戴艷枝 王曉華 劉秋玲 張淑華 周云英 文麗丹 楊海玉

[摘要]目的 研究白細胞介素-1β（IL-1β）、白細胞介素8（IL-8）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）與心房顫動（房顫）伴凝血功能異常的關(guān)系。方法 選取2016年1月～2017年12月我院收治的42例房顫患者作為房顫組，其中陣發(fā)性房顫14例，持續(xù)性房顫28例，另選取同期門診體檢的20例健康者作為對照組。采用酶聯(lián)免疫法檢測各組的血漿IL-1β、IL-8、TNF-α水平，分析其與房顫類型、凝血功能參數(shù)及血常規(guī)參數(shù)的相關(guān)性。結(jié)果 房顫組與對照組的IL-1β水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;房顫組的IL-8、TNF-α水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。陣發(fā)性房顫組、持續(xù)性房顫組、對照組的IL-1β水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;陣發(fā)性房顫組、持續(xù)性房顫組的IL-8及TNF-α水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。不同凝血酶原時間、國際標準化比值情況下的IL-1β、IL-8、TNF-α水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;凝血酶時間>16 s患者的IL-1β、TNF-α水平均明顯高于凝血酶時間≤16 s（正常）患者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。IL-1β、TNF-α水平與白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血小板計數(shù)、中性粒細胞百分比、淋巴細胞百分比、單核細胞百分比均無相關(guān)性（P>0.05）;IL-8水平與淋巴細胞百分比成正相關(guān)（r=0.314，P<0.05）。結(jié)論 IL-8及TNF-α水平在房顫患者中增高，提示其可能與房顫發(fā)生相關(guān);IL-1β、TNF-α水平增高與房顫伴凝血功能異常相關(guān)。

[關(guān)鍵詞]白細胞介素-1β;白細胞介素8;腫瘤壞死因子-α;心房顫動;凝血功能

[中圖分類號] R541.75? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-4721（2019）8（b）-0004-04

[Abstract] Objective To study the relationship between interleukin-1β （IL-1β）， interleukin-8 （IL-8）， tumor necrosis factor-α （TNF-α） and atrial fibrillation with abnormal coagulation function. Methods A total of 42 patients with atrial fibrillation admitted to our hospital from January 2016 to December 2017 were selected as the atrial fibrillation group， including 14 patients with paroxysmal atrial fibrillation， 28 patients with persistent atrial fibrillation， and 20 healthy subjects who underwent physical examination at the same time were selected as the control group. The levels of IL-1β， IL-8 and TNF-α in plasma were detected by enzyme linked immunosorbent assay， and their correlation with atrial fibrillation type， coagulation function parameters and blood routine parameters were analyzed. Results There was no significant difference in IL-1β level between the atrial fibrillation group and the control group （P>0.05）. The levels of IL-8 and TNF-α in the atrial fibrillation group were significantly higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. There was no significant difference in IL-1β level between paroxysmal atrial fibrillation group， persistent atrial fibrillation group and control group （P>0.05）. The levels of IL-8 and TNF-α in paroxysmal atrial fibrillation group and persistent atrial fibrillation group were significantly higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. There were no significant differences in the levels of IL-1β， IL-8 and TNF-α between different prothrombin time and international normalized ratio （P>0.05）. The levels of IL-1β and TNF-α in patients with thrombin time >16 s were significantly higher than those with thrombin time ≤16 s （normal）， and the differences were statistically significant （P<0.05）. There was no correlation between IL-1β， TNF-α levels and white blood cell count， red blood cell count， platelet count， neutrophil percentage， lymphocyte percentage， and monocyte percentage （P>0.05）. The IL-8 level was positively correlated with lymphocyte percentage （r=0.314， P<0.05）. Conclusion The elevated levels of IL-8 and TNF-α in patients with atrial fibrillation suggest that they may be related to the occurrence of atrial fibrillation， and the elevated levels of IL-1β and TNF-α are related to the abnormal coagulation function in patients with atrial fibrillation.

[Key words] Interleukin-1β; Interleukin-8; Tumor necrosis factor-α; Atrial fibrillation; Coagulation function

心房顫動（簡稱房顫）是臨床上常見的一種心律失常，由于心房不規(guī)則顫動易產(chǎn)生左心房血栓，導致體循環(huán)栓塞、腦卒中等并發(fā)癥，嚴重者甚至危及生命，具有高發(fā)病率、高致殘率、高致死率等特點。近年來，一些研究顯示炎癥過程與房顫的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，流行病學調(diào)查、病例-對照研究、組織學研究以及抗炎藥物治療都為證實炎癥與房顫的關(guān)系提供了充分證據(jù)[1-8]。目前，有研究者提出假說，認為房顫發(fā)生的血栓前狀態(tài)（即血液高凝狀態(tài)）與炎癥相關(guān)，同時也是腦卒中和血栓栓塞發(fā)生的風險因素[9]。已有研究證實房顫患者血漿炎性因子水平增高并伴有血液黏性增高，支持房顫過程中炎性狀態(tài)的存在，而且炎性指標的改變與血栓前狀態(tài)相關(guān)，并提示預后不佳[9-11]。本研究通過選擇符合入選標準的房顫患者及健康對照者，采集其外周血檢測血漿炎性標志物白細胞介素-1β（IL-1β）、白細胞介素8（IL-8）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的水平變化，并分析炎性因子水平變化與凝血功能參數(shù)及血常規(guī)參數(shù)的相關(guān)性，為進一步闡明炎癥與房顫的關(guān)系提供臨床依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年1月～2017年12月我院收治的42例房顫患者作為房顫組，男20例，女22例;年齡43～79歲，平均（61.00±8.40）歲。另選取同期門診體檢的20例健康者作為對照組，男11例，女9例;年齡40～78歲，平均（57.00±10.60）歲。房顫組與對照組的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。房顫組納入標準：符合中國心房顫動治療指南（2006年修訂版）診斷標準[12]。排除標準：急性冠脈綜合征、近期感染、嚴重肝腎功能不全、惡性腫瘤、3個月內(nèi)外科手術(shù)及腦卒中患者。對照組納入標準：心功能正常的竇性心律健康者。參照美國心臟病學學會/美國心臟協(xié)會/歐洲心臟病學學會（ACC/AHA/ESC）指南，將房顫組患者分為陣發(fā)性房顫組（n=14）及持續(xù)性房顫組（n=28）。陣發(fā)性房顫是指有房顫發(fā)作，發(fā)作持續(xù)時間<7 d，且24～48 h內(nèi)可自行轉(zhuǎn)復;持續(xù)性房顫是指房顫持續(xù)時間≥7 d，未經(jīng)處理不能自行轉(zhuǎn)復。所有患者常規(guī)進行詳細的病史采集及體格檢查，檢測血、尿常規(guī)，常規(guī)血生化檢查、心電圖、胸部X線和心臟彩超等。本研究已通過醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，入選對象均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1主要實驗試劑? 用于酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）檢測的IL-1β試劑盒（KGEMC003-1）、IL-8試劑盒（KGEMC008-1）、TNF-α試劑盒（KGEMC103a-1）均購自南京凱基生物有限公司。

1.2.2 ELISA檢測血漿IL-1β、IL-8、TNF-α水平? 從肘靜脈抽取空腹靜脈血5 ml，置于EDTA抗凝管中，離心分離血漿-80℃保存。采用ELISA法檢測房顫組及對照組血漿炎性標志物IL-1β、IL-8、TNF-α的水平。具體操作方法參照試劑盒說明書，酶標儀450 nm測量吸光度（OD值）。

1.2.3凝血功能檢查? 患者入院時均接受凝血功能指標檢查，包括凝血酶原時間（正常范圍11～14 s）、凝血酶時間（正常范圍12～16 s）、國際標準化比值（正常范圍0.8～1.2）。

1.3觀察指標

比較房顫組與對照組及不同凝血功能參數(shù)（凝血酶原時間、凝血酶時間、國際標準化比值）的IL-1β、IL-8、TNF-α水平，并分析IL-1β、IL-8、TNF-α與房顫患者血常規(guī)參數(shù)（白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血小板計數(shù)、中性粒細胞百分比、淋巴細胞百分比、單核細胞百分比）的相關(guān)性。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析;不符合正態(tài)分布者轉(zhuǎn)換為正態(tài)分布后行統(tǒng)計學分析;相關(guān)性檢驗采用Pearson相關(guān)性分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1房顫組與對照組IL-1β、IL-8、TNF-α水平的比較

房顫組與對照組的IL-1β水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;房顫組的IL-8、TNF-α水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）（表1）。

2.2陣發(fā)性房顫組、持續(xù)性房顫組與對照組IL-1β、IL-8、TNF-α水平的比較

陣發(fā)性房顫組、持續(xù)性房顫組、對照組的IL-1β水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;陣發(fā)性房顫組、持續(xù)性房顫組的IL-8及TNF-α水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;陣發(fā)性房顫組與持續(xù)性房顫組的IL-1β、IL-8、TNF-α水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）（表2）。

2.3不同凝血功能參數(shù)情況下房顫患者IL-1β、IL-8、TNF-α水平的比較不同凝血酶原時間、國際標準化比值情況下的IL-1β、IL-8、TNF-α水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;凝血酶時間>16 s患者的IL-1β、TNF-α水平均明顯高于凝血酶時間≤16 s（正常）患者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但兩者的IL-8水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）（表3）。

3討論

研究表明炎癥在房顫的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮了重要作用，多種炎性標志物與房顫的發(fā)生相關(guān)，并且抗炎治療有利于抑制房顫發(fā)生及減少房顫持續(xù)狀態(tài)[13-16]。本研究檢測了42例房顫患者血漿IL-1β、IL-8及TNF-α水平，以期分析上述炎性因子水平變化與房顫發(fā)生的關(guān)系。IL-1包括IL-1α和IL-1β兩種類型，由活化的巨噬細胞產(chǎn)生，在免疫應答和組織修復中發(fā)揮作用。本研究結(jié)果提示，房顫組與對照組的IL-1β水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;陣發(fā)性房顫組與持續(xù)性房顫組的IL-1β水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。IL-8又稱為趨化因子CXCL8，是趨化因子家族成員之一，主要由單核-巨噬細胞產(chǎn)生，通過結(jié)合IL-8受體α和β對中性粒細胞發(fā)揮細胞趨化作用，從而實現(xiàn)對炎癥反應的調(diào)節(jié)。本研究結(jié)果顯示，房顫組的血漿IL-8水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但不同類型房顫組的IL-8水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），提示IL-8水平變化可能與房顫發(fā)生的誘因相關(guān)。TNF-α是一種主要由單核-巨噬細胞產(chǎn)生的促炎細胞因子，參與調(diào)節(jié)炎癥反應和免疫反應過程。本研究結(jié)果顯示，房顫組的TNF-α水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但不同類型房顫組的TNF-α水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。提示炎性因子IL-8、TNF-α的水平變化可能與房顫發(fā)生相關(guān)，但其具體機制仍需進一步研究闡明。

腦卒中是房顫患者的嚴重并發(fā)癥之一，研究證實房顫血栓前期（血液高凝狀態(tài)）發(fā)生血栓栓塞的風險增高，并且炎癥與血栓形成和內(nèi)皮活化相關(guān)[9]。有研究者檢測了106例房顫患者和41例健康對照者的血液學指標，結(jié)果顯示，與健康對照者相比，房顫患者的血漿炎性因子水平、C反應蛋白及血液黏性均明顯增高，支持炎癥參與房顫發(fā)病過程的假說，同時也提示炎性指標改變與血液高凝狀態(tài)相關(guān)[10]。在此基礎(chǔ)上，筆者分析了不同凝血功能指標（凝血酶原時間、凝血酶時間、國際標準化比值）情況下房顫患者的血漿炎性因子水平變化，結(jié)果顯示，凝血酶時間>16 s患者的IL-1β、TNF-α水平均明顯高于凝血酶時間≤16 s（正常）患者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），提示凝血功能異常與炎癥相關(guān)。然而，關(guān)于炎性因子與房顫并發(fā)癥如腦卒中、血栓栓塞之間的關(guān)系仍需進一步研究闡明。

另外，本研究分析了炎性因子與房顫患者血常規(guī)參數(shù)的相關(guān)性，結(jié)果提示，IL-8水平與淋巴細胞百分比成正相關(guān)（P<0.05）。IL-8的生物學活性主要是趨化和激活中性粒細胞，對嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和淋巴細胞也有一定作用。中性粒細胞與IL-8接觸后發(fā)生形態(tài)變化，定向游走到反應部位并釋放一系列活性產(chǎn)物，這些作用可導致機體局部的炎癥反應并達到殺菌和細胞損傷的目的[17]。有研究在整合臨床生物標志應用基礎(chǔ)上，建立了一套全身炎癥評分標準，具體指標包括白蛋白、中性粒細胞與淋巴細胞比例、血小板與淋巴細胞比例、淋巴細胞與單核細胞比例，結(jié)果顯示，淋巴細胞與單核細胞比例升高與房顫的發(fā)病風險降低相關(guān)[18]。提示淋巴細胞百分比可能是用于評估房顫患者全身炎癥狀態(tài)的有效指標。

綜上所述，IL-8及TNF-α在房顫患者中水平增高，提示其可能與房顫發(fā)生相關(guān);IL-1β、TNF-α水平增高與房顫伴凝血功能異常相關(guān)。本研究對重要的炎性因子如IL-1β、IL-8、TNF-α與房顫的關(guān)系進行了探討，然而在這一領(lǐng)域仍然存在許多未知的問題需要進一步研究探索，如如何尋找新的有臨床意義的炎性標志物、如何進一步驗證炎性標志物對房顫發(fā)生的預測作用等。今后研究進一步闡明炎性因子在房顫發(fā)病機制中的作用，可為房顫的發(fā)病風險評估提供新的生物標志物。

[參考文獻]

[1]Qiu H，Ji C，Liu W，et al.Chronic kidney disease increases atrial fibrillation inducibility：involvement of inflammation，atrial fibrosis，and connexins[J].Front Physiol，2018，9（12）：1726.

[2]Tomomori S，Nakano Y，Ochi H，et al.Maintenance of low inflammation level by the ZFHX3 SNP rs2106261 minor allele contributes to reduced atrial fibrillation recurrence after pulmonary vein isolation[J].PLoS One，2018，13（9）：e0203281.

[3]Im SI，Heo J，Kim BJ，et al.Impact of periodontitis as representative of chronic inflammation on long-term clinical outcomes in patients with atrial fibrillation[J].Open Heart，2018， 5（1）：e000708.

[4]Stieger P，Rana OR，Saygili E，et al.Impact of internal and external electrical cardioversion on cardiac specific enzymes and inflammation in patients with atrial fibrillation and heart failure[J].J Cardiol，2018，72（2）：135-139.

[5]Lau DH，Nattel S，Kalman JM，et al.Modifiable risk factors and atrial fibrillation[J].Circulation，2017，136（6）：583-596.

[6]Van Wagoner DR，Chung MK.Inflammation，inflammasome Activation，and atrial fibrillation[J].Circulation，2018，137（20）：2243-2246.

[7]Sazonova SI，Ilushenkova JN，Batalov RE，et al.Plasma markers of myocardial inflammation at isolated atrial fibrillation[J].J Arrhythm，2018，34（5）：493-500.

[8]Korantzopoulos P，Letsas KP，Tse G，et al.Inflammation and atrial fibrillation：A comprehensive review[J].J Arrhythm，2018， 34（4）：394-401.

[9]Da Silva RM.Influence of inflammation and atherosclerosis in atrial fibrillation[J].Curr Atheroscler Rep，2017，19（1）：2.

[10]Conway DS，Buggins P，Hughes E，et al.Relationship of interleukin-6 and C-reactive protein to the prothrombotic state in chronic atrial fibrillation[J].J Am Coll Cardiol，2004，43（11）：2075-2082.

[11]Conway DS，Buggins P，Hughes E，et al.Prognostic significance of raised plasma levels of interleukin-6 and C-reactive protein in atrial fibrillation[J].Am Heart J，2004，148（3）：462-466.

[12]代表中華醫(yī)學會心電生理和起搏分會心房顫動治療專家工作組.心房顫動：目前的認識和治療建議（二）[J].中華心律失常學雜志，2006，10（3）：167-197.

[13]陶濤，王浩，郭豫濤，等.炎性因子在心房顫動中的作用研究進展[J].中華老年心腦血管病雜志，2015，17（11）：1215-1217.

[14]陳楚，魏美芳，潘閩.腫瘤壞死因子-α與心房顫動及左心房重構(gòu)的關(guān)系[J].南通大學學報（醫(yī)學版），2012，32（3）：185-187.

[15]Jabati S，F(xiàn)areed J，Liles J，et al.Biomarkers of inflammation，thrombogenesis，and collagen turnover in patients with atrial fibrillation[J].Clin Appl Thromb Hemost，2018，24（5）：718-723.

[16]Yin G，Xie R，You L，et al.Left atrial function，inflammation，and prothrombotic response after radiofrequency ablation for atrial fibrillation[J].J Chin Med Assoc，2018，81（5）：409-415.

[17]Kim CH.The greater chemotactic network for lymphocyte trafficking：chemokines and beyond[J].Curr Opin Hematol，2005，12（4）：298-304.

[18]Zhang H，Li J，Chen X，et al.Association of systemic inflammation score with atrial fibrillation：a case-control study with propensity score matching[J].Heart Lung Circ，2018，27（4）：489-496.

（收稿日期：2019-02-12? 本文編輯：任秀蘭）