李懷偉　張朋　馬海春　馬昌豪

【摘 要】目的：建立同時(shí)測(cè)定蒲地藍(lán)消炎片中黃芩苷和（R，S）-告依春含量的方法。方法：色譜柱為WelchUltimateXB-C18（250mm×4.6mm，5?m），柱溫30℃，以甲醇為流動(dòng)相A，0.05%磷酸為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫，流速1.0mL/min，檢測(cè)波長280nm（黃芩苷）、245nm（（R，S）-告依春），進(jìn)樣量10?L。結(jié)果：黃芩苷和（R，S）-告依春分別在濃度2.79～83.64?g/ml（r=0.9998）、2.05～61.56?g/ml（r=0.9998）的范圍內(nèi)，呈良好線性關(guān)系。黃芩苷和（R，S）-告依春平均回收率分別為99.55%和98.60%（n=6）;RSD分別為0.36%和0.77%。結(jié)論：該方法操作簡便，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可用于蒲地藍(lán)消炎片的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】高效液相色譜法;蒲地藍(lán)消炎片;黃芩苷;（R，S）-告依春

【中圖分類號(hào)】R657.7【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1005-0019（2019）22--01

蒲地藍(lán)消炎片由黃芩、蒲公英、苦地丁和板藍(lán)根4味中藥組成，具清熱解毒，抗炎消腫的功效。臨床常用于癤腫、腮腺炎、淋巴腺炎、扁桃體炎等的治療。藥品收載衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第三冊(cè)，標(biāo)準(zhǔn)較為簡單，無鑒別和含量測(cè)定項(xiàng)目;查閱相關(guān)文獻(xiàn)，多通過薄層色譜或單一成分的含量測(cè)定來控制其質(zhì)量[1-3]。本研究建立了高效液相色譜法同時(shí)測(cè)蒲地藍(lán)消炎片中黃芩苷和（R，S）-告依春的含量，方法簡單、準(zhǔn)確，可用于該藥品的質(zhì)量控制。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 （1）Agilent1260高效液相色譜儀（美國安捷倫）;XS105 DualRange型十萬分之一天平（METTLER TOLEDO）。（2） 藥品與試劑 甲醇、磷酸（色譜純）;黃芩苷（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110715-201720）;（R，S）-告依春（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：111753-201706）;蒲地藍(lán)消炎片（市售，批號(hào)20181102，20181103，20190402）。

1.2 方法 （1）色譜條件 以甲醇為流動(dòng)相A，0.05%磷酸為流動(dòng)相B，梯度洗脫（0～16min，5%A;16～17min，5%→50%A;17～40min，50%A;40～41min，50%→5%A;41～45min，5%A）;流速：1.0mL·min-1柱溫：30℃;進(jìn)樣體積10?L，檢測(cè)波長280nm（黃芩苷）、245nm（（R，S）-告依春）。（2）混合對(duì)照品溶液的制備 精密稱取黃芩苷和（R，S）-告依春各適量，加甲醇制成含黃芩苷0.2788?g/ml、（R，S）-告依春?g/ml的對(duì)照品貯備液溶液。將貯備液稀釋10倍作為混合對(duì)照品溶液。（3）供試品和陰性樣品溶液的制備 取本品20片，除去包衣，研細(xì)，取約2.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30min（功率250W，頻率40kHz），冷卻至室溫，用甲醇補(bǔ)足失重，濾過，取續(xù)濾液，即得。同法制備不含黃芩和板藍(lán)根的陰性樣品溶液。

2 結(jié)果

2.1 專屬性考察結(jié)果表明，黃芩苷和（R，S）-告依春分別為黃芩和板藍(lán)根的特有成分，其它成分對(duì)測(cè)定無干擾。見圖1。

2.2 線性關(guān)系考察 分別精密吸取上述對(duì)照品貯備液0.10ml、0.30ml、0.50ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml至10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻。進(jìn)樣測(cè)定，以峰面積值為縱坐標(biāo)（y），濃度（?g·mL-1）為橫坐標(biāo)（x）進(jìn)行線性回歸，黃芩苷和（R，S）-告依春回歸方程分別為Y=31.2283X-5.2296（r=0.9998）和Y=63.3927+8.8060（r=0.9999）;分別在2.79～83.64?g/ml和2.05～61.56?g/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

2.3 精密度實(shí)驗(yàn) 取混合對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果黃芩苷和（R，S）-告依春峰面積的RSD分別為0.26%和0.51%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一批供試品6份，按“1.2”項(xiàng)下（3）方法制備6份供試品溶液，測(cè)定含量，黃芩苷和（R，S）-告依春的RSD分別為0.69%和1.02%，表明方法有較好的重復(fù)性。

2.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取 同一供試品溶液，于0，4，8，16，24 h時(shí)進(jìn)樣，結(jié)果黃芩苷和（R，S）-告依春峰面積的RSD分別為1.15%和0.45%。

2.6 回收率實(shí)驗(yàn) 取已知含量的蒲地藍(lán)消炎片1.0g，共6份，分別精密加入等量對(duì)照品，按供試品溶液制備方法進(jìn)行處理，測(cè)定回收率，結(jié)果黃芩苷和（R，S）-告依春平均回收率分別為99.55%和98.60%;RSD分別為0.36%和0.77%。

2.7 含量測(cè)定 取3批樣品，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算黃芩苷和（R，S）-告依春的含量，結(jié)果見表1

3 討論

黃芩和板藍(lán)根作為蒲地藍(lán)消炎片處方中的兩味主藥，其含量直接影響蒲地藍(lán)消炎片的功效。本研究采用DAD檢測(cè)器雙波長檢測(cè)法，同時(shí)測(cè)定黃芩苷和（R，S）-告依春含量，該方法專屬性、穩(wěn)定性較好，準(zhǔn)確度高且方便快捷;能更全面的反映藥品的內(nèi)在質(zhì)量，可為蒲地藍(lán)消炎片的質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成分制劑第三冊(cè)，心可寧膠囊[S].1991：187.

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李凱，逯海龍.蒲地藍(lán)消炎片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，34（8）：859-860.