滕廣帥，董福強(qiáng)

（天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，天津 300070）

幼兒貧血是小兒時(shí)期常見(jiàn)的一種癥狀或綜合征，且臨床上根據(jù)外周血紅蛋白或紅細(xì)胞數(shù)分為輕度、中度、重度3種[1]。臨床研究表明[2]：幼兒貧血誘因較多，包括：葉酸、維生素B12及鐵等物質(zhì)缺乏、感染、血液病等，發(fā)病早期臨床表現(xiàn)為皮膚、黏膜蒼白為主，隨著貧血的加劇可表現(xiàn)為心跳加快、食欲減退及精神不振等，嚴(yán)重者可表現(xiàn)為營(yíng)養(yǎng)低下、體格發(fā)育遲緩、易疲倦等，影響患兒健康。中醫(yī)上將其歸屬于“萎黃”“血虛”“疳證”等范疇進(jìn)行辨證施治。此病的產(chǎn)生，與脾、腎、心、肝密切相關(guān)。脾胃為后天之本，氣血生化之源，又具統(tǒng)血之能，然小兒脾常不足，臟腑形氣未充，若飲食失節(jié)，喂養(yǎng)不當(dāng)，臟腑虛損，蟲積致?lián)p等損傷脾胃，使脾胃虛弱，氣血生化無(wú)源，會(huì)造成貧血。

調(diào)節(jié)性T細(xì)胞屬于一類控制體內(nèi)自身免疫反應(yīng)性的T細(xì)胞亞群，表達(dá)水平能反映自身免疫性疾病嚴(yán)重程度，參與疾病發(fā)生、發(fā)展，但是在幼兒貧血中的表達(dá)及與預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值研究較少[3-4]。因此，文章以天津市兒童醫(yī)院治療的貧血患兒及健康體檢者作為對(duì)象開(kāi)展研究，探討調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在幼兒貧血中的表達(dá)及與預(yù)后的相關(guān)性，從而指導(dǎo)臨床用藥，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2016年3月—2017年3月天津市兒童醫(yī)院治療的貧血患兒80例作為研究對(duì)象，設(shè)為觀察組，男 45例，女 35例，年齡（1～5）歲，平均（3．41±0．66）歲；病程（1～5）月，平均（3．23±0．53）月。根據(jù)貧血嚴(yán)重程度分為輕度組、中度組與重度組；根據(jù)治療預(yù)后分為預(yù)后良好組與預(yù)后差組：患者血紅蛋白提高20 g/L或者有上升趨勢(shì)評(píng)估為預(yù)后良組，患者治療后血紅蛋白水平無(wú)明顯變化評(píng)估為預(yù)后差組；選擇同期健康體檢者55例，設(shè)為對(duì)照組，男 29 例，女26例，年齡（1～6）歲，平均（3．39±0．58）歲。

1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：1）符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》[5]第6版中幼兒貧血診斷標(biāo)準(zhǔn)，均經(jīng)生化指標(biāo)檢查確診。2）觀察組均符合鐵劑、維生素及飲食強(qiáng)化治療適應(yīng)癥，且患兒均可耐受。

排除標(biāo)準(zhǔn)：1）合并白血病、惡性腫瘤或入院資料不全者。2）近期給予其他藥物干預(yù)或影響試驗(yàn)結(jié)果。3）既往有輸血史或接受免疫抑制劑治療史者。

1.3 方法 1）儀器與設(shè)備。熒光鼠抗人CD4+、CD4+CD125+、CD4+CD125+CD127low單克隆抗體；FAC Station流式細(xì)胞儀（美國(guó)BD公司）。2）標(biāo)本采集。觀察組入院后日次取空腹靜脈血3 mL，對(duì)照組健康體檢當(dāng)天取空腹靜脈血3 mL，放置在-80℃冰箱中，備用。3）檢測(cè)方法。采用流式細(xì)胞儀完成各組調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞 CD4+、CD4+CD125+、CD4+CD125+CD127low水平。向流式管中加入待測(cè)標(biāo)本100 μL，加入CD4+、CD4+CD125+、CD4+CD125+CD127low熒光標(biāo)記的單克隆抗體10μL，充分混合振蕩均勻后，室溫下連續(xù)進(jìn)行20min避光孵育，最后向每管中加入紅細(xì)胞裂解液1 mL，充分振蕩混合后5min避光離心，離心速度1000r/min，去除上層清液，加入磷酸緩沖鹽溶液（PBS）液1mL，5 min避光離心，離心速度 1 000 r/min，向離心后的試管中加入PBS液0.5 mL。上述操作完畢后采用流式細(xì)胞儀完成調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平測(cè)定，并利用Cellquest軟件（美國(guó)BD公司）分析陽(yáng)性細(xì)胞所占百比例[6-7]。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS 22.0軟件處理，計(jì)量資料，采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組與對(duì)照組調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平比較 觀察組調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞 CD4+、CD4+CD125+、CD4+CD125+CD127low百分比，均低于對(duì)照組（P<0.05），見(jiàn)表1。

表1 觀察組與對(duì)照組調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平比較（）Tab.1 Comparison of regulatory T cells levels between observation group and control group（）%

表1 觀察組與對(duì)照組調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平比較（）Tab.1 Comparison of regulatory T cells levels between observation group and control group（）%

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。

組別 例數(shù) CD4+ CD4+CD125+ CD4+CD125+CD127low觀察組 80 23.29±1.98* 3.25±0.67* 2.19±0.51*對(duì)照組 55 36.78±3.42 6.89±0.98 5.12±0.77

2.2 觀察組不同嚴(yán)重程度下調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平比較 觀察組貧血患兒中重度組CD4+、CD4+CD125+、CD4+CD125+CD127low百分比低于輕度組、中度組（P<0.05）； 中 度組 CD4+、CD4+CD125+、CD4+CD125+CD127low百分比，低于輕度組（P<0.05），見(jiàn)表 2。

表2 觀察組不同嚴(yán)重程度下調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平比較（）Tab.2 Comparison of regulatory T cells levels under different severity in the observation group（）%

表2 觀察組不同嚴(yán)重程度下調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平比較（）Tab.2 Comparison of regulatory T cells levels under different severity in the observation group（）%

注：與輕度組比較，*P<0.05；與中度組比較，#P<0.05。

組別 例數(shù) CD4+ CD4+CD125+ CD4+CD125+CD127low輕度組 35 32.49±3.29 6.11±0.91 4.87±0.72中度組 20 26.73±2.15* 4.69±0.69* 3.59±0.51*重度組 25 19.81±2.51*# 2.98±0.60*# 1.78±0.32*#

2.3 觀察組不同預(yù)后下調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平比較觀察組貧血患兒中預(yù)后良好組CD4+、CD4+CD125+、CD4+CD125+CD127low百分比高于預(yù)后差組（P<0.05），見(jiàn)表3。

表3 觀察組不同預(yù)后下調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平比較（）Tab.3 Comparison of regulatory T cells levels under different prognosis in the observation group（）%

表3 觀察組不同預(yù)后下調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平比較（）Tab.3 Comparison of regulatory T cells levels under different prognosis in the observation group（）%

注：與預(yù)后差組比較，*P<0.05。

組別 例數(shù) CD4+ CD4+CD125+CD4+CD125+CD127low預(yù)后差組 6 18.41±2.11 2.25±0.61 1.67±0.15預(yù)后良好組 74 34.35±2.69* 6.68±0.93* 5.03±0.38*

3 討論

貧血好發(fā)于小兒人群，且多數(shù)患兒由于營(yíng)養(yǎng)不良引起，影響患兒健康、成長(zhǎng)[8-9]。臨床研究表明[10-11]：細(xì)胞免疫在幼兒貧血中發(fā)揮了重要的作用，并認(rèn)識(shí)到Treg細(xì)胞持續(xù)表達(dá)在機(jī)體免疫抑制反應(yīng)、免疫耐受狀態(tài)中的作用，其功能能實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間的直接接觸，對(duì)于局部免疫反應(yīng)具有抑制作用。本研究中，觀察組調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞 CD4+、CD4+CD125+、CD4+CD125+CD127low百分比，均低于對(duì)照組（P<0.05）；觀察組貧血患兒中重度組 CD4+、CD4+CD125+、CD4+CD125+CD127low百分比低于輕度組、中度組（P<0.05），說(shuō)明幼兒貧血中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞呈低表達(dá)，其表達(dá)水平能反映幼兒缺血嚴(yán)重程度。臨床研究表明[12]：幼兒貧血中存在調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平異常，且患兒多呈低表達(dá)。從本研究結(jié)果看出：在幼兒貧血中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例呈下降趨勢(shì)，可能是由于持續(xù)的缺血造成細(xì)胞免疫抑制功能缺陷，使機(jī)體免疫平衡被打破，加劇疾病的發(fā)生、發(fā)展。

幼兒貧血危害性相對(duì)較大，為了降低幼兒貧血發(fā)生率，應(yīng)采取有效的措施進(jìn)行干預(yù)：1）積極加強(qiáng)地區(qū)保健工作與宣傳教育工作，不斷加強(qiáng)家庭與兒童機(jī)構(gòu)的營(yíng)養(yǎng)指導(dǎo)；對(duì)于容易發(fā)生貧血患兒盡早采取有效的措施預(yù)防；對(duì)幼兒及時(shí)添加輔食，早期給予鐵劑，對(duì)于易感患兒給予鐵劑預(yù)防；加強(qiáng)患兒鐵預(yù)防，根據(jù)鐵元素計(jì)算幼兒所需量[13-14]。2）相關(guān)部門加大寄生蟲等疾病的防疫工作，預(yù)防患兒重復(fù)感染；對(duì)于已經(jīng)確診的患兒積極給予飲食強(qiáng)化治療、干預(yù)，配合維生素干預(yù)，促進(jìn)患兒恢復(fù)。3）現(xiàn)今中醫(yī)對(duì)營(yíng)養(yǎng)性缺鐵性貧血的治療的效果比較明顯，而且有效解決了西醫(yī)治療單純給予鐵劑的改善癥狀緩慢、胃腸道不良反應(yīng)大、療程長(zhǎng)的缺點(diǎn)，只要辯證準(zhǔn)確，結(jié)合小兒生理病理特點(diǎn)，注意臟腑之間的協(xié)調(diào)作用，組方配藥，也收到可觀的效果[15]。本研究中，觀察組貧血患兒中預(yù)后良好組CD4+、CD4+CD125+、CD4+CD125+CD127low百分比高于預(yù)后差組（P<0.05），說(shuō)明調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平能反映患兒治療預(yù)后。因此，幼兒貧血治療過(guò)程中可加強(qiáng)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平測(cè)定，善于根據(jù)測(cè)定結(jié)果調(diào)整相關(guān)治療方案，中西結(jié)合，使得患兒治療更具科學(xué)性。

綜上所述，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在幼兒貧血中呈低表達(dá)，且與患兒臨床預(yù)后呈負(fù)相關(guān)性，加強(qiáng)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞測(cè)定能評(píng)估預(yù)后，指導(dǎo)臨床治療。