田海兵

奉賢區(qū)古華醫(yī)院（復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院在讀研究生）檢驗科，上海 201499

慢性乙型肝炎是一種嚴(yán)重危害人類健康的消化道疾病，慢性乙型肝炎（CHB）持續(xù)活動是導(dǎo)致肝功能障礙、肝硬化、肝癌的主要因素[1]。有效預(yù)測肝組織病理學(xué)變化對慢性肝炎的評估、治療指導(dǎo)和預(yù)后判斷具有重要意義[2]。經(jīng)皮肝穿刺法行肝活檢依然是肝病理學(xué)診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。該法最大的缺點是有創(chuàng)檢查，病人接受度不高，且重復(fù)性較差。因此，開發(fā)和評價預(yù)測肝組織病理學(xué)改變的無創(chuàng)指標(biāo)一直是慢性肝炎臨床和病理學(xué)研究的一個熱點[3]。近年來多數(shù)研究僅局限于乙肝病毒表面抗原（HBsAg）濃度和HBV-DNA水平來評價病毒活動情況，并未對e抗原和核心抗體濃度來預(yù)測肝組織病理學(xué)變化[4]。本課題主要是研究HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV-DNA定量檢測水平與肝組織病理學(xué)變化的相關(guān)性評價，現(xiàn)報告如下。

1 一般資料

1.1 病例選擇 本研究選擇2018年4月-2019年1月本院與公衛(wèi)中心收治的242例CHB患者。所有患者均符合2015年中華醫(yī)學(xué)會制定的《慢性乙型肝炎防治指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。其中HBeAg陽性患者120例，男70例，女50例，年齡13.5歲-71.4歲，平均年齡（38.7±8.5）歲；HBeAg陰性患者122例，男73例，女59例，年齡13.7歲-72.5歲，平均年齡（39.2±8.8）歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：具有血液系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌與代謝疾病、藥物性肝病、自身免疫性肝病、遺傳性肝病，接受干擾素、甾體激素類等藥物治療患者。

1.2 方法 病理診斷采用1秒鐘經(jīng)皮肝穿刺法行肝活檢，肝組織切片經(jīng)HE染色和網(wǎng)狀纖維染色，病理學(xué)分級包括G0-G4五級，分期包括S0-S4五期。利用鉑金埃爾默的全自動時間分辨免疫熒光儀定量檢測血清HBsAg、HBeAg、HBcAb濃度，對于超出線性范圍的病例進(jìn)行100倍、500倍及1,000倍稀釋，以得到精確的濃度值。HBV-DNA采用公衛(wèi)中心Bio-Rad lcyclerPCR系統(tǒng)檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用Medcalc 15.8軟件。血清HBsAg、HBeAg、HBcAb與血清HBV-DNA的相關(guān)性采用Pearson直線相關(guān)分析；與肝組織病理學(xué)分級和分期的相關(guān)性采用Spearman秩和相關(guān)分析；各相關(guān)系數(shù)之間差異比較采用Z檢驗。血清HBsAg、HBcAb預(yù)測肝組織病理狀態(tài)的效能評價采用ROC曲線法。

2 結(jié)果

2.1 HBeAg陽性與陰性患者之間HBsAg、HBV DNA和HBcAb差異 HBeAg陽性患者HBsAg、HBV DNA及HBcAb水平均高于HBeAg陰性患者，差異顯著（P＜0.05），見表1。

2.2 肝組織病理學(xué)分級、分期與血清HBsAg、HBeAg、HBcAb和HBV DNA間的相關(guān)性HBeAg陰性患者中，血清HBV DNA水平與肝組織病理學(xué)分期、分級呈正相關(guān)（P＜0.05）；HBeAg陽性患者中，血清HBsAg、HBV DNA、HBcAb及HBeAg水平與肝組織病理學(xué)分期、分級呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），見表2。

2.3 HBeAg陽性患者中血清HBsAg、HBeAg、HBcAb和HBV DNA在肝組織病理學(xué)分期、分級間差異 HBeAg陽性患者中血清HBsAg、HBcAb和HBeAg水平在不同病理學(xué)分級和分期之間存在明顯差異，且HBV DNA載量在在不同病理學(xué)分期之間存在明顯差異（P＜0.05），見表3。

2.4 HBeAg陰性患者中血清HBsAg和HBV DNA在肝組織病理學(xué)分期、分級間差異 HBeAg陰性患者中血清HBV DNA載量水平在不同病理學(xué)分級和分期之間存在明顯差異（P＜0.05），見表4。

2.5 HBeAg陽性血清HBsAg、HBeAg、HBcAb和HBV DNA診斷肝組織不同纖維化和炎癥AUROC比較 HBeAg陽性患者中，血清HBsAg、HBeAg、HBcAb和HBV DNA診斷嚴(yán)重炎癥和進(jìn)展期纖維化的AUROC均顯著大于參考線下面積，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表5。

2.6 HBeAg陰性血清HBsAg、HBeAg和HBV DNA診斷肝組織不同纖維化和炎癥AUROC比較 HBeAg陰性患者中，血清 HBV DNA 診斷非顯著炎癥及纖維化的AUROC 均顯著大于診斷參考線下面積，且HBV DNA大于 HBsAgAUROC面積，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表6。

3 討論

近十年來國內(nèi)外研究多集中于HBsAg定量水平和HBV-DNA水平來預(yù)測病毒活躍情況，ALT來預(yù)測肝功能損傷程度，較少有研究血清HBsAg、HBeAg、HBcAb定量水平來預(yù)測肝組織病理學(xué)變化的相關(guān)性[6]。由于乙肝病毒感染后患者血清HBsAg、HBeAg、HBcAb濃度值水平比較高，市面上主流儀器進(jìn)口化學(xué)發(fā)光儀以羅氏雅培國產(chǎn)發(fā)光儀安圖新產(chǎn)業(yè)為例僅僅只能定量檢測血清HBsAg濃度，其他4項以S/CO值為報告方式。鉑金埃爾默的全自動時間分辨免疫熒光法雖能五項定量檢測，但線性范圍比較窄，如HBsAg、HBeAg、HBcAb線性范圍分別為0.2-150 ng/mL、0.1-150 PEIU/mL、0.1-8 IU/mL，對于濃度值高的患者必須做稀釋才能得到較精確的數(shù)值，由于稀釋的工作量大，所以臨床一直忽略了兩對半定量檢測的價值[7]。

表1 HBeAg陽性與陰性患者之間HBsAg、HBV DNA和HBcAb差異（Mean±SD）

表2 肝組織病理學(xué)分級、分期與血清HBsAg、HBeAg、HBcAb和HBV DNA間的相關(guān)性

表3 HBeAg陽性患者中血清HBsAg、HBeAg、HBcAb和HBV DNA在肝組織病理學(xué)分期、分級間差異（Mean±SD）

表4 HBeAg陰性患者中血清HBsAg和HBV DNA在肝組織病理學(xué)分期、分級間差異（Mean±SD）

表5 HBeAg陽性血清HBsAg、HBeAg、HBcAb和HBV DNA診斷肝組織不同纖維化和炎癥AUROC比較

表6 HBeAg陰性血清HBsAg、HBeAg和HBV DNA診斷肝組織不同纖維化和炎癥AUROC比較

本研究發(fā)現(xiàn)，血清HBsAg、HBeAg、HBcAb濃度與HBV-DNA量有相關(guān)性，HBsAg、HBcAb濃度與肝組織病理學(xué)分級和分期有相關(guān)性；在HBeAg陽性患者呈顯著地負(fù)相關(guān)相關(guān)；血清HBsAg、HBcAb預(yù)測肝組織不同病理狀態(tài)的AUROC在HBeAg陽性患者分級中有顯著預(yù)測意義。其原因可能是HBeAg陽性和陰性CHB患者的發(fā)病和進(jìn)展機(jī)制不同；其中HBeAg陽性患者的免疫激活可能起因于機(jī)體免疫耐受的自發(fā)性解除，持續(xù)存在的免疫激活導(dǎo)致HBV復(fù)制及其抗原表達(dá)水平下降，同時伴隨肝組織進(jìn)行性損傷和纖維化進(jìn)展，直到實現(xiàn)免疫控制；而HBeAg陰性患者的免疫再激活可能起因于HBV復(fù)制及其抗原表達(dá)的機(jī)會性上升，反復(fù)出現(xiàn)的免疫再激活導(dǎo)致HBV復(fù)制及其抗原表達(dá)水平再下降，同時伴隨肝組織再損傷和纖維化再進(jìn)展，直到實現(xiàn)免疫清除[8,9]。

綜上所述，乙肝病毒核心抗體定量檢測可指導(dǎo)臨床醫(yī)生有效預(yù)測肝組織病理狀態(tài)，對評估CHB患者病情、指導(dǎo)治療和預(yù)后判斷具有重要意義。