河南省新鄉(xiāng)市中醫(yī)院（453000）韓麗新

柴胡在中醫(yī)學上屬于一類常用的中藥，其性味涼且苦，可發(fā)揮解熱、抗菌、鎮(zhèn)靜、抗病毒(流感病毒)、抗肝損傷等功效[1]。據《中國藥典》記載，柴胡一般類型為狹葉柴胡或傘形科植物柴胡的干燥根[2]。目前，在化學成分分析、醫(yī)學、栽培技術等領域對柴胡的研究相對比較集中[3]，但鮮有報道通過顯微鑒別方法對不同產地柴胡的藥材質量進行研究，本文通過收集來自不同產地的柴胡樣品，以期通過顯微鑒別方法來評價柴胡藥材質量，為臨床上提供判定依據。

1 材料與試劑

1.1 材料 試驗設備器材：切片機(生產商：石家莊現代儀器儀表公司)，DGF-4A型立式電熱鼓風干燥箱(生產商：天津市泰斯特儀器公司)，電熱恒溫水浴鍋(生產商：北京科偉永興儀器公司)，萬用電爐(生產商：石家莊現代儀器儀表公司)，解剖刀，毛筆，鑷子，染色缸，酒精燈，玻片架。

1.2 試驗試劑 石蠟，二甲苯、無水乙醇、甲醛、冰乙酸，蕃紅染液、樹膠、固綠染液。

1.3 試驗藥材 于2017年1月～2018年1月收集了24個柴胡樣品。見附表1。

2 方法

（1）取材：洗凈收集的藥材，并去除雜質，以溫水將其軟化（約1h），最后切成段備用（約0.5～1cm）。（2）制蠟片：①軟化：先將小瓶編號，再將備好的藥材放入小瓶中，并記錄下來，之后倒入軟化劑封上（軟化24h）。②固定：再將固定液FAA倒入裝有材料的小瓶中（固定24h）。③脫水：先后以50%、70%和90%的酒精對其脫水2h、2h和1.5h，最后再以無水乙醇脫水1.5h。④透明：先后以25%和75%二甲苯(酒精稀釋)將藥材透明1h和0.5h，之后，再以無水二甲苯透明20min。⑤滲蠟：分別在37、45和55℃下進行滲蠟處理5h，2h和3h，保持在62℃時，2h換蠟1次。⑥包埋：使蠟盒中的蠟維持固態(tài)，將滲蠟處理完成的藥材放入蠟盒，靜置，直至蠟自然凝固。⑦切片和拷片：用切片機對樣品切橫切片（厚度9um），并將其在60℃拷2h。⑧染色：拷片過后的藥材先后在二甲苯(20min)，無水乙醇(15min)，95%乙醇(10min)，85%乙醇(8min)，70%乙醇(5min)中浸泡，最后將其置入翻紅染液中（浸泡一夜），之后再在酸性酒精（15min），85%乙醇（10min），95%乙醇（8min），固綠染液（2s），無水酒精(20min)和二甲苯（25min）中依次浸泡。⑨封片：染色完成后以樹膠對其封片。（3）在光學顯微鏡下對其顯微特征進行觀察記錄，并簡易繪制出其結構圖。

附表1 柴胡樣品

3 結果

顯微鑒別特征：產地為河北的柴胡大部分油管分布密集，排列較整齊，其中以石家莊市靈壽縣南營鄉(xiāng)的油管分布最密集；而產地為甘肅的部分市縣的柴胡油管分布相對較多，如甘肅隴西縣菜子鎮(zhèn)、甘肅策底米家梁和甘肅漳縣；產地為河南的柴胡的油管大部分分布比較疏散。山西產地的柴胡僅有部分市縣的油管分布多。

此外，柴胡產地在甘肅和河北的柴胡皂苷含量較高，而河南和山西所產的柴胡皂苷含量比較少。因此，我們認為甘肅和河北生產的柴胡質量較好，具體見附表2。

4 討論

在中藥鑒定中，顯微鑒定是一種常用手段，其能通過對藥材細胞形狀、組織構造、和成分特征進行觀察，從而實現對藥材真?zhèn)魏推焚|的鑒定[4][5]。該方法的特點是操作簡便、準確且快捷，并且可以配合其它鑒定分析方法，有效的將中藥鑒定質量提高[6]。

本實驗通過對不同產地的柴胡藥材進行分析，實現了從顯微、性狀，再到成分的多重指標控制，較傳統(tǒng)單一成分控制，有了新的突破，其在對中藥材質量的控制方面有著較強的合理性。本實驗在現有的樣品中得出柴胡質量與其纖維和油管數相關，但考慮到本研究樣品有限，研究內容僅僅考慮了柴胡的顯微和化學成分，因此需要結合藥理做進一步研究。