王厚臣 丁元振 滕程光 王黎明 隋秀奇

（1 煙臺(tái)現(xiàn)代果業(yè)科學(xué)研究院，煙臺(tái)264003；2 山東省諸城市桃林鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，諸城262222）

目前世界上共發(fā)現(xiàn)30 余種可侵染蘋果的病毒， 已經(jīng)明確可給蘋果造成危害的有16 種。一旦感染病毒病，蘋果樹全身帶有病毒，終生不愈，并且具有傳染性。病毒不但破壞樹體的正常生理機(jī)能，還造成果實(shí)產(chǎn)量和品質(zhì)下降，甚至引起果樹死亡， 嚴(yán)重影響蘋果優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)效益的提高。

1 蘋果病毒病的種類和傳播途徑

蘋果病毒病根據(jù)危害特點(diǎn)可分顯性病毒病和潛隱性病毒病。 顯性病毒病有花葉病、綠皺果病、銹果病等，潛隱性病毒病有褪綠葉斑病、蘋果莖溝病、蘋果莖痘病等。

病毒傳播途徑有：通過昆蟲或螨類傳播，通過帶毒植株的汁液傳播， 果樹根系接觸直接傳播，通過嫁接傳播和果園使用工具傳播等。

2 雙脫毒苗木的生產(chǎn)過程

目前國際上尚無良藥、良法防控病毒病，最簡單有效的辦法是使用脫毒苗木。 采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，對(duì)‘煙富8’蘋果種條和砧木進(jìn)行病毒脫除，再經(jīng)過培養(yǎng)繁育獲得雙脫毒苗木。雙脫毒的‘煙富8’蘋果苗木抗逆性強(qiáng)，成花容易，結(jié)果早，果品質(zhì)量高，豐產(chǎn)潛力大。

2.1 取樣與消毒

首先將砧木（如M9T337、M26、八棱海棠）和‘煙富8’接穗的枝條進(jìn)行消毒處理，放到有營養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶內(nèi)讓其生長發(fā)芽， 發(fā)芽后采頂芽進(jìn)行消毒接種。

2.2 剝?nèi)∏o尖與接種

在超凈工作臺(tái)上， 用解剖刀仔細(xì)剝離幼葉至裸露的生長點(diǎn)，用刀尖切下帶1～2 個(gè)葉原基的生長點(diǎn)，將切下的莖尖轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成無菌瓶苗。

2.3 進(jìn)行高溫鈍化

將無菌瓶苗放在38～40 ℃的智能人工氣候箱里生長30 d 左右，使蘋果苗內(nèi)含有的各種病毒在高溫下逐漸鈍化，失去活性。

2.4 進(jìn)行二次莖尖剝離

經(jīng)過高溫鈍化的無菌瓶苗已經(jīng)使病毒失去侵染能力， 對(duì)存活的無菌瓶苗進(jìn)行二次莖尖剝離處理，處理及消毒方法同第1 次，再次剝離，得到0.2～1.0 mm 長的莖尖，可達(dá)到無毒狀態(tài)。

2.5 無毒莖尖進(jìn)行接種快速繁殖

經(jīng)過脫毒的莖尖在無菌接種室內(nèi)的超凈工作臺(tái)上，接種到快繁培養(yǎng)基內(nèi)進(jìn)行快速繁殖。擴(kuò)繁瓶苗培養(yǎng)周期為1 個(gè)月，1 個(gè)月后再進(jìn)行分瓶接種。這種繁殖方式是在無菌、密閉的情況下進(jìn)行，不用擔(dān)心外界病毒傳染源的感染。

2.6 進(jìn)行生根培養(yǎng)

無毒瓶苗繁殖到一定數(shù)量后，再把獨(dú)立的單株接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)。 生根瓶苗在無菌培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)15～18 d，根生長到1 cm 左右，完成生根培養(yǎng)。

2.7 溫室馴化成穴盤苗

脫毒苗再轉(zhuǎn)移到溫室進(jìn)行馴化鍛煉， 瓶苗馴化結(jié)束后，將瓶苗移栽到穴盤內(nèi)，經(jīng)過一定時(shí)間的生長發(fā)育，完全適應(yīng)自然環(huán)境。

2.8培養(yǎng)原始1代脫毒砧木、品種接穗，建采穗圃和培育成苗

已適應(yīng)自然環(huán)境的‘煙富8’和M9T337 穴盤苗，直接定植到防蟲網(wǎng)室中，建立原始1 代無毒苗木采穗圃。

經(jīng)過溫室馴化鍛煉的八棱海棠、M9T337等砧木穴盤苗，直接移栽到苗圃中。在苗圃生長50 d 左右，就可以取防蟲網(wǎng)室中的脫毒‘煙富8’接穗進(jìn)行嫁接（嫁接工具要消毒），這樣嫁接成活的苗子實(shí)現(xiàn)了砧木、接穗雙脫毒的目的。經(jīng)過精心培養(yǎng)，秋天落葉后出圃。

3 雙脫毒苗木果園管理事項(xiàng)

利用雙脫毒苗木建設(shè)的果園， 在整個(gè)管理期，要注意修剪等工具專用，使用前工具用酒精浸泡或采用燒烤等方法徹底消毒， 嚴(yán)禁與非脫毒苗木串用。因品種改良需要高接換頭的，應(yīng)選用無病毒接穗， 切不可盲目嫁接來路不明的接穗。同時(shí)，注意一次性選好品種，避免多次高接，減少傳染。