李中央，田 甜，強(qiáng)煜云，王圣翔，趙寶玉＊，吳晨晨＊

(西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院/臨床獸醫(yī)系，陜西 楊陵 712100)

動(dòng)物疫情肆虐、豬場(chǎng)疫病頻發(fā)，不斷刺激著養(yǎng)豬人的神經(jīng)，人們不禁產(chǎn)生疑問(wèn)：為什么豬群的免疫力如此脆弱？為什么使用優(yōu)質(zhì)疫苗免疫應(yīng)答后水平參差不齊？這一系列的疫情頻繁發(fā)生主要是因?yàn)槎鄶?shù)豬群處于亞健康狀態(tài)（介于健康與發(fā)病之間的一種狀態(tài)），動(dòng)物的免疫系統(tǒng)受到抑制。當(dāng)受到外界病原的攻擊時(shí)，隨時(shí)有爆發(fā)疾病的風(fēng)險(xiǎn)。最近研究發(fā)現(xiàn)，引起豬群亞健康狀態(tài)的主要原因之一為內(nèi)毒素蓄積。內(nèi)毒素又稱脂多糖（LPS），是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的組成成分，在細(xì)菌生長(zhǎng)期、穩(wěn)定期以及細(xì)菌死亡崩解時(shí)會(huì)被釋放出來(lái)。內(nèi)毒素耐熱且穩(wěn)定，其化學(xué)本質(zhì)不是蛋白質(zhì)，即便在100 ℃下加熱1 h 也不會(huì)被破壞，只有在160 ℃ 或更高的溫度下加熱2 ～4 h，或用強(qiáng)堿、強(qiáng)酸、強(qiáng)氧化劑加熱煮沸30 min 才能破壞它的生物活性[1-2]。規(guī)?；i場(chǎng)的內(nèi)毒素來(lái)源廣泛，其主要來(lái)源為：圈舍空氣中的內(nèi)毒素、對(duì)豬只抗生素大量使用和飼料中的內(nèi)毒素[2]。豬只通過(guò)呼吸道和消化道長(zhǎng)期攝入大量?jī)?nèi)毒素，長(zhǎng)此以往，內(nèi)毒素蓄積于動(dòng)物體內(nèi)細(xì)菌最大的儲(chǔ)存庫(kù)—腸道。當(dāng)蓄積的內(nèi)毒素破壞腸道黏膜的免疫屏障進(jìn)入血液后，就會(huì)使機(jī)體的免疫功能發(fā)生紊亂?；诖?，本研究選取兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)，分別為生物安全較好的豬場(chǎng)（豬場(chǎng)-I）和生物安全較差的豬場(chǎng)（豬場(chǎng)-II），收集兩豬場(chǎng)各個(gè)生長(zhǎng)階段的豬群血液，檢測(cè)血液中內(nèi)毒素和炎性因子水平，分析內(nèi)毒素與炎性因子對(duì)豬群的影響，旨在為解決豬群亞健康狀態(tài)所表現(xiàn)的免疫力低下，呈現(xiàn)的免疫抑制狀態(tài)提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 樣品的收集

我們選取了陜西省楊凌周邊的2 個(gè)大型規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)。其中一個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)（豬場(chǎng)-I）嚴(yán)格執(zhí)行生物安全制度，該豬場(chǎng)對(duì)場(chǎng)內(nèi)運(yùn)豬、運(yùn)糞車輛出入生產(chǎn)區(qū)、隔離舍、出豬臺(tái)都要徹底消毒；更衣室、工作服、生活區(qū)辦公室、食堂、宿舍、公共場(chǎng)所和周圍環(huán)境每月消毒一次；員工休假回場(chǎng)必須隔離一天兩夜后方可進(jìn)入生活區(qū)；每周至少一次對(duì)豬舍和豬群進(jìn)行常規(guī)消毒，豬舍、豬群帶豬消毒提倡細(xì)化噴霧消毒與熏蒸消毒；一個(gè)季度至少進(jìn)行一次藥物滅鼠，定期滅蠅和滅蚊；每次出豬后，對(duì)出豬臺(tái)都要進(jìn)行重點(diǎn)消毒。另一個(gè)豬場(chǎng)我們選擇沒(méi)有按照生物安全制度嚴(yán)格執(zhí)行的規(guī)?；i場(chǎng)（豬場(chǎng)-II）。2 個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)都常規(guī)接種豬瘟、豬偽狂犬病、豬藍(lán)耳病和豬口蹄疫疫苗。

隨機(jī)選取兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)各個(gè)生長(zhǎng)階段（5～8頭）的新生仔豬、10日齡仔豬、3周齡仔豬、7周齡保育豬、11周齡育成豬、15周齡育成豬、19周齡育成豬、23周齡育成豬、27周齡后備種豬、30周齡后備種豬、0胎次母豬、1～2胎次母豬和3～4胎次母豬。收集每個(gè)生長(zhǎng)階段豬只前腔靜脈血10 mL，肝素鈉抗凝，3 000 r/min 分離血漿10 min，-20 ℃保存待檢。

1.2 檢測(cè)方法

分離2 個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)各個(gè)生長(zhǎng)階段豬只血漿，應(yīng)用E L I S A方法檢測(cè)，具體操作步驟詳見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū)。本試驗(yàn)主要檢測(cè)因子包括：豬分泌性免疫球蛋白A（sIgA）﹝ELISA試劑盒（1190708PA45）〕、豬超敏C反應(yīng)蛋白（h s-CR P）﹝E L I S A試劑盒（11 9 0 7 0 8 PA 4 6）〕、豬白介素1（IL-1）﹝ELISA試劑盒（11 9 0 7 0 8 PA 4 7）〕、豬白介素4 （IL-4）﹝ELISA試劑盒（1190708PA48）〕、豬白介素10（IL-10）﹝ELISA試劑盒（1190708PA49）〕、豬腫瘤壞死因子α（TNF-α）﹝ELISA試劑盒（1190708 PA50）〕，以上試劑盒均購(gòu)于上海酶聯(lián)試劑有限公司。

1.3 ELISA 檢測(cè)步驟

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋

150 μL 的 原 倍 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入150 μL 的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液作為5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品（400 ng/L）；150 μL 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150 μL 的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液作為4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品（200 ng/L）；150 μL的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150 μL 的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液作為3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品（100 ng/L）；150 μL 的3 號(hào) 標(biāo) 準(zhǔn) 品 加 入150 μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液作為2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品（50 ng/L）；150 μL 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150 μL 的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液作為1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品（25 ng/L）。

1.3.2 加樣

分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品和酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50 μL，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40 μL，然后再加待測(cè)樣品10 μL（樣品最終稀釋度為5 倍），加樣將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕搖動(dòng)混勻。

1.3.3 溫育

用封板膜封板后置37 ℃溫育

30 min。

1.3.4 配液

將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用。

1.3.5 洗滌

小心揭掉封板膜，棄去液體、甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 s后棄去。如此重復(fù)5 次，拍干。

1.3.6 加酶

每孔加入酶標(biāo)試劑50 μL，空白孔除外。

1.3.7 溫育

用封板膜封板后置37 ℃溫育

30 min。

1.3.8 洗滌

小心揭掉封板膜，棄去液體、甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 s后棄去。如此重復(fù)5 次，拍干。

1.3.9 顯色

每孔先加入顯色劑A 50 μL，再加入顯色劑B 50 μL 輕輕震蕩混勻，37 ℃避光顯色10 min。

1.3.10 終止

每孔加終止液50 μL，停止反應(yīng)，（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

1.3.11 測(cè)定

以空白孔調(diào)零，在450 nm 波長(zhǎng)下依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值），測(cè)定在加終止液后15 min 內(nèi)進(jìn)行。

1.3.12 計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值帶入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示試驗(yàn)數(shù)據(jù)。使用SPSS 13.0 (SPSS，Chicago，IL，USA) 來(lái) 進(jìn) 行 分 析，包含2 個(gè)相關(guān)樣本分析。結(jié)果中，概率(P)值低于0.05 可認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表示為 * P＜0.05，對(duì)豬場(chǎng)-I 與豬場(chǎng)-II 同一生長(zhǎng)階段豬群進(jìn)行對(duì)比。

2 結(jié)果

2.1 兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)各個(gè)生理階段豬群血液內(nèi)毒素水平的變化規(guī)律

豬場(chǎng)-II 各個(gè)生理階段豬群血液中內(nèi)毒素的含量均顯著高于豬場(chǎng)-I 的豬群（P＜0.05）。在豬場(chǎng)-II，隨著飼養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，豬只體內(nèi)蓄積的內(nèi)毒素量也呈現(xiàn)上升趨勢(shì)；在豬場(chǎng)-I，隨著飼養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，豬只體內(nèi)蓄積的內(nèi)毒素量一直趨于平穩(wěn)狀態(tài)，變化幅度較小。同時(shí)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)0 胎次母豬血液內(nèi)毒素的水平達(dá)到最高，隨著胎次和泌乳數(shù)量的增多，母豬血液內(nèi)毒素的含量逐漸下降，但豬場(chǎng)-II 新生仔豬血液內(nèi)毒素的含量顯著高于豬場(chǎng)-I 的新生仔豬（P＜0.05）（圖1）。說(shuō)明嚴(yán)格執(zhí)行生物安全體系可以凈化豬只體內(nèi)的內(nèi)毒素含量，并不隨著飼養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而使其體內(nèi)內(nèi)毒素的含量增加，同時(shí)發(fā)現(xiàn)母豬體內(nèi)的內(nèi)毒素可以穿透胎盤屏障和乳汁傳遞給新生仔豬。

2.2 兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)各個(gè)生理階段豬群血液sIgA 水平的變化規(guī)律

圖2 所示，豬場(chǎng)-I 各個(gè)生長(zhǎng)階段豬群血液sIgA 水平均高于豬場(chǎng)-II。其中豬場(chǎng)-I 中的3 周齡仔豬、7 周齡仔豬、11 周育肥豬、15 周育肥豬和19 周育肥豬血液sIgA 的含量顯著高于豬場(chǎng)-II 中的同期豬群（P＜0.05）；兩個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)育肥豬23 周齡后血液sIgA 的含量呈下降趨勢(shì)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)0胎次母豬血液sIgA 的含量隨著胎次和泌乳數(shù)量的增多逐漸下降。豬場(chǎng)-I 育成母豬體內(nèi)抗體水平較高，隨著日齡的增加豬只體內(nèi)抗體水平逐漸下降，但是豬場(chǎng)-I 各個(gè)生理階段豬群的免疫抗體水平優(yōu)于豬場(chǎng)-II的豬群。

2.3 兩個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)各個(gè)生理階段豬群血液超敏C 蛋白水平的變化規(guī)律

圖1 兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)各個(gè)生理階段豬群血液內(nèi)毒素水平的變化規(guī)律

圖2 兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)各個(gè)生理階段豬群血液sIgA 水平的變化規(guī)律

圖3 所示，豬場(chǎng)-II 各個(gè)生理階段豬群血液超敏C 蛋白水平均高于豬場(chǎng)-I，其中豬場(chǎng)-II 中的新生仔豬、10 日齡仔豬、11 周齡育肥豬、15 周齡育肥豬、19 周齡育肥豬、23周齡育肥豬、27 周齡育肥豬、30 周齡育肥豬、0 胎次母豬、1 ～2 胎次母豬和3 ～4 胎次母豬血液超敏C 蛋白的含量顯著高于豬場(chǎng)-I 豬群（P＜0.05）。豬場(chǎng)-I 中23 周齡育肥豬血液超敏C 蛋白含量達(dá)到最高，之后開(kāi)始下降，而豬場(chǎng)-II 中各個(gè)生長(zhǎng)階段的豬群血液超敏C 蛋白的含量一直處于較高狀態(tài)。兩個(gè)豬場(chǎng)的母豬隨著胎次和泌乳數(shù)量的增加，其血液超敏C 蛋白水平亦皆呈下降趨勢(shì)，而新生仔豬體內(nèi)超敏C 蛋白水平較高。說(shuō)明豬場(chǎng)-II 各個(gè)生長(zhǎng)階段豬群由于體內(nèi)蓄積內(nèi)毒素，引起豬只體內(nèi)超敏C 蛋白的水平增多。

2.4 兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)各個(gè)生理階段豬群血液炎性因子水平的變化規(guī)律

圖4 所示，IL-1 濃度：豬場(chǎng)-I中7 周齡仔豬、11 周齡育肥豬、19周齡育肥豬血液IL-1 濃度顯著高于豬場(chǎng)-II 豬群（P＜0.05）；豬場(chǎng)-II 中0 胎次母豬、1 ～2 胎次母豬和3 ～4 胎次母豬血液IL-1 濃度顯著高于豬場(chǎng)-I（P＜0.05）；其他各個(gè)生理階段，兩個(gè)豬場(chǎng)的豬只血液IL-1 濃度無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

IL-4 濃度：豬場(chǎng)-I 中新生仔豬、3 周齡仔豬、7 周齡仔豬、11周育肥豬、15 周齡育肥豬、23 周齡育肥豬血液IL-4 濃度顯著高于豬場(chǎng)-II 豬群（P＜0.05）；豬場(chǎng)-I 中30周齡后備豬和3 ～4 胎次母豬血液IL-4 濃度顯著低于豬場(chǎng)-II 的豬群（P＜0.05）；2 個(gè)豬場(chǎng)其他各個(gè)生理階段豬群血液IL-4 濃度無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

圖3 兩個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)各個(gè)生理階段豬群血液超敏C 蛋白水平的變化規(guī)律

TNF-ɑ 濃 度：豬 場(chǎng)-I 中10 日齡仔豬、7 周齡仔豬、11 周齡育肥豬、19 周齡育肥豬、23 周齡育肥豬、27 周齡后備豬和30 周齡后備豬血液TNF-ɑ 含量顯著高于豬場(chǎng)-II 豬群（P＜0.05）；2 個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)其他各個(gè)生理階段豬群血液TNF-ɑ 含量之間沒(méi)有顯著性差異（P＞0.05）。

IL-10 濃度：豬場(chǎng)-I 中新生仔豬、10 日齡仔豬和3 周齡仔豬血液IL-10 濃度顯著高于豬場(chǎng)-II 豬群（P＜0.05）；2 個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)其他各個(gè)生理階段豬群血液IL-10 濃度之間沒(méi)有顯著性差異（P＞0.05）。說(shuō)明豬場(chǎng)-II 豬群長(zhǎng)期大量的內(nèi)毒素蓄積可能對(duì)豬只血液中炎性因子水平具有顯著的抑制作用。

3 討論

豬只體內(nèi)內(nèi)毒素的凈化與其生存環(huán)境存在密切的聯(lián)系。豬場(chǎng)圈舍大量使用消毒劑致空氣中細(xì)菌被殺死而釋放出內(nèi)毒素，同時(shí)豬場(chǎng)濫用抗生素導(dǎo)致內(nèi)毒素在豬腸道內(nèi)大量蓄積，故豬只飼養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng)，腸道蓄積內(nèi)毒素的含量越多。內(nèi)毒素化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，常作為豬免疫神經(jīng)內(nèi)分泌相互作用的模型[6-8]，它不會(huì)直接危害細(xì)胞或器官，但可激活免疫系統(tǒng)，通過(guò)單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞起作用。細(xì)菌內(nèi)毒素還可以進(jìn)入機(jī)體的血液循環(huán)系統(tǒng)，對(duì)血液產(chǎn)生毒性作用，導(dǎo)致內(nèi)毒素血癥?；诖耍驹囼?yàn)選取嚴(yán)格執(zhí)行生物安全的豬場(chǎng)和執(zhí)行力較差的豬場(chǎng)進(jìn)行試驗(yàn)，實(shí)時(shí)跟蹤各個(gè)生長(zhǎng)階段豬群血液內(nèi)毒素的含量變化趨勢(shì)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)生物安全性能好的豬場(chǎng)豬群體內(nèi)內(nèi)毒素的含量明顯低于生物安全性能差的豬場(chǎng)。隨著產(chǎn)仔量和泌乳量的增加，多胎次母豬血液內(nèi)毒素含量逐漸減少。豬場(chǎng)-II 新生仔豬體內(nèi)內(nèi)毒素的含量均顯著高于豬場(chǎng)-I的新生仔豬。體內(nèi)大量?jī)?nèi)毒素蓄積的母豬產(chǎn)下的仔豬膚色較正常的淡紅色深一些，且腹股溝淋巴結(jié)發(fā)暗，排清水或灰黃色奶油狀稀便，持續(xù)兩三天后陸續(xù)出現(xiàn)嚴(yán)重的脫水消瘦現(xiàn)象，斷奶前死亡率接近100%。據(jù)此，我們推測(cè)生物安全性執(zhí)行力較差的豬場(chǎng)，母豬體內(nèi)蓄積的內(nèi)毒素較高，妊娠的母豬可以通過(guò)哺乳和產(chǎn)仔把內(nèi)毒素傳遞給新生仔豬，造成新生仔豬體內(nèi)含有大量的內(nèi)毒素，仔豬出現(xiàn)腹瀉和死亡的發(fā)病率顯著上升。

內(nèi)毒素主要積聚在豬的腸道內(nèi)，通過(guò)淋巴和血液循環(huán)進(jìn)入外周血，sIgA 在腸道黏膜免疫中起到關(guān)鍵作用。sIgA 作為腸黏膜上的主要免疫球蛋白，是腸道黏膜上的第一道防線，對(duì)各種外界入侵的病原體都有抵抗作用[9-11]。血液中部分活化的B 細(xì)胞可通過(guò)黏膜的淋巴管進(jìn)入血液循環(huán)，再經(jīng)過(guò)增殖分化，生成能夠分泌IgA 的漿細(xì)胞。該漿細(xì)胞首先在胞漿內(nèi)合成α 鏈和J 鏈，二者分泌到胞外瞬間聯(lián)結(jié)成帶J 鏈的IgA， 然后與上皮細(xì)胞表面的SC結(jié)合成sIgA，分泌到外分泌液中成為黏膜免疫的主要抗體。 本次研究中，豬場(chǎng)-II 豬群體內(nèi)內(nèi)毒素水平較高，但是其豬群血漿中sIgA 水平一直低于豬場(chǎng)-I，可見(jiàn)高內(nèi)毒素暴露與豬血液內(nèi)sIgA 水平呈負(fù)相關(guān)，血液sIgA 水平較低反映長(zhǎng)期內(nèi)毒素蓄積導(dǎo)致抗體免疫應(yīng)答性能降低。Iqbal 等人表明，長(zhǎng)期暴露于內(nèi)毒素下可能會(huì)加快黏膜上皮細(xì)胞將血液中的IgA 分子轉(zhuǎn)化為sIgA，并促進(jìn)sIgA 從血轉(zhuǎn)運(yùn)到黏膜外側(cè)[12]。

圖4 兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)各個(gè)生理階段豬群血液炎性因子水平的變化規(guī)律

內(nèi)毒素蓄積可引起發(fā)熱和炎癥反應(yīng)， 因此內(nèi)毒素被廣泛應(yīng)用于研究豬和其他物種促炎細(xì)胞因子和急性期反應(yīng)蛋白復(fù)雜機(jī)制的模型[13-14]。當(dāng)內(nèi)毒素進(jìn)入血液可釋放很多促炎性介導(dǎo)物，如細(xì)胞因子等。本試驗(yàn)首先分析了超敏C 蛋白，它是一種系統(tǒng)性炎癥急性期的非特異性標(biāo)記物，檢測(cè)結(jié)果表明內(nèi)毒素含量低的豬場(chǎng)-I 各個(gè)生長(zhǎng)階段豬群血液超敏感C 蛋白含量低；內(nèi)毒素含量高的豬場(chǎng)-II 豬群血液超敏感C 蛋白含量隨著飼養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)持續(xù)升高。該結(jié)果提示，高水平內(nèi)毒素可能會(huì)伴隨著急性炎癥的發(fā)生。因此，我們進(jìn)一步分析了兩個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)各個(gè)生理階段豬群血液內(nèi)炎性因子的水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)各炎癥因子并不會(huì)隨著內(nèi)毒素水平的升高而呈現(xiàn)出一致的規(guī)律。豬場(chǎng)-I 各個(gè)生理階段豬群血液中TNF-a 水平均高于豬場(chǎng)-2，且相同豬場(chǎng)不同周齡之間差異較大。有報(bào)道在豬體內(nèi)注射低劑量?jī)?nèi)毒素后，促炎細(xì)胞因子TNF-ɑ 的血漿濃度升高[15]；同時(shí)多項(xiàng)研究中報(bào)道對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物反復(fù)暴露內(nèi)毒素可能引起其內(nèi)毒素耐受，導(dǎo)致TNF-ɑ水平降低。本試驗(yàn)中豬場(chǎng)-II 由于豬體內(nèi)長(zhǎng)期暴露內(nèi)毒素，使其TNF-ɑ水平降低。炎性因子IL-1 可促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞間的抗原呈遞，誘導(dǎo)炎癥介質(zhì)的釋放，具有較強(qiáng)的制熱作用。豬場(chǎng)-II 豬體內(nèi)IL-1 水平在豬只生長(zhǎng)后期增高趨勢(shì)明顯，顯著高于豬場(chǎng)-I，這可能與豬體代謝水平有關(guān)，還需要進(jìn)一步研究。Th2細(xì)胞主要是通過(guò)分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10 及IL-13 等 細(xì) 胞因子促進(jìn)B 細(xì)胞的增殖、分化和抗體的生成，抑制Th1 細(xì)胞是IL-4 最重要的生物功能，這是Th1 細(xì)胞和Th2 細(xì)胞交叉調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)。Th2 細(xì)胞的主要作用是增強(qiáng)B 細(xì)胞的體液免疫應(yīng)答。而豬場(chǎng)-I 各個(gè)生理階段豬群IL-4 水平多高于豬場(chǎng)-II，兩豬場(chǎng)各生理階段豬群血液中IL-10 水平之間無(wú)顯著性差異。由此可證明豬場(chǎng)-II 豬只體內(nèi)內(nèi)毒素大量蓄積傾向于Th1 介導(dǎo)的免疫，而豬場(chǎng)-I 豬只體內(nèi)內(nèi)毒素含量較少傾向于Th2介導(dǎo)的免疫。這與另一項(xiàng)研究中提出的內(nèi)毒素暴露可促進(jìn)肉雞和肉牛體內(nèi)Th2 介導(dǎo)的免疫應(yīng)答一致[16]。這種結(jié)果可以解釋為，當(dāng)內(nèi)毒素濃度特別高和/或動(dòng)物長(zhǎng)期暴露于內(nèi)毒素時(shí)，密集飼養(yǎng)動(dòng)物的輔助T 細(xì)胞介導(dǎo)的免疫可能從Th2 向Th1 傾斜。因此，雖然在特異性皮炎的急性期Th2 反應(yīng)占主導(dǎo)地位，但慢性期的炎癥與Th1 介導(dǎo)免疫應(yīng)答上調(diào)有密切關(guān)系[17]。豬場(chǎng)-II 各個(gè)生理階段豬群炎性因子水平的降低我們推測(cè)是由于大量的內(nèi)毒素蓄積導(dǎo)致免疫細(xì)胞出現(xiàn)壞死，導(dǎo)致分泌炎性因子的水平降低，此方面的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

綜上所述，嚴(yán)格執(zhí)行生物安全的豬場(chǎng)可以凈化豬只體內(nèi)的內(nèi)毒素含量。生物安全性執(zhí)行較差的豬場(chǎng)隨著飼養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，豬群體內(nèi)內(nèi)毒素蓄積量越多，導(dǎo)致血液sIgA 含量會(huì)降低，炎性因子水平發(fā)生顯著的變化，免疫應(yīng)答性能降低，引起免疫功能抑制，豬群處于亞健康狀態(tài)，最后使其生產(chǎn)性能和防御功能降低。