許金榜

摘 要：標(biāo)準(zhǔn)菌株是食品微生物實(shí)驗(yàn)室保證檢測質(zhì)量、確保檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠的標(biāo)準(zhǔn)參照物。為確保菌株活性、純度及穩(wěn)定性，應(yīng)對標(biāo)準(zhǔn)菌株保存期內(nèi)進(jìn)行期間核查。本文從標(biāo)準(zhǔn)菌株期間核查的原因、存在的問題及核查方法等方面進(jìn)行討論和總結(jié)，以期為食品微生物實(shí)驗(yàn)室做好標(biāo)準(zhǔn)菌株期間核查工作提供借鑒，保證食品微生物檢驗(yàn)過程的準(zhǔn)確有效。

關(guān)鍵詞：食品微生物;標(biāo)準(zhǔn)菌株;期間核查

Abstract：Standard strains can be used as a standard reference material in food microbiological laboratory to ensure the detection quality and the accuracy and reliability of inspection data. In order to ensure the activity， purity and stability of the strains， the period verification of the standard strains should be checked during the period of preservation. This paper discusses and summarizes the reasons， the existing problems and the verification methods on period verification of standard strains， in order to provide guidance for well performance of the period verification of the standard strains in food microbiological laboratory， and to ensure the accuracy and effectiveness in the food microbiological inspection process.

Key words：Food microorganism; Standard strains; Period verification

中圖分類號：TS207.4

近年來，各級市場監(jiān)管部門持續(xù)加大了對食品安全違法行為的打擊力度，據(jù)統(tǒng)計，每年查處違法案件20多萬件，食品安全形勢雖穩(wěn)中向好，但也暴露出食品安全問題仍然易發(fā)多變，其中微生物污染是食品安全問題的主要原因之一。因此，對食品進(jìn)行準(zhǔn)確可信的微生物檢驗(yàn)必不可少。在食品微生物檢驗(yàn)工作中，標(biāo)準(zhǔn)菌株是較為關(guān)鍵的要素，貫穿于檢驗(yàn)的各個環(huán)節(jié)，其在評價檢驗(yàn)方法、質(zhì)控培養(yǎng)基（試劑）、檢定儀器設(shè)備等方面發(fā)揮著非常重要的作用[1]。GB 4789.1-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 總則》要求實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存能滿足實(shí)驗(yàn)需要的標(biāo)準(zhǔn)菌株，并確保菌種性能的穩(wěn)定性和有效性[2]。因此，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有能力保存檢測用的標(biāo)準(zhǔn)菌株，且需按照相關(guān)要求對保存的標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行期間核查。本文對標(biāo)準(zhǔn)菌株期間核查的原因、存在的問題及核查方法等進(jìn)行探討和總結(jié)，以期為食品微生物實(shí)驗(yàn)室做好標(biāo)準(zhǔn)菌株期間核查工作提供借鑒，保證食品微生物檢驗(yàn)過程的準(zhǔn)確有效。

1 標(biāo)準(zhǔn)菌株期間核查的原因

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是具有足夠均勻和穩(wěn)定的特定特性的物質(zhì)，其特性適用于測量或標(biāo)稱特性檢查的預(yù)期用途。它既包括具有量的物質(zhì)，也包括具有標(biāo)稱特性的物質(zhì)。與標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)試劑不同，微生物標(biāo)準(zhǔn)菌株只有名稱和等級，不具有量值的性質(zhì)，屬于定性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)[3]?！稒z驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則》和《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》都對標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)提出了期間核查的要求，為標(biāo)準(zhǔn)菌株期間核查提供了政策依據(jù)[4-5]。

標(biāo)準(zhǔn)菌株是食品微生物檢驗(yàn)工作中的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，是一類特殊的、有生命、可追溯的標(biāo)準(zhǔn)參照物，存在被雜菌污染、退化或死亡的風(fēng)險[6]。標(biāo)準(zhǔn)菌株期間核查是指在菌種保存期間，針對標(biāo)準(zhǔn)菌株的培養(yǎng)特性（菌落特征、生化特征）和遺傳學(xué)特性是否穩(wěn)定所進(jìn)行的一項(xiàng)檢查鑒定工作。確保菌株活性、純度及穩(wěn)定性是標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)進(jìn)行期間核查的內(nèi)在要求，也是食品微生物檢測實(shí)驗(yàn)室保證檢測質(zhì)量、確保檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠的前提條件。

2 標(biāo)準(zhǔn)菌株期間核查中存在的問題

目前，大多數(shù)食品微生物檢測實(shí)驗(yàn)室均有配備滿足檢測需要的菌種，但由于保存能力參差不齊，存在設(shè)施條件落后、保存方法不當(dāng)、人員專業(yè)素養(yǎng)較低等問題，限制了菌種保存的時長。因此，定期對標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行期間核查十分必要，防止在檢測過程中無活菌可用，影響檢測結(jié)果的判斷及工作進(jìn)度。

在食品微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)GB 4789系列中所涉及的大多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)菌株，實(shí)驗(yàn)室可直接參照相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行確認(rèn)和期間核查，但某些標(biāo)準(zhǔn)菌株沒有相關(guān)的檢測國標(biāo)，使得實(shí)驗(yàn)室存在對標(biāo)準(zhǔn)菌株確認(rèn)和核查的工作不到位。如GB 4789.10-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)》中作為血漿凝固酶試驗(yàn)陰性對照的表皮葡萄球菌;GB 4789.28-2013《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》中作為結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂的質(zhì)控菌株——弗氏檸檬酸桿菌;GB 4789.30-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》中參與協(xié)同溶血試驗(yàn)的馬紅球菌，就沒有對應(yīng)的國標(biāo)檢驗(yàn)方法，因此，應(yīng)建立完整的菌種確認(rèn)和期間核查參考方法，保證菌種使用準(zhǔn)確無誤。

一般情況下，標(biāo)準(zhǔn)菌株期間核查與常規(guī)的標(biāo)準(zhǔn)菌株確認(rèn)方法及依據(jù)基本一致，但過程各有側(cè)重。期間核查不局限于單一方法，可使用較為多樣的方法進(jìn)行，如金黃色葡萄球菌的期間核查，可使用顯色培養(yǎng)基、3M紙片、全自動細(xì)菌鑒定儀等方法，與完全依據(jù)GB 4789.10-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)》相比，更為簡便快速，減少實(shí)驗(yàn)室期間核查工作量。