王來(lái)平 鄭夕同 薛曉敏 陳汝

（1 山東省果樹(shù)研究所，泰安271000；2 山東省榮成市農(nóng)業(yè)農(nóng)村事務(wù)服務(wù)中心，榮成264300）

矮化自根砧一般由無(wú)性繁殖而來(lái)， 常采取扦插、壓條等傳統(tǒng)手段。但對(duì)于一些蘋(píng)果砧木來(lái)說(shuō)，扦插不易生根，難成苗，且插條需求量大，繁育系數(shù)低；而壓條雖然能成苗，但繁育過(guò)程中需要多次培植，對(duì)培植高度和材料配比都有要求，分株起苗時(shí)還易對(duì)苗木根系造成傷害， 影響緩苗成活，繁殖系數(shù)相對(duì)較低。與扦插、壓條相比，利用組織培養(yǎng)技術(shù)繁育自根苗， 具有繁殖周期短、繁殖系數(shù)高、苗木整齊等優(yōu)點(diǎn)[1]。 因此，組織培養(yǎng)成為高效繁育自根砧苗的重要途徑。 抗重茬砧木‘AM1’（暫定名）扦插難生根，利用組培技術(shù)可有效降低蘋(píng)果病害， 短時(shí)間內(nèi)能供應(yīng)大量?jī)?yōu)良苗木，滿足市場(chǎng)需求。組培苗增殖與生根是組培快繁技術(shù)的關(guān)鍵步驟， 能否生根及生根好壞直接影響成苗。 本試驗(yàn)以新引進(jìn)抗重茬砧木‘AM1’為材料，研究不同激素濃度配比對(duì)其增殖與生根的影響，建立組培快繁體系，為生產(chǎn)應(yīng)用提供大量?jī)?yōu)質(zhì)苗木。

1 材料與方法

1.1 材料

從美國(guó)引進(jìn)抗重茬砧木‘AM1’（暫定名），山東省果樹(shù)研究所提供， 試驗(yàn)在山東省泰安惠農(nóng)園藝科技有限公司進(jìn)行。

1.2 方法

8 月份從母樹(shù)上選取新長(zhǎng)出的長(zhǎng)度約1.0～1.5 cm 的莖尖，消毒后接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基為MS+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L，用不同濃度6-BA、6-BA+IBA、6-BA+IBA+NAA 處理（表1），置于光照16 h/d、光照2 000 Lux、溫度24～26 ℃、空氣相對(duì)濕度50%～70%條件下進(jìn)行培養(yǎng)。 將啟動(dòng)培養(yǎng)后成活良好的外植體接種到增殖培養(yǎng)基上， 增殖培養(yǎng)基為MS+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L，用不同濃度6-BA+IBA 處理（表1），置于光照16 h/d、光照2 000 Lux、溫度24～26 ℃、相對(duì)濕度40%～50%條件下進(jìn)行培養(yǎng)。 將增殖培養(yǎng)后獲得的生長(zhǎng)20～25 d、高度大于1.5 cm健壯的組培苗，接種于生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)基1/2MS+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L， 用不同濃度IAA、IBA、IAA+IBA 處理（表1），先暗處理7 d 后，再置于光照16 h/d、光照2 000 Lux、溫度25 ℃條件下進(jìn)行生根培養(yǎng)。 當(dāng)組培苗根長(zhǎng)度達(dá)到1.5 cm 后，開(kāi)始煉苗，光強(qiáng)從2 000～5 000 Lux 逐步過(guò)渡，煉苗10～15 d。

表1 不同激素濃度處理 單位： mg/L

2 結(jié)果與分析

2.1 啟動(dòng)培養(yǎng)基不同濃度激素處理對(duì)外植體萌芽影響

從表2～4 可以看出，啟動(dòng)培養(yǎng)基使用不同濃度6-BA、6-BA+IBA、6-BA+IBA+NAA 處理，不同濃度6-BA+IBA+NAA 處理誘導(dǎo)率普遍高于6-BA、6-BA+IBA 處理， 其中1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+0.05 mg/L NAA 處理誘導(dǎo)率最高， 達(dá)到83.33%；6-BA+IBA 處理效果普遍高于6-BA 處理， 其中1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA 效果較好，達(dá)到76.67%；6-BA 處理效果普遍較差， 其中1.0 mg/L 6-BA 效果較6-BA 處理其它濃度好，萌芽率達(dá)到70.00%。

表2 6-BA 濃度對(duì)外植體誘導(dǎo)率的影響

表3 IBA 濃度對(duì)外植體誘導(dǎo)率的影響

表4 NAA 濃度對(duì)外植體誘導(dǎo)率的影響

2.2 增殖培養(yǎng)基不同濃度激素處理對(duì)幼苗生長(zhǎng)的影響

從表5 看出，使用0.5 mg/L 的6-BA，增殖系數(shù)隨著IBA 濃度增大而增大，IBA 濃度0.15mg/L時(shí)最大，達(dá)到4.15，但砧木苗出現(xiàn)卷葉現(xiàn)象；使用1.0 mg/L 的6-BA，增殖系數(shù)隨著IBA 濃度增大，出現(xiàn)先增大后降低的趨勢(shì)，IBA 濃度0.1 mg/L 時(shí)增殖系數(shù)最大，達(dá)到5.14，且砧木苗綠色、葉大，生長(zhǎng)較好；使用1.5 mg/L 的6-BA，增殖系數(shù)隨著IBA 濃度增大， 出現(xiàn)先降低又升高的趨勢(shì)，IBA濃度0.15 mg/L 時(shí)增殖系數(shù)最大，達(dá)到5.13，但出現(xiàn)?；绗F(xiàn)象，因此增殖培養(yǎng)基最佳激素濃度為1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA。

2.3 生根培養(yǎng)基不同濃度激素處理對(duì)幼苗生根的影響

從表6 看出，使用1.0 mg/L 的IAA，生根率隨著IBA 濃度增大而呈先升高后降低趨勢(shì)，而生根條數(shù)呈增大趨勢(shì)， 根長(zhǎng)呈先降低后增高的趨勢(shì)。 其中IBA 濃度1.0 mg/L 時(shí)生根率最高，為94.86%，IBA 濃度1.5 mg/L 時(shí)， 生根條數(shù)最多， 為6.86 條，IBA 濃度0.5 mg/L 時(shí)， 根長(zhǎng)最長(zhǎng)，為2.12 cm；使用1.5 mg/L 的IAA，生根率、生根條數(shù)隨著IBA 濃度增大而降低，IBA 濃度為0.5 mg/L 時(shí)，生根率達(dá)100%，生根8.26 條；IBA 濃度1.0 mg/L 時(shí)，根長(zhǎng)最長(zhǎng)；使用2.0 mg/L的IAA， 生根率隨著IBA 濃度增大而降低，而生根數(shù)、 根長(zhǎng)最大值出現(xiàn)在使用1.5 mg/L 的IBA 時(shí)，分別為7.48 條和2.21 cm。養(yǎng)基，增殖系數(shù)高達(dá)5.14；采用1/2MS+IAA 1.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L 生根培養(yǎng)基，生根率高達(dá)100%，根長(zhǎng)多超過(guò)2 cm，移栽成活率在90%以上。 通過(guò)連續(xù)啟動(dòng)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和移栽，可實(shí)現(xiàn)工廠化育苗，為蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)的更新發(fā)展提供資源基礎(chǔ)。

表5 6-BA 和IBA 濃度對(duì)AM1 砧木增殖系數(shù)和生長(zhǎng)狀態(tài)的影響

表6 IAA 和IBA 濃度對(duì)AM1 砧木生根的影響

3 討論

近幾年關(guān)于蘋(píng)果砧木的組培快繁常有報(bào)道，許多矮化砧木都成功獲得組培苗[2-4]。蘋(píng)果砧木組培快繁不同砧木類(lèi)型所需培養(yǎng)基中各種激素濃度配比不相同。本方法采用MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L 啟動(dòng)培養(yǎng)基，成活率高達(dá)80%以上，可建立有效的組培苗群體；采用MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖30.0 g/L+瓊脂6.0 g/L 增殖培