朱青

摘 要：核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑是昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑中最重要的一大類(lèi)，具有高度的寄主專(zhuān)一性，對(duì)非靶標(biāo)昆蟲(chóng)、高等動(dòng)物和環(huán)境安全，且極易在靶標(biāo)昆蟲(chóng)種群內(nèi)流行。因此，昆蟲(chóng)病毒在農(nóng)林害蟲(chóng)的生物防治中具有巨大發(fā)展?jié)摿Α?duì)核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑的專(zhuān)利申請(qǐng)趨勢(shì)、主要來(lái)源國(guó)家或地區(qū)申請(qǐng)量、主要技術(shù)主題、重要申請(qǐng)人進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析和整理。

關(guān)鍵詞：核型多角體;NPV;殺蟲(chóng);專(zhuān)利

文章編號(hào)：1004-7026（2019）20-0086-02 ? ? ? ? 中國(guó)圖書(shū)分類(lèi)號(hào)：S482.39? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

昆蟲(chóng)病毒是指以昆蟲(chóng)為宿主并對(duì)昆蟲(chóng)具有致病性的病毒[1]。病毒的生理結(jié)構(gòu)決定其必須利用宿主細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制，同時(shí)病毒往往會(huì)反過(guò)來(lái)影響宿主，利用這一特點(diǎn)可將昆蟲(chóng)病毒開(kāi)發(fā)為殺蟲(chóng)劑。中國(guó)的病毒制劑產(chǎn)量?jī)H占農(nóng)藥生產(chǎn)總量的0.2%[2]。我國(guó)地域遼闊，有十分豐富的昆蟲(chóng)病毒資源，為我國(guó)昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑產(chǎn)業(yè)的發(fā)展提供了十分有利的條件。針對(duì)昆蟲(chóng)病毒特別是最常見(jiàn)的核型多角體病毒的研究，可以滿(mǎn)足化學(xué)農(nóng)藥殺蟲(chóng)劑市場(chǎng)更新?lián)Q代的需要，還可逐步在該領(lǐng)域形成中國(guó)特色產(chǎn)品并走向國(guó)際市場(chǎng)。采用的專(zhuān)利文獻(xiàn)數(shù)據(jù)來(lái)自外文數(shù)據(jù)庫(kù)VEN以及中國(guó)專(zhuān)利文摘數(shù)據(jù)庫(kù)CNABS，利用中英文關(guān)鍵詞結(jié)合分類(lèi)號(hào)進(jìn)行檢索，獲取初步檢索結(jié)果后進(jìn)行人工去噪，檢索日期截至2018年4月11日。

1全球?qū)＠暾?qǐng)趨勢(shì)分析

全球范圍內(nèi)已公開(kāi)的涉及核型多角體病毒作為殺蟲(chóng)劑應(yīng)用的專(zhuān)利申請(qǐng)量為197件，其中國(guó)內(nèi)申請(qǐng)為116件，國(guó)外申請(qǐng)為81件。圖1顯示了全球范圍內(nèi)涉及核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑的專(zhuān)利申請(qǐng)量年代分布。從圖中可以看出，全球申請(qǐng)量、中國(guó)申請(qǐng)量、外國(guó)申請(qǐng)量整體均分為上升階段、有所下降、再次迅速上升3個(gè)階段。

產(chǎn)生這一變化的原因如下。在初始階段，由于受實(shí)驗(yàn)儀器的限制，對(duì)核型多角體病毒的研究還處于實(shí)驗(yàn)摸索和經(jīng)驗(yàn)積累的階段，申請(qǐng)量表現(xiàn)為增長(zhǎng)。在第二階段，由于核型多角體病毒殺蟲(chóng)譜窄、見(jiàn)效慢、易受紫外線(xiàn)的影響而失活，難以大規(guī)模生產(chǎn)，其殺蟲(chóng)效率、使用范圍遠(yuǎn)低于化學(xué)殺蟲(chóng)劑，因而針對(duì)核型多角體病毒的研究和使用受到了一定的限制，申請(qǐng)量有所下降。近年來(lái)，隨著科技的發(fā)展，人們對(duì)昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)機(jī)理的研究更加深入，同時(shí)發(fā)現(xiàn)了多種昆蟲(chóng)病毒增效的途徑，因而申請(qǐng)量又快速上升。

2主要來(lái)源國(guó)家或地區(qū)的專(zhuān)利申請(qǐng)量

在世界范圍內(nèi)，涉及核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑專(zhuān)利申請(qǐng)最多的國(guó)家或地區(qū)為中國(guó)，占全球申請(qǐng)總量的59%。美國(guó)和歐洲的專(zhuān)利申請(qǐng)量較為相近，分別占全球申請(qǐng)總量的14%和13%。日本和韓國(guó)的申請(qǐng)量分別占全球申請(qǐng)總量的5%和1%，其他國(guó)家或地區(qū)的專(zhuān)利申請(qǐng)量占8%。

雖然中國(guó)在專(zhuān)利申請(qǐng)數(shù)量上占據(jù)絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，但是需要注意的是，中國(guó)的核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑相關(guān)專(zhuān)利多在產(chǎn)品復(fù)配、組合物、劑型等方面，授權(quán)率并不高。而美國(guó)、歐洲的相關(guān)申請(qǐng)多利用基因重組等分子生物學(xué)手段來(lái)增強(qiáng)其殺蟲(chóng)效果。因此，我國(guó)相關(guān)專(zhuān)利的申請(qǐng)質(zhì)量有待提高。

3核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑專(zhuān)利主要技術(shù)主題分析

從圖2可以看出，在世界范圍內(nèi)，核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑相關(guān)專(zhuān)利涉及的主要技術(shù)主題中，與復(fù)配相關(guān)的專(zhuān)利所占的比例最大，其次是通過(guò)分子生物學(xué)的手段對(duì)病毒的核酸或者病毒結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，對(duì)病毒的生產(chǎn)方法和應(yīng)用也有所涉及。此外，還包括核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑種類(lèi)的新發(fā)現(xiàn)、應(yīng)用和病毒檢測(cè)方法等方面（若同一個(gè)申請(qǐng)中涉及多個(gè)技術(shù)主題，則分別歸入相應(yīng)的技術(shù)主題分類(lèi)）。

對(duì)于不同的技術(shù)主題，國(guó)內(nèi)申請(qǐng)和國(guó)外申請(qǐng)的分布也有所不同。國(guó)內(nèi)申請(qǐng)大部分涉及核型多角體病毒與其他殺蟲(chóng)成分或增效劑組合使用的組合物，而國(guó)外申請(qǐng)中病毒改造和復(fù)配這兩個(gè)技術(shù)主題的申請(qǐng)量較為接近。病毒改造和復(fù)配是常見(jiàn)的兩種提高病毒毒力和殺蟲(chóng)譜的方法，但是前者的研究難度更大，后者相對(duì)簡(jiǎn)單。

生產(chǎn)方法主要包括用幼蟲(chóng)宿主進(jìn)行培養(yǎng)及用昆蟲(chóng)細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)兩種方法，此外還包括飼喂幼蟲(chóng)的飼料、昆蟲(chóng)細(xì)胞系的改進(jìn)等。在制劑方面，國(guó)內(nèi)申請(qǐng)主要涉及常規(guī)劑型，例如懸浮劑、水乳劑、種子處理劑等，國(guó)外申請(qǐng)主要對(duì)核型多角體病毒進(jìn)行包膜，以防止紫外線(xiàn)對(duì)其造成傷害。

4專(zhuān)利申請(qǐng)人分析

核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑專(zhuān)利的申請(qǐng)人大部分為研究所、高校和規(guī)模較大的公司，個(gè)人申請(qǐng)所占比例非常小，同時(shí)個(gè)人申請(qǐng)所涉及的技術(shù)方案也是較為簡(jiǎn)單的組合物。

這可能是由于對(duì)昆蟲(chóng)病毒的研究和生產(chǎn)需要專(zhuān)業(yè)的設(shè)施和技術(shù)人員，而小型企業(yè)和個(gè)人難以承擔(dān)較高的投入，也不具備專(zhuān)業(yè)的知識(shí)和能力。

5核型多角體昆蟲(chóng)病毒的主要技術(shù)主題研究現(xiàn)狀

5.1 新核型多角體昆蟲(chóng)病毒品種的發(fā)現(xiàn)

武漢普洛森生物制劑有限公司公開(kāi)發(fā)了一種甜菜夜蛾核多角體病毒及其生物殺蟲(chóng)劑，是一種從前未分離和鑒定過(guò)的昆蟲(chóng)致病性病毒毒株，能有效防治甜菜夜蛾、苜蓿丫紋夜蛾等害蟲(chóng)，并具有專(zhuān)一性強(qiáng)、不產(chǎn)生抗性和不污染環(huán)境的特點(diǎn)（CN1346886A）。

5.2生產(chǎn)方法

中山大學(xué)利用保幼激素類(lèi)似物ZR-515（Methoprene）處理甜菜夜蛾幼蟲(chóng)，同時(shí)進(jìn)行病毒感染。昆蟲(chóng)保幼激素類(lèi)似物能有效提高病毒的感染死亡率和顯著促進(jìn)昆蟲(chóng)桿狀病毒在蟲(chóng)體內(nèi)的增殖，提高病毒產(chǎn)量，是實(shí)現(xiàn)低成本、高效增殖昆蟲(chóng)桿狀病毒以用作殺蟲(chóng)劑的新途徑（CN 1403573A）。河南大學(xué)發(fā)現(xiàn)飼喂棉鈴蟲(chóng)C型凝集素dsRNA（Ha-lectin1dsRNA）可以增強(qiáng)核型多角體病毒防治棉鈴蟲(chóng)的效果。此方法殺蟲(chóng)效率高，用量少，可大大降低核型多角體病毒的使用量，與現(xiàn)有單純使用核型多角體病毒防治棉鈴蟲(chóng)相比具有較為顯著的改進(jìn)（CN103814950A）。

5.3制劑

中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所發(fā)明了一種殺蟲(chóng)劑及制備方法，包括200億PIB/g美國(guó)白蛾核型多角體病毒母藥、昆蟲(chóng)源氨基酸、酪氨酸、色氨酸、熒光增白粉、木質(zhì)素磺酸鈉、滅幼脲、黃原膠、油菜籽油、烷基多糖苷和水。昆蟲(chóng)源氨基酸和短肽作為昆蟲(chóng)病毒保護(hù)劑加入昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑制劑中，可提高病毒的光保護(hù)能力，解決昆蟲(chóng)病毒對(duì)紫外光敏感的問(wèn)題，使病毒制劑貨架壽命達(dá)到2年（CN107711894A）。

5.4增效復(fù)配

NPV與蘇云金桿菌都是經(jīng)口感染的昆蟲(chóng)病原微生物，中腸是兩者作用的共同靶位[3]，因此NPV與蘇云金桿菌混用通常具有明顯的增效作用。武漢武大綠洲生物技術(shù)有限公司發(fā)明了一種茶尺蠖核型多角體病毒蘇云金桿菌殺蟲(chóng)懸浮劑，對(duì)環(huán)境生物、人畜無(wú)害，無(wú)環(huán)境污染，無(wú)殘留，能有效控制茶尺蠖的發(fā)生和危害，適合在茶樹(shù)上大量施用。這種藥劑可加快病毒殺蟲(chóng)速度，使病毒殺蟲(chóng)劑的殺蟲(chóng)時(shí)間縮短到3～5 d（CN101366395A）。

江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院將蛇床子素作為昆蟲(chóng)病毒增效劑，蛇床子素單獨(dú)使用時(shí)對(duì)斜紋夜蛾、甜菜夜蛾、甘藍(lán)夜蛾等夜蛾類(lèi)害蟲(chóng)無(wú)殺蟲(chóng)活性，但作為昆蟲(chóng)病毒的增效劑，與昆蟲(chóng)核型多角體病毒（AcNPV、SlNPV、MbNPV等）聯(lián)合使用，可顯著提高昆蟲(chóng)病毒對(duì)害蟲(chóng)的侵染毒力，兼有安全、高效、經(jīng)濟(jì)等突出優(yōu)點(diǎn)，具有廣闊的應(yīng)用前景（CN1212766A）。

6總結(jié)與展望

昆蟲(chóng)核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑作為生物殺蟲(chóng)劑，除了具有對(duì)天敵安全、不污染環(huán)境和不易產(chǎn)生抗藥性等生物農(nóng)藥普遍存在的優(yōu)點(diǎn)外，更因其能在害蟲(chóng)種群中形成流行病而長(zhǎng)期控制蟲(chóng)口這一明顯優(yōu)于其他殺蟲(chóng)劑的特點(diǎn)，受到人們的廣泛關(guān)注[4]。

我國(guó)的相關(guān)研究在國(guó)際上處于比較先進(jìn)的水平，但核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑相關(guān)研究的深度和廣度還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，創(chuàng)新性和原創(chuàng)性的研究太少。如何使核型多角體病毒殺蟲(chóng)劑擴(kuò)展作用譜、增強(qiáng)毒力具有十分重要的研究?jī)r(jià)值，采用病毒增效因子和基因工程技術(shù)改造病毒是主要技術(shù)手段。

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