祖珊珊 劉曉梅 王優(yōu)良

【摘 要】目的：研究與分析乳腺癌EGFL7及β-catenin蛋白檢測的臨床意義。方法：選取在2017年12月至2018年12月來本院進(jìn)行病理檢測的良性乳腺疾病患者136例以及乳腺癌組織156例，在這156例患者乳腺癌組織中，分別采取ELIS法和EnVision二步法來對患者血清中的EGFL7及組織中的β-catenin蛋白水平進(jìn)行檢測。結(jié)果：良性乳腺疾病患者以及乳腺癌組織中的EGFL7和β-catenin蛋白表達(dá)水平對比，良性乳腺疾病患者顯著低于乳腺癌組織中，數(shù)據(jù)對比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：對于評估乳腺癌轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)而言，檢測EGFL7及β-catenin蛋白具有較高的參考價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】EGFL7;乳腺癌;β-catenin

文章編號：WHR2019021202

隨著我國社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們的生活習(xí)慣以及飲食習(xí)慣有了顯著的改變，這些不健康的習(xí)慣導(dǎo)致了人們患有惡性腫瘤的概率大大增加[1]。乳腺癌是臨床上最為常見的惡性腫瘤疾病之一，根據(jù)大量數(shù)據(jù)顯示，我國乳腺癌疾病的發(fā)生率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢，已經(jīng)成為危害女性身心健康的主要疾病之一。EGFL7是一類血管內(nèi)皮特異性表達(dá)的基因，該類基因是一類分泌蛋白。β-catenin基因是一類Wnt信號通道的下游基因，該基因存在于細(xì)胞漿以及細(xì)胞膜上，可以參與腫瘤的發(fā)生以及進(jìn)展等過程。本文研究與分析乳腺癌EGFL7及β-catenin蛋白檢測的臨床意義，以期為臨床診斷乳腺癌疾病提供科學(xué)依據(jù)?，F(xiàn)將具體的檢測方法以及檢測結(jié)果等情況總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在2017年12月至2018年12月來本院進(jìn)行病理檢測的良性乳腺疾病患者136例以及乳腺癌組織156例，在這156例患者乳腺癌組織中，有103例為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病例，有53例為遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移病例。選取組織的患者年齡為29～68歲，平均年齡為（43.14±7.09）歲;在156例乳腺癌患者中，Ⅰ期患者有26例，Ⅱ期患者有69例，Ⅲ期患者有49例，IV期患者有12例。本次研究通過道德倫理委員的批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學(xué)法 首先預(yù)試驗(yàn)，一抗EGFL7最佳濃度為1∶300，而β-catenin最佳濃度為1∶200;使用梯度酒精水化以及二甲苯脫臘等試劑進(jìn)行組織切片;高溫高壓抗原熱修復(fù)，采取EDTA抗原修復(fù)液修復(fù)2.5min;使用3%過氧化氫去離子阻斷內(nèi)源性過氧化物酶;滴加一抗，同時(shí)使用PBS洗滌3min，需要洗滌3次，滴加二抗，孵育30min;對組織進(jìn)行顯色，同時(shí)進(jìn)行脫水，蘇木精進(jìn)行襯染，二甲苯進(jìn)行透明，中性樹膠進(jìn)行封片等處理;

1.2.2 血清 EGFL7 ELISA 檢測 需要收集5mL的空腹外周靜脈全血，震蕩完畢后促凝劑混合，放置4℃的冰箱內(nèi)，將血清以及紅細(xì)胞分離10min;加樣，在每個(gè)設(shè)置的孔內(nèi)加入100μL的標(biāo)準(zhǔn)品以及待測樣本，將貼膜輕輕蓋上，在室溫下溫育30min;將孔內(nèi)液體棄去，沖洗包被板3次;在每個(gè)孔內(nèi)加入100μL的辣根過氧化物酶標(biāo)志物工作液;將吸除孔內(nèi)的液體進(jìn)行甩干，同時(shí)沖洗包被板5次，注意每次加入洗滌液200μL，浸泡3min，將洗滌液甩凈;每孔內(nèi)加入90μL的底物溶液，隨后將其放置于溫度為37℃下進(jìn)行避光顯色處理，時(shí)間為15min;在每孔內(nèi)加入50μL反應(yīng)終止液，隨后使用分光光度儀來對各孔的吸光度值進(jìn)行測定，測定時(shí)間為5～10min。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)科學(xué)處理

將相關(guān)數(shù)據(jù)記錄于統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0中進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)科學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料以率表示，以卡方檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

良性乳腺疾病與乳腺癌患者的EGFL7蛋白表達(dá)水平對比差異顯著，前者顯著低于后者，數(shù)據(jù)對比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。且乳腺良性病變與乳腺癌患者的β-catenin蛋白表達(dá)水平對比差異顯著，前者顯著低于后者，數(shù)據(jù)對比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移乳腺癌與無淋巴轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者的β-catenin蛋白以及EGFL7蛋白水平表達(dá)水平差異顯著，前者顯著高于后者，數(shù)據(jù)對比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。具體的情況見表1。

3 討論

根據(jù)大量數(shù)據(jù)顯示，乳腺癌疾病的發(fā)病率逐年上升，且呈現(xiàn)年輕化趨勢，已經(jīng)成為威脅婦女身心健康的主要疾病之一。在2003年發(fā)現(xiàn)的血管內(nèi)皮特異性表達(dá)的基因EGFL7，是一種分泌蛋白，與患者機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞間黏附作用的調(diào)節(jié)有著密切的關(guān)系，而β-catenin基因是一種下游基因，該類基因主要存在于細(xì)胞漿以及細(xì)胞膜，主要參與腫瘤的發(fā)展等過程[2-3]。

本文研究與分析乳腺癌EGFL7及β-catenin蛋白檢測的臨床意義，結(jié)果顯示良性乳腺疾病與乳腺癌患者的EGFL7蛋白表達(dá)水平差異顯著，前者顯著低于后者，數(shù)據(jù)對比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。且乳腺良性病變與乳腺癌患者的β-catenin蛋白表達(dá)水平對比差異顯著，前者顯著低于后者，數(shù)據(jù)對比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移乳腺癌組織與無淋巴轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織中的β-catenin蛋白以及EGFL7蛋白水平表達(dá)水平差異顯著，前者顯著高于后者，數(shù)據(jù)對比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這些結(jié)果表明，在乳腺癌病變組織與血清中，EGFL7蛋白以及β-catenin蛋白的表達(dá)水平較高，且具有轉(zhuǎn)移性，究其原因，EGFR-AKT-Snail信號通路可以被EGFL7所激活，對胃癌細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化進(jìn)行有效調(diào)控，可以促進(jìn)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移以及侵襲，而在此過程中，β-catenin蛋白與其具有協(xié)同作用。

綜上所述，對于評估乳腺癌轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)而言，檢測EGFL7及β-catenin蛋白具有較高的參考價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1] 姜青明，周文文，肖覺.乳腺癌EGFL7及β-catenin蛋白檢測的臨床意義[J].臨床與病理雜志，2018，38（03）：472-479.

[2] 姜青明，周文文，李光新.miR-126靶向EGFL7抑制乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化[J].臨床與病理雜志，2018，38（10）：10-17.

[3] 季曉輝.Wnt5a和β-catenin在乳腺癌中的表達(dá)及其臨床意義[J].醫(yī)學(xué)與哲學(xué)（B），2018，39（05）：48-50.