宋俐君 倪 敏

小兒急性腹瀉是一種腸道傳染病，通常由糞口傳播，5歲以下的患兒易發(fā)。有資料顯示，在發(fā)展中國家，每年該病的發(fā)病人次超過15億人次，死亡的兒童約為200萬，占兒童死亡總數(shù)的19%，僅次于肺炎［1］。該病有著極為復雜的病因，常為病毒、細菌、寄生蟲等病原體導致。隨著生物學技術(shù)不斷進步，臨床上廣泛采用了ELISA酶聯(lián)免疫吸附和RT-PCR逆轉(zhuǎn)錄聚合酶聯(lián)反應進行檢驗，為患兒的診治奠定了基礎(chǔ)［2］。本研究選取200例符合研究條件的臨床資料，進行回顧性分析，探討不同年齡、性別小兒急性腹瀉常見病原微生物的分布情況，為臨床防治提供參考依據(jù)?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 從2016年1月～2018年1月本院兒科收治的小兒急性腹瀉患兒中選出200例（男107例，女93例），病程48～72（60.2±5.0）h，年齡2個月～5（2.3±0.3）歲；其中年齡 ＜1歲 58例（29%），1～2歲108例（54%），年齡3～5歲34例（17%）。

1.2納入與排除標準 納入標準：①入院時經(jīng)診斷均符合《小兒腹瀉病學》［3］的標準，臨床表現(xiàn)多伴發(fā)熱、腹瀉、嘔吐、大便為黃色或黃綠色，持續(xù)腹瀉時間在3 d以內(nèi)，稀水狀或黏液狀，未出現(xiàn)膿血的情況；②大便常規(guī)檢查顯示W(wǎng)BC不超過10個/HP；③年齡不超過5歲；排除標準：①大便少于3 ml；②患有先天性貧血及嚴重呼吸系統(tǒng)疾??；③依從性差；④有食物中毒情況或囊胞性纖維病的患兒。

1.3方法 200例患兒在入院以后均應用一次性吸管進行無菌操作取樣，采集患兒4～8 m l大便，確保在收集后2 h內(nèi)送檢。

1.3.1細菌分離、培養(yǎng)與鑒定 將采集標本接種于培養(yǎng)基上，根據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》培養(yǎng)，采用麥康凱瓊脂（南京便診生物科技有限公司提供）、氯霉素沙保弱葡萄糖培養(yǎng)基（南京普朗生物技術(shù)有限公司提供）、堿性蛋白沉水（上海撫生實業(yè)有限公司提供）、SS瓊脂和玉米吐溫80瓊脂平板（上海江萊生物科技有限公司提供）組成的培養(yǎng)基，進行革蘭陰性病原菌的分離培養(yǎng)。采用的試劑由北京千舜生物科技有限公司提供，結(jié)合血清學的診斷結(jié)果進行菌株的培養(yǎng)。采用玻璃珠柱凝集法鑒定（含沙門菌、志賀菌等微生物）。

1.3.2病毒學和RT-PCR檢驗 采用上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供的ELISA試劑盒搭配處理10%便懸液，對人輪狀病毒進行檢驗。采用ROCHE全自動核酸分離純化儀檢測HAstV行星狀病毒、HuCV杯狀病毒和HAdV腺病病毒，結(jié)合《全國病毒性腹瀉監(jiān)測方案》和PCR擴增試劑盒的相關(guān)說明書［4］，進行RT-PCR實驗操作。將最終獲取的結(jié)果，即PCR陽性產(chǎn)物直接送至測序中心進行進一步的測定。

1.3.3觀察指標 對比提取的致病菌、病毒、真菌、寄生蟲等不同病原微生物的檢出情況，同時對不同性別、年齡的患兒微生物檢出情況和感染情況進行分類對比，歸納其特點。

1.4統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0處理；計數(shù)資料以n、%表示，組間比較采用χ2檢驗；計量資料以±s表示，采用t檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1不同病原微生物檢出結(jié)果 200例標本檢出病原微生物的有120例，檢出率為60%。其中：致病菌23例（19.2%）；病毒88例（73.3%）；其他9例（7.5%）。該結(jié)果顯示，導致小兒急性腹瀉的病原微生物大多由病毒造成，主要為人輪狀病毒和人杯狀病毒。見表1。

2.2不同性別、年齡的檢驗結(jié)果 107例男性中檢出60例（56.1%），93例女性中檢出41例（44.1%），經(jīng)比較，性別間無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；108例1～2歲患兒檢出病原菌58例（53.7），明顯高于其他年齡段，與＜1、3～5歲年齡段分別比較，存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。見表2。

表1 病原微生物檢出情況/n（%）

3 討論

小兒急性腹瀉是消化道常見疾病，臨床通常表現(xiàn)為大便形狀發(fā)生改變、次數(shù)明顯增多等，若不引起充分重視，會導致營養(yǎng)不良、生長障礙等后果［5］。誘發(fā)急性腹瀉疾病主要是因為患兒年齡較小，其消化道的發(fā)育還未成熟，但又處于生長發(fā)育快速的階段，因此腸道負擔過重，機體整體的防御能力低，在人工喂養(yǎng)中受到感染的風險大。這個階段的小兒很容易引發(fā)急性腹瀉疾病，常見的感染性因素包括病毒、真菌、細菌和寄生蟲等，其中以病毒最為常見。

本研究選入的200例小兒急性腹瀉患兒中，病原微生物檢出率是60%，以病毒感染為主。法國的檢出數(shù)據(jù)為72%左右［6］，比本研究的檢出率更高。人杯狀病毒和人輪狀病毒是小兒急性腹瀉比較常見的病原體，在本研究中的占比分別是15%和50.8%。我國西南地區(qū)不少城市患兒的人輪狀病毒感染率在37%左右，輪狀病毒與人杯狀病毒是導致全球范圍小兒出現(xiàn)急性腹瀉疾病的主要病原體［7］，這與本研究的結(jié)果相似。從年齡來看，本研究中＜1、1～2及3～5歲的患兒感染率分別是27.6%、53.7%和17.6%，1～2歲年齡段明顯占比更多。其原因與患兒的免疫力有直接的關(guān)系，年齡不超過1歲的小兒能夠從母體乳汁中吸收IgA和IgG，這對病原微生物入侵有一定的抵抗作用。伴隨著小兒的成長，2歲以后小兒自身免疫力逐漸完善，有一定抵御病毒入侵的能力。而處于1～2歲的小兒由于吸入母體的抗體明顯減弱，自身免疫系統(tǒng)又沒能發(fā)育成熟，因此很容易遭受病原體的入侵而發(fā)病。從性別來看，不同性別對患兒的檢驗結(jié)果顯示無直接相關(guān)性（P＞0.05）。

綜上所述，小兒急性腹瀉病原微生物的檢出率與性別無關(guān)，與年齡則有一定的相關(guān)性，其中1～2歲小兒更容易引發(fā)急性腹瀉疾病，多以病毒感染為主。因此，臨床上要結(jié)合患兒患病的規(guī)律和具體情況，及時采取有針對性的治療措施，促進患兒早日康復。