趙小平，代興勇

（1.重慶工貿(mào)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，重慶 408000；2.重慶市豐都縣畜牧局，重慶 408200）

豆科植物作為一種日糧蛋白來(lái)源重新引起人們的興趣，這是因?yàn)槎蛊傻纳a(chǎn)基于轉(zhuǎn)基因種子，而全世界80% 以上的大豆都是轉(zhuǎn)基因的（James，2014）。轉(zhuǎn)基因生物污染的高風(fēng)險(xiǎn)阻礙了豆粕在有機(jī)畜禽生產(chǎn)系統(tǒng)中的應(yīng)用，此外另一個(gè)重要的考慮因素是為谷物豆類(lèi)生產(chǎn)提供了多種環(huán)境效益，包括對(duì)土壤特性的有益影響和減少病蟲(chóng)害。羽扇豆的粗蛋白質(zhì)含量與豆粕相當(dāng)，幾乎是豌豆和蠶豆的兩倍（林建和等，2009）。早期研究結(jié)果表明，限制羽扇豆添加水平的主要因素是非淀粉多糖含量較高（Orda 等，2006），其可以降低飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。Hammershoj 和Steenfeldt（2005）認(rèn)為，蛋雞日糧中羽扇豆添加水平不應(yīng)超過(guò)100 ～200 g/kg。本研究的目的是確定33 ～48周齡蛋雞日糧中羽扇豆的適宜添加水平，并研究其對(duì)胃腸道功能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與日糧設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選擇32 周齡羅曼褐殼蛋雞1344 只，隨機(jī)分為4 組，每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)56 只。對(duì)照組飼喂豆粕型日糧，試驗(yàn)組在日糧中分別添加10%、20%、30% 羽扇豆，試驗(yàn)共開(kāi)展16 周。羽扇豆與豆粕營(yíng)養(yǎng)分析值見(jiàn)表1，日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。

表1 羽扇豆與豆粕養(yǎng)分對(duì)比

1.2 試驗(yàn)記錄與樣品采集 在試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)對(duì)蛋雞進(jìn)行稱重。試驗(yàn)期間統(tǒng)計(jì)每個(gè)重復(fù)蛋雞的產(chǎn)蛋量、蛋重和飼料消耗量，以此計(jì)算蛋雞的平均日采食、產(chǎn)蛋率、產(chǎn)蛋總重、料蛋比和體重變化。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每組隨機(jī)選擇12 只雞頸椎脫位處死，取下消化道腸段（小腸和盲腸），用水沖洗，在濾紙上吸干，稱重。用pH 計(jì)測(cè)定腸段和內(nèi)容物pH，小腸和盲腸內(nèi)容物用于分析干物質(zhì)、氨、黏度和短鏈脂肪酸。另外一部分盲腸內(nèi)容轉(zhuǎn)移到無(wú)菌試管中-70℃存儲(chǔ)，同時(shí)對(duì)空腸和盲腸進(jìn)行組織學(xué)分析。參考Hofirek 和Haas（2001）的研究方法，分析腸道內(nèi)容物黏度、脂肪酸含量及消化酶活性。此外，每個(gè)重復(fù)選擇6 只蛋雞翅下靜脈采血后分離血清，用試劑盒測(cè)定血清葡萄糖、總蛋白、甘油三酯、膽固醇、氨、鈣和磷含量及谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和堿性磷酸酶（AKP）活性。

表2 不同水平羽扇豆日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，用SPSS 12 版通用線性模型進(jìn)行方差分析，用Levene 檢驗(yàn)?zāi)Ｐ偷恼龖B(tài)性假設(shè)和方差齊性假設(shè)。采用線性多項(xiàng)式和二次多項(xiàng)式的對(duì)比來(lái)評(píng)價(jià)試驗(yàn)日糧中羽扇豆水平的影響，P ＜ 0.05 表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)生產(chǎn)性能的影響 如表1 所示，羽扇豆含有適量的粗蛋白質(zhì)（390 g/kg），但相對(duì)較低的賴氨酸、蛋氨酸和高水平的精氨酸。羽扇豆的生物堿含量很低（270 mg/kg）。與豆粕相比，羽扇豆非淀粉多糖和棉子糖家族寡糖的含量較高。試驗(yàn)期間無(wú)雞只死亡和淘汰記錄。表3 結(jié)果顯示，對(duì)照組和30% 羽扇豆組對(duì)采食量和料蛋比的影響無(wú)顯著差異（P ＞0.05），但10% 和20% 羽扇豆組采食量和料蛋比較對(duì)照組顯著降低（P ＜0.05）。但整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中，飼喂羽扇豆日糧組的蛋雞體重增加5.8% ～7.6%，較對(duì)照組顯著提高2.2%（P＜0.05）。

表3 不同水平羽扇豆日糧對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 對(duì)絨毛形態(tài)的影響 由表4 可知，隨著日糧羽扇豆添加水平的升高，十二指腸黏膜厚度、隱窩深度和絨毛高度顯著線性升高（P ＜0.05），而空腸的黏膜厚度和隱窩深度隨羽扇豆添加水平表現(xiàn)為顯著二次曲線效應(yīng)（P ＜0.05），在10% 和20%羽扇豆組表現(xiàn)為最低。

2.3 對(duì)小腸和盲腸參數(shù)的影響 由表5 可知，日糧添加羽扇豆顯著降低了小腸及其內(nèi)容物相對(duì)重量（P ＜0.05）。各處理對(duì)小腸內(nèi)容物pH、黏度、盲腸組織和內(nèi)容物重量均無(wú)顯著影響（P ＞0.05）。隨著日糧羽扇豆添加水平的升高，盲腸內(nèi)容物干物質(zhì)含量顯著線性升高（P ＜0.05），而pH和氨含量顯著線性降低（P ＜0.05）。

表4 不同水平羽扇豆日糧對(duì)蛋雞腸道絨毛形態(tài)的影響

表5 不同水平羽扇豆日糧對(duì)蛋雞小腸和盲腸參數(shù)的影響

2.4 對(duì)盲腸內(nèi)容物消化酶活力的影響 由表6可知，日糧羽扇豆添加水平對(duì)盲腸內(nèi)容物消化酶（如α-糖苷酶、α-半乳糖酶、β-半乳糖酶、α-阿拉伯糖酶和β- 木聚糖酶）活力的影響表現(xiàn)為顯著線性升高（P ＜0.05），但對(duì)β-糖苷酶和β-糖醛酸酶活力無(wú)顯著影響（P ＞0.05）。

表6 不同水平羽扇豆日糧對(duì)蛋雞盲腸內(nèi)容物消化酶活力的影響 μmol/g

2.5 對(duì)小腸和盲腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸的影響 由表7 可知，各處理對(duì)小腸乙酸、丙酸、丁酸和短鏈脂肪酸總量無(wú)顯著影響（P ＞0.05）。隨著日糧羽扇豆添加水平的升高，小腸短鏈脂肪酸含量表現(xiàn)為顯著線性降低（P ＜0.05），而盲腸乙酸和丁酸含量表現(xiàn)為顯著升高（P ＜0.05）。

表7 不同水平羽扇豆日糧對(duì)蛋雞小腸和盲腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸的影響 μmol/g

2.6 對(duì)血液生化指標(biāo)的影響 由表8 可知，羽扇豆添加水平對(duì)大多數(shù)血液生化指標(biāo)和酶活力無(wú)顯著影響（P ＞0.05）。但隨著羽扇豆添加水平的升高，血清膽固醇含量表現(xiàn)為顯著線性降低（P＜0.05），其中10% 羽扇豆組最高。

3 討論

Smulikowska 等（2014）發(fā)現(xiàn)，日糧羽扇豆添加水平從150 g/kg 升高至250 g/kg 時(shí)空腸黏膜絨毛高度和隱窩深度以及飼料效率顯著降低，而高含量的羽扇豆（400 g/kg）對(duì)空腸黏膜未造成負(fù)面影響。在本研究中，蛋雞飼喂16 周的羽扇豆飼料顯著增加了十二指腸黏膜厚度、絨毛高度和隱窩深度，說(shuō)明腸道完整性得以維持。在家禽中，腸道對(duì)飼料的反應(yīng)可能導(dǎo)致腸道重量、腸道長(zhǎng)度和吸收表面積的變化，包括作為營(yíng)養(yǎng)吸收主要部位的腸絨毛高度（Bedford，2006）。在空腸中我們觀察到的效果不太明顯，僅限于10% 和20% 羽扇豆兩組雞的隱窩深度增加。

表8 不同水平羽扇豆日糧對(duì)蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

Olkowski 等（2005）研究發(fā)現(xiàn)，高水平羽扇豆組采食量和生長(zhǎng)速度降低，而Nalle 等（2011）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加200 g/kg 羽扇豆對(duì)肉仔雞組織重量或消化道內(nèi)容物重量無(wú)顯著影響，這與本試驗(yàn)在盲腸上得到的結(jié)果一致。但本研究中蛋雞日糧添加羽扇豆降低了小腸內(nèi)容物的重量，但對(duì)小腸內(nèi)容物干物質(zhì)含量、pH 和黏度無(wú)顯著影響。Smits 和Annison（1996）研究表明，高水平的羽扇豆會(huì)增加小腸滲透和消化黏度，并阻礙營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)通過(guò)腸壁的運(yùn)輸。本試驗(yàn)未觀察到腸道內(nèi)容物水化程度的增加，說(shuō)明羽扇豆對(duì)消化黏度無(wú)負(fù)影響。

Zdunczyk 等（2016）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加180和240 g/kg 羽扇豆提高了盲腸微生物糖酵解酶的活性，這與本試驗(yàn)結(jié)果一致。蛋雞盲腸中微生物糖酵解酶活性的增加是由于蛋雞飼料中非淀粉多糖和棉子糖家族寡糖的含量較高。盲腸β- 糖醛酸酶牽連后腸一系列的誘變劑和致癌物質(zhì)，被認(rèn)為是腸道微生物群不良的指標(biāo)變化，因?yàn)檫@種酶的活性增加提高了大腸桿菌和梭狀芽孢桿菌的繁殖（Beaud 等，2005）。腸道前段未消化的碳水化合物主要是寡糖，盲腸細(xì)菌發(fā)酵的主要產(chǎn)物主要為乙酸、丙酸和丁酸鹽。與小腸不同的是，飼喂羽扇豆日糧的蛋雞盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸的濃度較高，包括乙酸和丁酸，這也導(dǎo)致盲腸內(nèi)容物pH較低。但短鏈脂肪酸的產(chǎn)生和內(nèi)容物pH 的降低對(duì)腸道微生物群的組成具有有益影響，并有助于腸道健康（Teirlynck 等，2009）。此外，日糧添加羽扇豆對(duì)大多數(shù)血清生化指標(biāo)無(wú)顯著影響，但血清膽固醇水平隨羽扇豆添加水平的升高表現(xiàn)為線性降低，這與Krawczyk 等（2015）的研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

日糧羽扇豆添加水平高達(dá)300 g/kg 時(shí)對(duì)16周蛋雞胃腸道無(wú)負(fù)面影響。羽扇豆幾乎可以完全取代豆粕，可以降低蛋雞回腸短鏈脂肪酸濃度，提高盲腸短鏈脂肪酸濃度，降低氨水平。