韋鈺 曾慶倫 劉佳佳 謝艷林

摘要：為進(jìn)一步研究重組禽流感病毒二價(jià)滅活疫苗對(duì)融水香鴨的免疫效果，該研究選擇某養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖的14日齡融水香鴨120只，按隨機(jī)原則將其劃分為3個(gè)組別，第1個(gè)組別在14日齡進(jìn)行首次免疫接種，第2組融水香鴨在14日齡進(jìn)行第1次免疫接種，27日齡后進(jìn)行第2次強(qiáng)化免疫接種，對(duì)照組的40只融水香鴨不進(jìn)行免疫接種。研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)1組免疫21d后，H5免疫抗體平均滴度為5.90log2，合格率為85%，免疫28d后抗體滴度為7.05log2，抗體合格率為100%，但60d后平均滴度逐步下降到5.95log2，抗體合格率為100%。第2組融水香鴨進(jìn)行2次強(qiáng)化免疫接種，28日齡平均抗體滴度為7.20log2，合格率為100%，60日齡抗體滴度能維持在較高水平為7.20log2，抗體合格率同樣為100%。由此可得重組禽流感病毒二價(jià)滅活疫苗能有效刺激鴨子產(chǎn)生免疫保護(hù)抗體，適用于融水香鴨的免疫，但為提高免疫效果，建議對(duì)鴨子進(jìn)行二次免疫。

關(guān)鍵詞：重組禽流感病毒二價(jià)滅活疫苗;融水香鴨;免疫效果

中圖分類(lèi)號(hào)：S852.4

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.09.008

0 引言

免疫接種是預(yù)防禽流感的有效措施，但由于禽流感病毒具有很多亞型，變異十分頻繁且不同，毒株間極容易通過(guò)基因互換而轉(zhuǎn)變形成新的亞型[1]。其中對(duì)家禽造成危害最嚴(yán)重的是H5亞型的多個(gè)變異分支。在進(jìn)行及禽流感免疫接種時(shí)，單一的禽流感疫苗難以對(duì)動(dòng)物進(jìn)行有效保護(hù)，給該種疾病防控造成極大難度，因此必須結(jié)合禽流感病毒的變異情況，及時(shí)調(diào)整免疫方案，確保所選擇的疫苗針對(duì)相應(yīng)的毒株。2017年我國(guó)針對(duì)禽流感變異情況，啟動(dòng)新型重組禽流感病毒二價(jià)滅活疫苗[2]，最開(kāi)始該疫苗沒(méi)計(jì)適用于雞群免疫，但由于鴨子對(duì)該種病毒也具有一定的敏感性，近年發(fā)生鴨子禽流感的病例呈現(xiàn)升高趨勢(shì)。為進(jìn)一步驗(yàn)證鴨子領(lǐng)域應(yīng)用該種疫苗的免疫效果，本次研究選擇融水香鴨為材料，利用重組禽流感病毒二價(jià)滅活疫苗對(duì)融水香鴨進(jìn)行免疫接種，檢測(cè)接種后的抗體水平，現(xiàn)將具體研究?jī)?nèi)容介紹如下。

1 材料與方法

1.1材料選取

該研究選取融水苗族白治縣種鴨場(chǎng)提供的融水香鴨120只，日齡為14日齡，臨床健康。在試驗(yàn)前采集鴨子的血清和棉簽拭子樣品進(jìn)行禽流感病毒檢測(cè)和母源抗體檢測(cè)，均符合要求，不存在患病情況。疫苗選擇使用重組禽流感病毒二價(jià)滅活疫苗，由融水縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提供，生產(chǎn)批號(hào)為01721089，生產(chǎn)日期為2018年8月22日。在進(jìn)行禽流感病毒抗體水平檢測(cè)中，主要應(yīng)用到禽流感病毒熒光檢測(cè)試劑盒，H5系禽流感病毒血凝和血凝抑制抗原，H7N9亞禽流感病毒血凝和血凝抑制抗原以及相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)陰性陽(yáng)性血清。

1.2試驗(yàn)方法

按隨機(jī)原則將選取的120只融水香鴨劃分成3個(gè)組別，每組40只，命名為免疫1組、免疫2組和對(duì)照組，按照農(nóng)業(yè)部關(guān)于禽流感的免疫程序，免疫1組融水香鴨在14日齡進(jìn)行第1次免疫注射，頸部皮下免疫注射，每只鴨子注射0.5mL。免疫2組融水香鴨在14日齡進(jìn)行第1次免疫接種后，間隔21d進(jìn)行第2次強(qiáng)化免疫接種，首次免疫，每只鴨子頸部皮下免疫注射0.5mL，第2次強(qiáng)化免疫頸部皮下注射1.5mL。對(duì)照組不進(jìn)行疫苗免疫接種。試驗(yàn)組和對(duì)照組的融水香鴨分別在免疫前Od和免疫后的第21、28、60天進(jìn)行采樣。對(duì)照組融水香鴨每次同步采集血液和拭子樣品，對(duì)照組、免疫1組和免疫2組每次采集血清樣品20份。選擇使用熒光檢測(cè)法采集到的樣品進(jìn)行禽流感病毒檢測(cè)，CT值<40判定為陰性。采集到的血清樣品應(yīng)用HA/HI檢測(cè)方法，分別對(duì)H5系亞型禽流感病毒抗體和H7N9禽流感病毒抗體進(jìn)行檢測(cè)，HI≥4log2表示免疫合格[3]。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

選擇使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，對(duì)免疫1組和免疫2組進(jìn)行t檢驗(yàn)差異分析。

2結(jié)果

2.1

H5系亞型禽流感病毒抗體檢測(cè)

結(jié)合表1數(shù)據(jù)可知，對(duì)照組的40只融水香鴨，在第0、21、28和60天，抗體合格率和平均抗體滴度均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。免疫1組的融水香鴨在第0、21、28和60天抗體合格率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，平均抗體滴度在0～28d呈現(xiàn)平穩(wěn)上升趨勢(shì)，到第60天后呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。免疫2組的融水香鴨進(jìn)行第1次免疫接種后，21、28、60d H5系亞型禽流感病毒抗體合格率和平均滴度均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，與免疫1組相比，28d和60 d平均滴度均高于免疫1組。但是免疫1組和免疫2組在免疫接種28 d的95%的置信區(qū)間1竽在交叉重疊，但2組之間對(duì)比不顯著（P>0.05），免疫第60天后2個(gè)免疫組別95%置信區(qū)間存在無(wú)交叉重疊，2組對(duì)比差異性極其顯著（P<0.01）。見(jiàn)表1。

2.2

H7N9亞禽流感病毒抗體檢測(cè)

對(duì)照組融水香鴨在第0、21、28和60天，H7N9亞禽流感病毒抗體合格率和平均抗體滴度均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。免疫1組在免疫接種疫苗的0～28d內(nèi)，抗體合格率和平均抗體滴度均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，但到第60天后呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。免疫2組的融水香鴨在免疫接種后的第21、28和60天H7N9亞禽流感病毒抗體合格率和平均抗體滴度均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，28d和60d的平均抗體滴度顯著高于免疫1組，但2組之間免疫28d的95%置信區(qū)間存在交叉重疊差異性不顯著（P>0.05），免疫第60天后2個(gè)免疫組別95%置信區(qū)間1竽在無(wú)交叉重疊，2組對(duì)比差異性極其顯著（P<0.01）。見(jiàn)表2。

3 結(jié)論

該研究選擇14日齡的融水香鴨進(jìn)行重組禽流感病毒二價(jià)滅活疫苗免疫試驗(yàn)，免疫試驗(yàn)結(jié)果顯示，免疫1組和免疫2組融水香鴨分別在免疫接種21d后，H5系亞型禽流感病毒抗體和H7N9亞禽流感病毒抗體合格率均達(dá)到85%以上，免疫第60天后，抗體合格率高達(dá)100%，這說(shuō)明本次所選擇的滅活疫苗對(duì)鴨子具有很好的免疫保護(hù)效果。但也應(yīng)該認(rèn)識(shí)到免疫60d后，鴨子的抗體水平呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，表明進(jìn)行1次免疫不能維持體內(nèi)足夠的保護(hù)能力，需要進(jìn)行第2次強(qiáng)化免疫接種。

參考文獻(xiàn)

[1] 李志賢，虞與理，禹婷婷.三黃雞免疫重組禽流感病毒（H5+H7）二價(jià)火活疫曲血清抗體檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告[J]獸醫(yī)導(dǎo)刊，2018（19）：69-71.

[2]謝向萌，韋顯凱，梁晟，等重組禽流感病毒（H5+H7）二價(jià)滅活疫曲在肉鵝中的應(yīng)用效果評(píng)價(jià)[J] 中國(guó)動(dòng)物檢疫，2018，35（8）：76-80.

[3]羅守保，李少炎，虞育紅.重組禽流感病毒（H5+H7）二價(jià)滅活曲接種鴨群免疫效果凋查報(bào)告[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)，2018（5）：76-77.