>浙江（1.20%）>安徽（1.02%）>湖北（0.94%）>河南（0.86%）>河北（0.58%）;6個產(chǎn)區(qū)白術(shù)揮發(fā)油中共鑒定出46個組分，共有成分14個，相對百分含量之和大于90%，油中主含蒼術(shù)酮（>60%）、（E，E）-1，5-dimethyl-8-（1-methylethylidene）-1，5-Cyclodecadiene、3，7（11）-蛇床二烯、β-芹子烯、β-石竹烯等。[結(jié)論]各產(chǎn)區(qū)白術(shù)在性狀特征、揮發(fā)油含量及組分等方面的差異揭示了產(chǎn)地與白術(shù)內(nèi)在質(zhì)量的相關(guān)性。

關(guān)鍵詞?白術(shù);性狀特征;揮發(fā)油;化學(xué)成分;產(chǎn)地;鑒別;質(zhì)量評價

中圖分類號?R?284.1文獻(xiàn)標(biāo)識碼?A

文章編號?0517-6611（2019）23-0203-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.23.059

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Study on Identification of Atractylodes macrocephala Koidz in Different Origins

ZHANG Long?kai1，2， QIN Jie?yuan3， ZHAO Wei?bo4 et al

（1.Hong Zheng Dao（China）Traditional Chinese Medicine Research Company Ltd.，Guangzhou，Guangdong 510000;2.Infinitus （China） Company Ltd.，Guangzhou，Guangdong 510000;3.Tian Fang Jian（China） Pharma Co.，Ltd.，Guangzhou，Guangdong 510000;4.Guangzhou University of Chinese Medicine， Guangzhou，Guangdong 510006）

Abstract?[Objective]The trait characteristics， the volatile oil content and chemical composition of Atractylodes macrocephala in Zhejiang， Anhui， Hubei， Hunan， Hebei and Henan were compared， which provides reference for the identification and quality evaluation of Atractylodes macrocephala in different origins.[Method]The character difference of Atractylodes macrocephala in six different origins were compared by traditional trait identification method， the volatile oil was extracted by steam distillation and its volatile oil content was calculated. Its components were analyzed by gas chromatography?mass spectrometry （GC?MS） and the relative percentages were calculated by peak area normalization. [Result]There were some differences in the shape， size and surface characteristics of Atractylodes macrocephala from different origins; the volatile oil content ranged from 0.58% to 1.22% and the contents from high to low were Hunan（1.22%）> Zhejiang （1.20%）> Anhui （1.02%）> Hubei （0.94%）> Henan （0.86%）> Hebei （ 0.58%）; a total of 46 components were identified in the volatile oils of Atractylodes macrocephala and there were 14 common components， and the sum of their relative percentage was more than 90%. The main components in the volatile oils were atractylone（>60%）， （E，E）?1，5?dimethyl?8?（1?methylethylidene）?1，5?Cyclodeca diene， Selina?3，7（11）?diene， β?Selinene and β?caryophyllene， etc. [Conclusion]The differences in traits， volatile oil content and composition of Atractylodes macrocephala in different producing areas revealed the correlation between the origin and the intrinsic quality of Atractylodes macrocephala.

Key words?Atractylodes macrocephala Koidz;Trait characteristics;Volatile oil;Chemical composition;Origins;Identification;Quality evaluation

白術(shù)為菊科蒼術(shù)屬植物白術(shù)（Atractylodes macrocephala Koidz）的干燥根莖，具有健脾益氣、燥濕利水、止汗、安胎的功效，用于治療脾虛食少、腹脹泄瀉、痰飲眩悸、水腫、自汗、胎動不安等癥[1]，主產(chǎn)于安徽、浙江、河北等地，自古以浙江為道地產(chǎn)區(qū)，后引種擴散至江西、湖南、河北等地[2]。由于環(huán)境氣候及栽培加工技術(shù)的影響，導(dǎo)致不同產(chǎn)地之間的白術(shù)藥效成分存在一定差異[3]，藥材外觀性狀也有所不同。近期對各產(chǎn)區(qū)白術(shù)藥材成分差異對比研究多集中于其內(nèi)酯成分[4-6]，雖有對不同產(chǎn)區(qū)白術(shù)揮發(fā)油成分對比分析，但產(chǎn)區(qū)選取較少[7-8]，同時產(chǎn)地對白術(shù)外觀性狀的影響亦鮮見報道，該研究對浙江、安徽、湖北、湖南等6個產(chǎn)區(qū)的白術(shù)藥材的外觀性狀、揮發(fā)油含量及其成分進(jìn)行對比研究，為完善白術(shù)的質(zhì)量評價提供依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?藥材

試驗所用白術(shù)藥材共6批，分別來自浙江、安徽、湖北、湖南、河北、河南不同產(chǎn)地，編號分別為S1～S6，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)張丹雁教授鑒定，為菊科蒼術(shù)屬植物白術(shù)（Atractylodes macrocephala Koidz）的干燥根莖。

1.2?儀器

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（安捷倫7890B-5977A型）;HP-5ms UI型毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）;7693型自動進(jìn)樣器（美國安捷倫有限公司）;揮發(fā)油提取器（北京玻璃儀器廠）;DS-1500A型萬分之一分析天平（佛山市拓普域電子有限公司）;TC-15型電加熱套（海寧市華星儀器廠）。

1.3?試劑

石油醚（色譜級，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）;蒸餾水。

1.4?藥材性狀

收集浙江、安徽、湖北、湖南、河北及河南6個產(chǎn)地白術(shù)藥材樣品，采用傳統(tǒng)鑒定技術(shù)對各產(chǎn)地白術(shù)藥材性狀特征進(jìn)行總結(jié)對比分析。

1.5?揮發(fā)油提取

取6個不同產(chǎn)地白術(shù)藥材粉碎，參照2015年版《中國藥典》四部通則中揮發(fā)油測定法[9]，加熱回流提取4 h，至測定器中揮發(fā)油量不再增加為止，冷卻后收集揮發(fā)油并記錄其顏色，稱重，計算揮發(fā)油含量。

1.6?揮發(fā)油GC-MS成分分析

1.6.1?色譜條件。

1.6.1.1?氣相（GC）條件。HP-5ms UI型毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）;載氣：高純氦氣;流量：1.0 mL/min;進(jìn)樣量：1 μL;分流比：30∶1;程序升溫：初始溫度80 ℃，恒溫2 min，以 2 ℃/min的速度升溫至120 ℃，恒溫2 min，以2 ℃/min的速度升溫至 140 ℃，恒溫4 min，以4 ℃/min的速度升溫至200 ℃，恒溫3 min，以10 ℃/min的速度升溫至240 ℃，保持2 min，氣化室溫度250 ℃。

1.6.1.2

質(zhì)譜（MS）條件。離子源：EI源;離子源溫度：230 ℃;四級桿150 ℃;接口溫度：280 ℃;掃描范圍（m/z）：50～550。

1.6.2?供試品溶液制備。

分別取“1.5”項下提取到的各樣品揮發(fā)油30 μL于2 mL容量瓶中，加入適量石油醚溶液定容至刻度，混勻，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾即得供試品溶液。

1.6.3?供試品溶液測定。

取“1.6.2”項下各供試品溶液1 μL，按“1.6.1”色譜條件進(jìn)樣。通過計算機自動檢索與標(biāo)準(zhǔn)圖譜（NIST14 標(biāo)準(zhǔn)譜庫）對照，對揮發(fā)油化學(xué)組分進(jìn)行鑒定，并用色譜峰面積歸一化法計算各成分的相對百分含量。

2?結(jié)果與分析

2.1?藥材性狀

6個產(chǎn)地白術(shù)藥材在形狀、大小及表面特征等方面存在一定差異，藥材見圖1，具體性狀特征詳見表1。

2.2?揮發(fā)油含量

從表2可看出，6個產(chǎn)地白術(shù)揮發(fā)油含量為0.58%～1.22%，由高到低分別為湖南（1.22%）>浙江（1.20%）>安徽（1.02%）>湖北（0.94%）>河南（0.86%）>河北（0.58%）。

2.3?白術(shù)揮發(fā)油成分分析

對6個供試品溶液進(jìn)行測定，總離子流色譜圖見圖2。計算機自動檢索與NIST14 標(biāo)準(zhǔn)譜庫對照，對揮發(fā)油化學(xué)組分進(jìn)行鑒定，峰面積歸一化法計算各成分的相對百分含量，其結(jié)果見表3。

6個產(chǎn)地白術(shù)揮發(fā)油中共鑒定出46個化學(xué)成分，各產(chǎn)地間揮發(fā)油化學(xué)成分?jǐn)?shù)量由高至低依次為湖北（32）>浙江（31）>河南（27）>安徽（25）=河北（25）>湖南（23），具體成分詳見表3，其共有成分14個，主要為蒼術(shù)酮、β-芹子烯、（4aR，8aS）-4a-Methyl-1-methylene-7-（propan-2-ylidene）decahydronaphthalene、β-石竹烯、（E，E）-1，5-dimethyl-8-（1-methylethylidene）-1，5-Cyclodecadiene、丙羥木栓酮等。油中相對含量最高者為蒼術(shù)酮（>60%），各產(chǎn)地間由高到低依次為湖南（74.10%）>安徽（70.60%）>河北（69.30%）>湖北（66.60%）>河南（62.50%）>浙江（61.50%）。

其余微量成分中，石竹烯氧化物、α-木香醇及環(huán)氧化蛇麻烯 Ⅱ 等成分僅在浙江白術(shù)中檢出;α-古云烯僅在湖北、湖南及河南白術(shù)中檢出;除安徽、湖北外，其余產(chǎn)區(qū)均檢出β-香根草烯成分。

3?結(jié)論與討論

試驗結(jié)果表明，產(chǎn)地不同，白術(shù)在外觀性狀、揮發(fā)油含量、揮發(fā)油成分及其相對百分含量等方面均有一定的差異。

白術(shù)是浙江道地藥材，在浙江種植歷史悠久，種植技術(shù)規(guī)范，質(zhì)量佳，栽培面積大，產(chǎn)量曾達(dá)全國80%～90%，被廣泛研究和報道，但近年來浙江房地產(chǎn)經(jīng)濟快速發(fā)展，浙術(shù)種植面積減少，導(dǎo)致其產(chǎn)量驟減，供不應(yīng)求，為解決供需關(guān)系，相鄰地區(qū)包括安徽、河南及外產(chǎn)區(qū)湖南、湖北等地大力開展白術(shù)種植，市場白術(shù)的供應(yīng)量有所提高。據(jù)資料報道[10]，湖南、江西、湖北等引種白術(shù)產(chǎn)量、質(zhì)量都可與浙術(shù)媲美，該研究顯示，湖南、安徽及湖北白術(shù)揮發(fā)油含量與浙江差異不大，均在1%左右，在揮發(fā)油含量接近的湖南、浙江、湖北及安徽4個產(chǎn)區(qū)中，其中3個產(chǎn)區(qū)的油中蒼術(shù)酮相對百分含量均較浙江高，試驗結(jié)果與資料報道基本相符。

白術(shù)主要藥效成分為蒼術(shù)酮及白術(shù)內(nèi)酯類物質(zhì)[7]，試驗數(shù)據(jù)顯示蒼術(shù)酮在各產(chǎn)區(qū)揮發(fā)油成分中的相對百分含量均最高，但均未檢出白術(shù)內(nèi)酯類物質(zhì)，與文獻(xiàn)報道相符[7，11]。蒼術(shù)酮為白術(shù)中特征性揮發(fā)成分，具有抗腫瘤、胃潰瘍及解毒利膽[7，12]、保護肺急性損傷[13]等藥效，共有成分α-香附烯酮具有抗痛經(jīng)的藥理作用[14]，共有成分β-芹子烯具有抗急性炎癥的作用[15]。該試驗對不同產(chǎn)區(qū)白術(shù)性狀、揮發(fā)油含量及其成分進(jìn)行分析，可為白術(shù)質(zhì)量評價提供一定參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：2015年版一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：103-104.

[2] 彭華勝，王德群.白術(shù)道地藥材的形成與變遷[J].中國中藥雜志，2004，29（12）：1133-1135.

[3] 楊舒婷，龔華棟，趙云鵬，等.產(chǎn)地與種源對白術(shù)藥材質(zhì)量的影響[J].中藥材，2013，36（6）：890-892.

[4] 畢雨潔，張敬，陳蘇菲，等.微乳液相色譜法同時測定白術(shù)中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅲ的含量[J].藥物分析雜志，2016，36（8）：1392-1398.

[5] 孫學(xué)，文紅梅，崔小兵，等.HPLC-PDA指紋圖譜結(jié)合UFLC-Q-TOF/MS定性鑒別評價不同產(chǎn)地白術(shù)藥材質(zhì)量[J].中草藥，2016，47（19）：3494-3501.

[6] 張兵，張麗娜，韓鵬軍，等.白術(shù)中3種內(nèi)酯成分的含量測定及指紋圖譜研究[J].天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2018，37（5）：411-415.

[7] 曾志，周育妹，沈妙婷，等.3個不同產(chǎn)地白術(shù)的揮發(fā)性化學(xué)成分比較[J].華南師范大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2015，47（5）：78-83.

[8] 王虹.白術(shù)揮發(fā)油的提取、氧化分解及抗腫瘤研究[D].太原：山西大學(xué)，2011.

[9] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：四部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：附錄203.

[10] 王惠清.中藥材產(chǎn)銷[M].成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，2007：103-106.

[11] 劉朋朋，劉永剛，張宏桂，等.安國產(chǎn)白術(shù)揮發(fā)油化學(xué)成分分析[J].人參研究，2011，23（4）：31-33.

[12] 耿瑋，梁巍，葉智斌，等.蒼術(shù)酮對結(jié)直腸癌細(xì)胞HT29凋亡的機制[J].中成藥，2018，40（4）：937-940.

[13] 陳天陽，劉廷亮，侯天祿，等.蒼術(shù)酮對急性肺損傷小鼠保護作用的研究[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2018，27（24）：2623-2626.

[14] 郭慧玲，董能峰，胡律江，等.基于成分敲出策略辨識四制香附抗痛經(jīng)的主要效應(yīng)成分[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2017，23（10）：34-38.

[15] 蒙麗麗，劉紅星.氣相色譜質(zhì)譜法分析芒果葉揮發(fā)油成分[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37（27）：12906-12907.