袁甜，張海燕

泗陽(yáng)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇宿遷 223700

血細(xì)胞主要包括白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板三大類(lèi)型。血細(xì)胞的形態(tài)學(xué)表現(xiàn)、分類(lèi)計(jì)數(shù)情況在血液疾?。ㄈ缲氀┑呐R床診斷中具有重要參考價(jià)值[1]。但傳統(tǒng)手工鏡檢的工作量大、耗時(shí)長(zhǎng)、視野有限，容易出現(xiàn)漏檢情況，可行性受到限制。血細(xì)胞形態(tài)分析技術(shù)是應(yīng)用血細(xì)胞分析儀，在全自動(dòng)機(jī)械操作狀態(tài)下完成對(duì)血細(xì)胞分類(lèi)、計(jì)數(shù)、形態(tài)學(xué)信息采集等工作，具有分層掃描、視野分辨率高、方便快捷等優(yōu)勢(shì)，在臨床血細(xì)胞檢驗(yàn)中具有重要應(yīng)用價(jià)值[2-3]。為了比較分析血細(xì)胞分析儀形態(tài)分析法、傳統(tǒng)鏡檢篩選法在血液系統(tǒng)病變篩查中的應(yīng)用效果，該研究回顧性分析了該院檢驗(yàn)科2017年10月—2018年10月間接收的76例受試者的血液樣本的血細(xì)胞檢驗(yàn)結(jié)果，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集該院檢驗(yàn)科接收的76例受試者所提供血液樣本。納入標(biāo)準(zhǔn)為：①所選患者由健康體檢者、外科手術(shù)患者、普通病房住院患者提供；②受試者均在空腹?fàn)顟B(tài)下按照肘靜脈采血法收集血樣，分為兩份，分別進(jìn)行血細(xì)胞儀形態(tài)學(xué)分析和顯微鏡檢驗(yàn)；③患者及家屬對(duì)該研究的目的、方法和相關(guān)信息詳細(xì)了解，自愿參與，簽訂研究同意協(xié)議；④研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除合并嚴(yán)重軀體疾病如惡性腫瘤、臟器功能衰竭、呼吸衰竭、急性心肌梗死和急性腦梗死的患者；②排除合并精神疾病的患者；③排除合并血液功能障礙如血友病的情況；④排除合并傳染疾病如艾滋病患者的血樣。該組76例中有男性50例、女性 26 例，年齡 20～58 歲，平均（39.2±4.4）歲，健康體檢者40名、外科手術(shù)患者21例、普通病房住院患者15例。

1.2 方法

所選受試對(duì)象均空腹8 h以上，于次日清晨7:00-9:00上午采用肘靜脈采血法采集靜脈血約2 mL，分裝于兩個(gè)試管中，在兩份血樣中加入EDTA-K2抗凝劑1.5 mg充分混勻后靜置，在室溫條件下保存，一份樣本制成血涂片、應(yīng)用瑞特-姬母薩染色法混合染色后在50倍鏡油鏡下對(duì)有核細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，同時(shí)觀察中性粒細(xì)胞、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)；另一份制成血涂片樣后應(yīng)用邁瑞CAL8 000全自動(dòng)血細(xì)胞流水線(xiàn)檢測(cè)系統(tǒng)及配套試劑進(jìn)行檢驗(yàn)，將外周血涂片安裝在系統(tǒng)，啟動(dòng)程序后血涂片被自動(dòng)推放至載物臺(tái)，開(kāi)始對(duì)血涂片進(jìn)行掃描，首先利用10倍物鏡掃描單層細(xì)胞，然后進(jìn)行多層次掃描，記錄不同層次白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)、所處空間位置。最后自動(dòng)滴油在100倍油鏡下對(duì)血細(xì)胞高清攝像，利用DM全自動(dòng)數(shù)字化細(xì)胞形態(tài)分析系統(tǒng)采集血細(xì)胞的顏色、幾何、紋理、分形、小波、血細(xì)胞分類(lèi)、占比等信息，從而對(duì)白細(xì)胞、血細(xì)胞和血小板細(xì)胞3種血細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞識(shí)別、分類(lèi)、計(jì)數(shù)和形態(tài)學(xué)分析，兩份血液樣本的形態(tài)學(xué)分析和檢驗(yàn)均由細(xì)胞形態(tài)學(xué)工作人員完成。

1.3 血細(xì)胞異常樣本的陽(yáng)性篩選標(biāo)準(zhǔn)

（1）顯微鏡檢，出現(xiàn)下述情況之一為陽(yáng)性：①晚幼粒（晚幼紅）：胞體直徑 10～16 μm，細(xì)胞核變粗、胞質(zhì)增多呈紅色、充滿(mǎn)中性顆粒：②中性粒細(xì)胞中性毒變：中性粒細(xì)胞大小不均、核固縮、空泡變性、顆粒增粗；③異型淋巴細(xì)胞（異淋）；④紅細(xì)胞形態(tài)異常：紅細(xì)胞大小不一、呈現(xiàn)球形、橢圓形、靶形等不規(guī)則形狀，中央蒼白區(qū)擴(kuò)大。

（2）血細(xì)胞分析儀，對(duì)血細(xì)胞圖像進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析，并對(duì)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、免疫細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，若符合下述情況之一為陽(yáng)性：①HGB＜100 g/L，出現(xiàn)貧血或溶血情況；②單核細(xì)胞＞10%；③淋巴細(xì)胞＞40%；④中性粒細(xì)胞中毒顆粒＞50%或空泡性細(xì)胞＞10%；⑤出現(xiàn)晚幼粒、中性粒細(xì)胞中性毒變或核左移、異淋或紅細(xì)胞形態(tài)異常征。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

利用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究資料進(jìn)行比較分析，計(jì)數(shù)資料用率（%）形式表示，兩組配對(duì)比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 邁瑞CAL8 000全自動(dòng)血細(xì)胞流水線(xiàn)檢測(cè)系統(tǒng)形態(tài)學(xué)分析技術(shù)和顯微鏡檢驗(yàn)技術(shù)對(duì)76例體檢者血液樣本中血細(xì)胞異常樣本的篩選結(jié)果比較[n(%)]

2 結(jié)果

應(yīng)用兩種檢驗(yàn)方法對(duì)76例血樣進(jìn)行檢驗(yàn)分析，結(jié)果顯示，血細(xì)胞分析儀形態(tài)血分析技術(shù)檢出血細(xì)胞異常樣本共計(jì)27例，檢出率為35.5%；傳統(tǒng)顯微鏡檢出血細(xì)胞異常樣本共計(jì)32例，檢出率為42.1%，兩組對(duì)于異常血細(xì)胞的檢驗(yàn)結(jié)果比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表 1。

3 討論

血細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征、分類(lèi)計(jì)數(shù)情況對(duì)各類(lèi)血液疾病的臨床診斷具有重要參考價(jià)值，顯微鏡形態(tài)學(xué)檢查可對(duì)血細(xì)胞的分類(lèi)、比例、結(jié)構(gòu)變化做出符合事實(shí)的準(zhǔn)確判斷，可作為血細(xì)胞異常的血液疾病臨床篩查的金標(biāo)準(zhǔn)[4]。但人工鏡檢的操作復(fù)雜、耗時(shí)較長(zhǎng)、儀器分辨率有限[5]。

近年來(lái)，血細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析技術(shù)逐步完善，該技術(shù)是借助全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀和數(shù)字基于SVM和ANN的BCM細(xì)胞識(shí)別技術(shù)，對(duì)血細(xì)胞進(jìn)行多層次、高分辨率的掃描，并將血細(xì)胞的分類(lèi)、計(jì)數(shù)、形態(tài)學(xué)特征以直方圖、曲線(xiàn)等形式反映出來(lái)，具有較高的科學(xué)性、可靠性，且檢驗(yàn)迅速[6]。然而，血細(xì)胞分析儀是一種復(fù)雜性?xún)x器，不同儀器間的檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)具有較大的差異性，增加了鏡檢篩選結(jié)果的不確定性[7]；此外，血細(xì)胞分析儀僅能依靠血細(xì)胞測(cè)定的相關(guān)參數(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，缺少真實(shí)的人工形態(tài)學(xué)分析，不僅容易漏檢，還容易出現(xiàn)假陽(yáng)性情況，特別難以發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞形態(tài)、中性粒毒性變性、空泡變性等形態(tài)學(xué)特征。這些都使得血細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析技術(shù)在異常血細(xì)胞的臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用受到限制[8]。近年來(lái)，大量研究為血細(xì)胞形態(tài)分析技術(shù)提供了較為完備的規(guī)定條件，統(tǒng)一并規(guī)范了儀器操作步驟、操作參數(shù)，使血細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析技術(shù)的準(zhǔn)確率提高10%～20%，使其成為了一種高效、準(zhǔn)確、可行性較高的血細(xì)胞分析方法[9]。

最后，該研究的結(jié)果顯示，76份血液樣本的血細(xì)胞分析結(jié)果顯示，血細(xì)胞分析儀形態(tài)血分析技術(shù)對(duì)于血細(xì)胞異常血樣的檢出率為35.5%，傳統(tǒng)鏡檢的檢出率為42.1%，兩組對(duì)于異常血細(xì)胞的檢驗(yàn)結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），這也與戴澤寧等[10]關(guān)于用規(guī)定的條件進(jìn)行血細(xì)胞形態(tài)分析既能確保不漏檢陽(yáng)性結(jié)果,又能糾正儀器的假陽(yáng)性指示,使鏡檢率提高到35.6%的研究較為一致。

綜上所述，利用血細(xì)胞分析儀形態(tài)學(xué)分析技術(shù)，能夠較為準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)血細(xì)胞的異常情況和病因，方便快捷、分辨率高，值得在血液疾病的篩查檢驗(yàn)中加以推廣應(yīng)用。