徐 玥，張存勞，李思萌，陳 程

(西安醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，西安 710021)

由于亞油酸、亞麻酸等多不飽和脂肪酸對(duì)溫度、水分、空氣、光照和氧化劑都比較敏感，穩(wěn)定性弱，在加工和貯藏過程中易被氧化，降低了油脂的品質(zhì)，并且會(huì)產(chǎn)生一些醛類、酮類等異味物質(zhì)或?qū)θ梭w不健康的物質(zhì)[5-6]。因此，研究新型的牡丹籽油產(chǎn)品，對(duì)油脂的生物利用度以及使用者依從性等具有十分重要的意義。

微囊是一種通過高分子載體材料充當(dāng)外壁材，包裹住固體或者液體藥物的微小膠囊，起到保護(hù)、控釋藥物的作用[7-8]。將牡丹籽油制備成微囊，可以提高其生物利用度。在油脂產(chǎn)品研究開發(fā)中，已經(jīng)制備出莪術(shù)油微囊[9]、南極磷蝦油微囊[10]、鴉膽子油微囊[11]、漢麻籽油微膠囊[12]等。本課題擬將牡丹籽油制備成微囊，并對(duì)其進(jìn)行表征，以期為牡丹籽油的進(jìn)一步應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 原料與試劑

牡丹籽油，陜西興森源生物科技有限公司；阿拉伯膠，明膠， 36%～37%甲醛(分析純)，10%醋酸溶液，20%氫氧化鈉溶液，正己烷(分析純)。

1.1.2 儀器與設(shè)備

Cary60紫外可見分光光度計(jì)，DF-101S型恒溫加熱磁力攪拌器，QICPIC干、濕法動(dòng)態(tài)粒度粒形分析儀(德國(guó)新帕泰克有限公司)，T27型布魯克紅外光譜儀，Tecnai G2 F20掃描透射電鏡，DSC1 STAReSystem差示掃描量熱儀，SD-Basic噴霧干燥儀。

經(jīng)前期水腫 有些女性朋友自訴自己很健康，但是每每月經(jīng)來(lái)潮前十天左右，就會(huì)出現(xiàn)眼瞼、手背、腳踝甚至雙下肢輕度水腫的情況，隨之而來(lái)的還有煩躁、失眠、疲乏、頭痛等癥狀。而當(dāng)月經(jīng)來(lái)時(shí)，上述癥狀就會(huì)逐漸消退。我想跟這部分朋友強(qiáng)調(diào)的是，這類水腫多與月經(jīng)周期變化和內(nèi)分泌功能改變有關(guān)，屬于正常的生理現(xiàn)象。隨著排尿量增多，水腫及其他癥狀亦會(huì)逐漸消退。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 牡丹籽油微囊的制備

明膠液的制備：稱取2 g明膠，加入50 mL純水，加熱至60℃浸泡30 min溶脹，于50℃恒溫加熱磁力攪拌器中不斷攪拌30 min使之溶解，攪拌速度不宜過高。

乳液的制備：稱取一定量阿拉伯膠，加入50 mL純水，加熱至60℃攪拌溶解。加入牡丹籽油，在高速剪切機(jī)中乳化5 min，再在攪拌下加入純水中。

微囊制備：將制備的明膠液加入乳液中，攪拌混合。用10%醋酸溶液調(diào)節(jié)pH至4.0左右，繼續(xù)攪拌15 min。待溫度自然降低至30～35℃后，迅速放入冰水浴中，降溫到10℃以下，加入36%～37%甲醛固化。繼續(xù)攪拌20 min后，加入20%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至8左右，繼續(xù)攪拌30 min。然后離心(3 000 r/min，30 min)，分離上清液和下層。用水多次洗下層，直到?jīng)]有甲醛氣味，噴霧干燥[13]，得牡丹籽油微囊。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別用正己烷配制質(zhì)量濃度(C)分別為10、20、30、40、50、60 mg/mL的牡丹籽油溶液，在紫外波長(zhǎng)300 nm[14]下測(cè)定吸光度(A)，得到牡丹籽油標(biāo)準(zhǔn)曲線方程A=25.348C+0.065 5，R2=0.999 5，牡丹籽油溶液在10～60 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

1.2.3 牡丹籽油微囊包封率的測(cè)定

準(zhǔn)確記錄1.2.1離心后上清液體積，從中精密吸取10 mL，加入10 mL正己烷超聲萃取10 min，轉(zhuǎn)到10 mL容量瓶中，加正己烷溶液定容至刻度。使用紫外可見分光光度計(jì)，在300 nm處測(cè)定吸光度，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中計(jì)算，得出上清液中牡丹籽油含量。按照下式計(jì)算牡丹籽油微囊包封率[15-16]。

包封率=(1-上清液中牡丹籽油質(zhì)量/樣品牡丹籽油質(zhì)量)×100%

1.2.4 透射電鏡的觀察

將樣品緩慢地置于透射掃描電鏡下，通過電腦顯示，觀察牡丹籽油微囊的外部特征，并拍攝照片。

1.2.5 牡丹籽油微囊粒徑的測(cè)定

用激光粒度分析儀測(cè)定牡丹籽油微囊粒徑以及Zeta電位。

1.2.6 紅外光譜表征

將真空干燥后的產(chǎn)物與KBr按照質(zhì)量比1∶100研磨，壓片，用紅外光譜儀測(cè)定紅外譜圖。

1.2.7 DSC檢測(cè)分析

將樣品置于樣品皿中，小心地將樣品皿放入DSC中，記錄測(cè)定結(jié)果。

2 結(jié)果與討論

2.1 牡丹籽油微囊制備的正交試驗(yàn)

在前期單因素試驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上，固定乳化剪切速度為4 000 r/min，以阿拉伯膠與明膠質(zhì)量比、囊材與牡丹籽油質(zhì)量比、固化劑用量為因素，包封率為指標(biāo)，采用三因素三水平L9(34)正交表進(jìn)行正交試驗(yàn)，正交試驗(yàn)因素水平見表1，正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表2。由表2可知，3個(gè)因素對(duì)牡丹籽油微囊包封率影響大小依次為阿拉伯膠與明膠質(zhì)量比>囊材與牡丹籽油質(zhì)量比>固化劑用量。用阿拉伯膠和明膠作為囊材，采用復(fù)凝聚法制備牡丹籽油微囊的最佳制備工藝組合為A2B1C3，即阿拉伯膠與明膠質(zhì)量比1∶1、囊材與牡丹籽油質(zhì)量比1∶0.2、固化劑用量5 mL。

表1 正交試驗(yàn)因素水平

表2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

2.2 牡丹籽油微囊制備的驗(yàn)證試驗(yàn)

在阿拉伯膠與明膠質(zhì)量比1∶1、囊材與牡丹籽油質(zhì)量比1∶0.2、固化劑用量5 mL、乳化剪切速度4 000 r/min條件下，平行制備3份牡丹籽油微囊，測(cè)得平均包封率為99.5%，RSD為1.03%。說明此工藝穩(wěn)定可行，包封率高。

2.3 牡丹籽油微囊的表征

2.3.1 牡丹籽油微囊的形態(tài)(見圖1)

圖1 牡丹籽油微囊的透射電鏡圖

從圖1可以看出，在最佳條件下制備的牡丹籽油微囊呈圓球或橢圓形，外觀完整，大小合適，表面光滑。

2.3.2 牡丹籽油微囊的粒徑(見圖2、圖3)

圖2 牡丹籽油微囊的干法動(dòng)態(tài)粒徑分布

圖3 牡丹籽油微囊的Zeta電位分布

由圖2、圖3可知，牡丹籽油微囊的粒徑處于38 μm以下的占98.06%，平均粒徑為12.28 μm。從圖3可以看出，牡丹籽油微囊的Zeta電位為-19.1 mV，表明牡丹籽油微囊表面具有較多的凈電荷，微囊之間存在靜電排斥力，物理穩(wěn)定性較強(qiáng)，有利于貯存。

2.3.3 牡丹籽油微囊的紅外光譜(見圖4、圖5)

由圖4可知，牡丹籽油在2 700～3 050 cm-1、1 700～1 800 cm-1、1 400～1 500 cm-1、1 100～1 200 cm-1、700～750 cm-1有較強(qiáng)的吸收峰，這是牡丹籽油中含有的不飽和脂肪酸所致，說明牡丹籽油的不飽和程度高。由圖5可知，牡丹籽油微囊在2 700～3 050 cm-1、1 700～1 800 cm-1、1 400～1 500 cm-1、1 100～1 200 cm-1處也有吸收峰，但吸收峰相比于牡丹籽油較弱。而經(jīng)過包合后，700～750 cm-1處吸收峰藍(lán)移到600～650 cm-1，說明牡丹籽油被囊材很好地包裹[13]。

圖4 牡丹籽油的紅外光譜圖

圖5 牡丹籽油微囊的紅外光譜圖

2.3.4 牡丹籽油微囊的DSC分析(見圖6)

圖6 牡丹籽油微囊DSC測(cè)定結(jié)果

由圖6可知，牡丹籽油微囊在63℃左右出現(xiàn)一個(gè)強(qiáng)烈的吸熱峰，該吸熱峰對(duì)應(yīng)溫度為其相變溫度，故可證明牡丹籽油微囊在63℃以下熱穩(wěn)定性良好。

3 結(jié) 論

確定了牡丹籽油微囊的最佳制備工藝條件為：明膠質(zhì)量2 g下，阿拉伯膠與明膠質(zhì)量比1∶1，囊材與牡丹籽油質(zhì)量比1∶0.2，固化劑用量5 mL，乳化剪切速度4 000 r/min。在最佳條件下，牡丹籽油微囊包封率達(dá)到99.5%。所得牡丹籽油微囊平均粒徑為12.28 μm，分布良好，外觀圓整光滑。紅外光譜分析結(jié)果表明囊材可以有效地包裹牡丹籽油。DSC分析表明牡丹籽油微囊在63℃以下具有良好的熱穩(wěn)定性。