杜改梅 胡志華 韓正強(qiáng) 張玉紅 晏文梅 方光遠(yuǎn) 蔣加進(jìn)

摘要：旨在探討中藥添加劑對(duì)高脂飲食小鼠脂肪沉積的影響。將30只健康雄性昆明小鼠隨機(jī)分為3組：對(duì)照組、高脂飲食組（HF）和高脂飲食+中藥組（HC），采用高脂飼料喂養(yǎng)的方法建立肥胖小鼠模型，并通過(guò)持續(xù)給藥觀察中藥添加劑對(duì)肥胖小鼠脂肪沉積的影響。試驗(yàn)期為6周，試驗(yàn)結(jié)束后處死小鼠，測(cè)量小鼠體質(zhì)量、體脂含量和肝臟質(zhì)量。結(jié)果表明，2周時(shí)HF組和FC組小鼠的體質(zhì)量顯著高于對(duì)照組，5周時(shí)FC組小鼠的體質(zhì)量出現(xiàn)下降，并與對(duì)照組相比差異不顯著;6周時(shí)，F(xiàn)C組小鼠的腎周脂肪和腸系膜脂肪含量均顯著低于HF組，而與對(duì)照組相比差異不顯著;肝臟指數(shù)沒(méi)有組間差異性。由結(jié)果可知，中藥添加劑有效降低了高脂飲食小鼠的脂肪沉積量。

關(guān)鍵詞：中藥添加劑;肥胖;小鼠;脂肪沉積;高脂飲食

中圖分類號(hào)： S858.91;S853.7 ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2019）16-0183-03

收稿日期：2018-06-10

基金項(xiàng)目：江蘇高?！扒嗨{(lán)工程”項(xiàng)目。

作者簡(jiǎn)介：杜改梅（1976—），女，山西朔州人，博士，教授，主要從事中獸醫(yī)學(xué)、營(yíng)養(yǎng)和消化生理方面的研究。

目前，隨著人們對(duì)膳食結(jié)構(gòu)要求和保健意識(shí)的逐漸提高，消費(fèi)者對(duì)肉品質(zhì)有了更高的要求。大量動(dòng)物脂肪的形成不僅僅影響飼料的利用率，降低動(dòng)物肉品質(zhì)，還會(huì)對(duì)消費(fèi)者的健康造成嚴(yán)重的危害。隨著人們生活水平的不斷提高，肉蛋奶的食用量日劇增加，過(guò)多脂肪的攝入是導(dǎo)致人類肥胖癥和心血管疾病發(fā)病率逐年上升的重要因素。肥胖人群是脂肪肝、糖尿病、高血脂、心腦血管疾病的高危人群，脂肪不僅對(duì)人體健康具有致病性，還具有致死性[1-3]。因此，如何降低體脂含量、促進(jìn)脂肪的分解已成為目前研究人員和消費(fèi)者共同關(guān)注的熱點(diǎn)，也是降低高脂血癥的方法之一。近年來(lái)，在臨床上控制動(dòng)物脂肪沉積的方法有諸多報(bào)道，但多以抗生素和應(yīng)用激素等藥物為主，雖然療效確切，但作用途徑單一，并且大量抗生素的殘留對(duì)人體造成了大量不良影響[4-7]。中獸藥理論在調(diào)控脂肪沉積方面能夠通過(guò)多途徑和多靶點(diǎn)的優(yōu)勢(shì)發(fā)揮廣泛作用，效果較好，天然，毒副作用小，容易得到消費(fèi)者的接受。本研究旨在探討中藥添加劑對(duì)高脂飲食小鼠體脂沉積的調(diào)節(jié)作用，為研究開發(fā)具有確切降脂作用的中藥添加劑提供有效的理論支撐和科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

健康雄性昆明小白鼠30只，28日齡，體質(zhì)量為19～22 g。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 中藥復(fù)方湯劑的制備

中藥復(fù)方制劑由金陵科技學(xué)院中獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室配制。藥物為澤瀉、山楂、甘草等按一定比例組成中藥復(fù)方，煎煮使其最終濃度為1 mg/mL，離心得到藥物上清液，高壓裝瓶備用。

1.2.2 動(dòng)物試驗(yàn)

小鼠試驗(yàn)前先適應(yīng)性飼喂1周，按照體質(zhì)量平均分為3組，每組10只，分別為對(duì)照組（CON），飼喂正常小鼠飼料和自來(lái)水;高脂飲食組（HF），飼喂含20%豬油的高脂肪飼料和飲用5%蔗糖水;高脂飲食+中藥組（FC），飼喂與HF組相同的高脂飼料和蔗糖水，3周后開始灌服中藥復(fù)方添加劑，1次/d，連服3周。試驗(yàn)期為6周。采用自然通風(fēng)、自由采食和飲水的方式飼喂小鼠。每周測(cè)量體質(zhì)量1次，試驗(yàn)結(jié)束后處死所有小鼠，分離并稱量小鼠腎周脂肪、腸系膜脂肪和肝臟質(zhì)量。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)，差異顯著性檢驗(yàn)采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和單因子方差分析[One-Way ANOVA，LSD（最小顯著性差異法）]。

2 結(jié)果與分析

2.1 肥胖模型小鼠的日增質(zhì)量

由圖1可知，飼喂高脂飼料和5%蔗糖水3周后，HF組和FC組小鼠的平均日增質(zhì)量均顯著高于對(duì)照組（P<0.05），且分別是對(duì)照組小鼠平均日增質(zhì)量的2.02倍和1.86倍。在肥胖模型建立試驗(yàn)中觀察發(fā)現(xiàn)，HF組和FC組的所有小鼠皮毛光滑，體型肥胖。

2.2 中藥添加劑對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響

由圖2可知，在飼喂高脂飲食后1周后開始，HF組小鼠的體質(zhì)量一直呈穩(wěn)定升高的趨勢(shì)，且在2～6周均顯著高于對(duì)照組。FC組3周后開始灌服中藥添加劑，小鼠體質(zhì)量出現(xiàn)下降，并從試驗(yàn)后4周開始顯著低于HF組，但在4周時(shí)仍顯著高于對(duì)照組。5周后，F(xiàn)C組小鼠的體質(zhì)量顯著低于HF組，但與對(duì)照組間差異不顯著。這表明中藥添加劑對(duì)小鼠的體質(zhì)量有明顯的下調(diào)作用。

2.3 中藥添加劑對(duì)高脂飲食小鼠腎臟脂肪質(zhì)量的影響

由圖3可知，給高脂飲食小鼠灌服中藥后，F(xiàn)C組小鼠的腎周脂肪質(zhì)量出現(xiàn)下降趨勢(shì)，且與HF組相比顯著降低 0.07 g，與對(duì)照組差異不顯著。這表明高脂飲食建立的小鼠模型中脂肪質(zhì)量的確有顯著升高，且本研究的中藥添加劑對(duì)腎周脂肪的沉積具有明顯的抑制作用。

2.4 中藥添加劑對(duì)高脂飲食小鼠腸系膜脂肪質(zhì)量的影響

由圖4可知，給小鼠灌服中藥后，F(xiàn)C組小鼠的腸系膜脂肪質(zhì)量顯著低于HF組，是HF組的67%。這表明高脂肪飼料可以顯著提高動(dòng)物體內(nèi)脂肪含量，而該中藥添加劑對(duì)脂肪具有顯著的動(dòng)員降解作用。FC組與對(duì)照組相比，差異不顯著，推測(cè)這可能與藥物作用的時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān)，延長(zhǎng)中藥的作用時(shí)間有可能出現(xiàn)FC脂肪質(zhì)量下降更明顯的情況，這有待于后續(xù)進(jìn)行藥物最佳灌服時(shí)間的研究探索。

2.5 中藥添加劑對(duì)高脂飲食小鼠肝臟指數(shù)的影響

由圖5可知，與對(duì)照組相比，HF組和FC組小鼠的肝臟指數(shù)均沒(méi)有發(fā)生顯著變化，這表明高脂飲食沒(méi)有影響到肝臟功能，且中藥添加劑對(duì)小鼠肝臟沒(méi)有毒副作用。

3 討論

肥胖是一種以脂肪過(guò)度累積為特征的慢性代謝疾病，是導(dǎo)致心腦血管病的高危因素，會(huì)對(duì)人類的健康造成較大危害[8-9]。肥胖能夠引發(fā)糖尿病、?脂肪肝、心血管疾病， 甚至癌癥等多種疾病[10]。大量攝入脂肪是誘發(fā)肥胖的重要原因之一，而目前消費(fèi)者餐桌上的肉蛋奶已成為一日三餐的主食品，因此，降低動(dòng)物脂肪、提高動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量已成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)問(wèn)題。建立肥胖動(dòng)物模型是研究調(diào)節(jié)脂肪沉積的中藥添加劑的前提條件，只有成功建立肥胖動(dòng)物模型才能保證后續(xù)研究的進(jìn)一步開展。本研究通過(guò)給小鼠飼喂高脂飼料和飲用5%蔗糖水，3周后高脂飲食組小鼠的平均日增質(zhì)量升高為對(duì)照組的2.02倍，體質(zhì)量也顯著高于對(duì)照組，證明肥胖小鼠模型建立成功，這與之前的一些研究結(jié)果[11-12]相一致。飼喂高脂飼料制造肥胖模型的機(jī)制是飼喂高脂飼料后，動(dòng)物能量攝入過(guò)剩，從而發(fā)展成肥胖，這正與人類肥胖具有很好的可比性。高脂飼料的組方有很多種，主要由油脂類物質(zhì)和飼料相混合而成[13]，該方法為今后的降脂研究奠定了重要基礎(chǔ)。

研究表明，抗生素、應(yīng)用性激素和脂肪膜抗血清均有較好的降低動(dòng)物脂肪沉積的作用[14-16]。但由于這些方法均存在一定的弊端，因此目前更多有關(guān)調(diào)節(jié)脂肪沉積的研究集中于天然無(wú)毒副作用的中藥上。中藥調(diào)節(jié)脂肪沉積的研究較多，但由于中藥的配伍禁忌原則，不同復(fù)方的調(diào)節(jié)脂肪的作用及機(jī)制各不相同，效果也各有差異。研究證實(shí)，高密度脂蛋白（HDL）升高能夠調(diào)節(jié)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)，可將肝臟外組織的膽固醇運(yùn)送至肝臟進(jìn)行代謝，促進(jìn)脂質(zhì)排泄，防止膽固醇在肝臟外組織或血管壁堆積而形成冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病[17]。葛根芩連湯對(duì)大鼠血脂含量具有顯著的降低作用，不同劑量的葛根芩連湯均能顯著降低大鼠血清總膽固醇（TC）、低密度脂層蛋白膽固醇（LDL-C）水平，升高高密度脂層蛋白膽固醇（HDL-C）水平[18]。筆者所在課題組曾研究發(fā)現(xiàn)，山楂等中藥復(fù)方制劑可以有效提高血清中游離脂肪酸的含量[19]。蟲草素可通過(guò)升高HDL有效清除大鼠血清中高濃度的TG和LDL，促進(jìn)外周脂肪的分解代謝，減少體內(nèi)白色脂肪的堆積[20]。本研究以中醫(yī)藥學(xué)理論和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論為指導(dǎo)，根據(jù)藥物的性能和配伍禁忌原則，在前期研究的基礎(chǔ)上，改進(jìn)了調(diào)節(jié)脂肪沉積的中藥復(fù)方。研究發(fā)現(xiàn)，該中藥添加劑能有效地降低高脂飲食導(dǎo)致的肥胖小鼠的體脂質(zhì)量，且對(duì)肝臟指數(shù)沒(méi)有影響，該復(fù)方中澤瀉具有重要的發(fā)揮動(dòng)員脂肪分解的作用，山楂通過(guò)活血化瘀等作用參與動(dòng)物體內(nèi)脂肪代謝的調(diào)節(jié)，與澤瀉和其他藥物協(xié)同完成脂肪沉積的調(diào)控，而上述研究中蟲草素通過(guò)改善新陳代謝、調(diào)血脂等作用來(lái)達(dá)到降解脂肪的作用，葛根芩連湯通過(guò)葛根素調(diào)節(jié)脂肪代謝，黃芩和黃連清熱燥濕，配伍使用可降低血清TC水平[18，20]。

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