河南省平頂山市中醫(yī)醫(yī)院(467000)樊振興
近年來(lái),非淋菌性陰道炎的發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì),主要以支原體和衣原體感染為主[1],它主要由解脲支原體和沙眼衣原體感染引起,嚴(yán)重影響人類的生活健康,是臨床婦科需要解決的一個(gè)棘手的問(wèn)題。因此,給臨床提供快速,準(zhǔn)確的診斷,對(duì)非淋球菌型泌尿系生殖道感染的患者予以積極有效的防治已成為當(dāng)務(wù)之急。通過(guò)對(duì)超高倍顯微與試劑培養(yǎng)法結(jié)果的比較,來(lái)探討超高倍顯微鏡在婦科生殖道感染性疾病診斷方面的臨床價(jià)值及應(yīng)用。
1.1 標(biāo)本來(lái)源 選取我院婦產(chǎn)科門診高度懷疑支原體、衣原體感染的患者220例,并且均為近一周內(nèi)未用過(guò)抗生素治療,年齡21~60歲的患者。
1.2 試劑與儀器 ①試劑:醫(yī)用生理鹽水;鄭州安圖綠科生物工程有限公司生產(chǎn)的生殖道沙眼衣原體檢測(cè)試劑盒和支原體培養(yǎng)試劑盒(UU),嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書操作。②儀器:上海復(fù)星實(shí)業(yè)有限公司生產(chǎn)的ACT-2000型超高倍顯微鏡成像系統(tǒng),放大倍數(shù)為12000倍,簡(jiǎn)稱超高倍顯微鏡。
1.3 方法 ①陰道分泌物采集:由婦產(chǎn)科醫(yī)生用無(wú)菌棉拭子擦干宮頸口,再用無(wú)菌棉拭子插入宮頸口3~4cm旋轉(zhuǎn)2~3次并停留30s,標(biāo)本分別用超高倍顯微鏡鏡檢測(cè)和試劑盒進(jìn)行培養(yǎng)分析。②顯微鏡鏡檢法:取裝有生理鹽水的分泌物標(biāo)本直接在潔凈的玻片上涂濕片,加蓋玻片。用超高倍顯微鏡放大倍數(shù)調(diào)制8000倍左右動(dòng)態(tài)觀察。發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞有支原體包囊附著或游離的支原體包囊(內(nèi)含不停泳動(dòng)的支原體)或白細(xì)胞或吞噬細(xì)胞內(nèi)有非常活躍的、不停泳動(dòng)的、形態(tài)上呈高度的多形性(球形、桿形、絲狀、分枝狀等)即判為支原體陽(yáng)性[2];若發(fā)現(xiàn)柱狀上皮細(xì)胞上有衣原體包涵體或游離的衣原體包涵體,形態(tài)呈圓形空泡狀,大小為白細(xì)胞的1/2,顏色為暗褐色,內(nèi)有數(shù)量不等的活躍跳動(dòng)的衣原體小粒,或明顯觀察到游離的包涵體釋放原體[3],即為衣原體陽(yáng)性。③支原體培養(yǎng):將無(wú)菌拭子采集的標(biāo)本插入培養(yǎng)基中,擠壓旋轉(zhuǎn)拭子數(shù)次,折斷拭子放入瓶中。放37℃孵育箱,24h觀察結(jié)果。培養(yǎng)基由橙黃色變?yōu)榧t色,透明清亮,判斷為陽(yáng)性。遇雜菌污染引起混濁變紅者不得報(bào)告為支原體陽(yáng)性。④衣原體檢驗(yàn)方法:取分泌物拭子加于反應(yīng)管中,攪拌3~5下,棄拭子,3000r/min離心10min。棄上清液,倒置于吸水紙上空干。向反應(yīng)管內(nèi)的沉淀物中加10滴顯色劑,搖勻,置(80±5)℃溫育15min,觀察顏色變化。
超高倍顯微鏡活體檢測(cè):陰道分泌物檢查到疑似支原體或衣原體感染感染者25例。陽(yáng)性檢出率為11.36%。25例疑似支原體或衣原體感染感染者的標(biāo)本用安圖生物檢驗(yàn)試劑進(jìn)行支原體和衣原體檢測(cè),檢測(cè)出支原體17例,檢測(cè)出衣原體2例,檢測(cè)出支原體和衣原體2例,陽(yáng)性率占總檢查人數(shù)的9.89%。見附表1、2。
附表1 超高倍顯微鏡檢測(cè)CT、UU結(jié)果
附表2 安圖生物檢驗(yàn)試劑檢測(cè)CT、UU結(jié)果
通過(guò)超高倍顯微鏡檢測(cè)和培養(yǎng)方法的對(duì)比檢驗(yàn),結(jié)果顯示超高倍顯微鏡法檢出的陽(yáng)性率結(jié)果略高于培養(yǎng)法。但超高倍顯微鏡具有操作簡(jiǎn)便、費(fèi)用低、檢測(cè)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn),為臨床診斷婦科疾病提供一種快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法。超高倍顯微鏡檢測(cè)對(duì)于有經(jīng)驗(yàn)的技師只須10min左右就能清晰地觀察到支原體在細(xì)胞內(nèi)或包囊內(nèi)作快速泳動(dòng),清晰觀察到衣原體包涵體或包涵體釋放原體,大大提高了檢測(cè)速度和準(zhǔn)確率。非常適合門診患者的初篩試驗(yàn),起到快速指導(dǎo)臨床診斷、用藥及療效觀察的作用。
總之,超高倍顯微鏡成像系統(tǒng)是能夠快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、敏感、特異性強(qiáng)地對(duì)泌尿生殖道支原體、衣原體感染進(jìn)行診斷檢測(cè)。