王長(zhǎng)錄，鄭昭芬，鄒瓊超，彭 翔，向媛媛，張 樂(lè)，唐銘翔

（湖南省人民醫(yī)院心血管內(nèi)科，湖南 長(zhǎng)沙 410000）

H型高血壓屬原發(fā)性高血壓，患者同型半胱氨酸（HCY）異常升高，炎性反應(yīng)嚴(yán)重，可導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化等而影響其他心腦血管系統(tǒng)，其中，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。ê?jiǎn)稱冠心?。┦浅Ｒ?jiàn)并發(fā)癥[1]。因此，及時(shí)有效地防治H型高血壓及心功能損傷具有重要意義。近年來(lái)多個(gè)研究發(fā)現(xiàn)，葉酸治療H型高血壓效果較好[2-3]。本研究中探討了葉酸對(duì)H型高血壓并冠心病模型大鼠炎性因子及心肌損傷的影響，旨在為葉酸輔助治療該病提供依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、儀器與試藥

動(dòng)物:SPF級(jí)自發(fā)性高血壓SD大鼠60只，雄性，8周齡；SPF級(jí)SD大鼠，雄性，8周齡，均購(gòu)自北京維通利華生物有限公司，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK（京）2012-0001。標(biāo)準(zhǔn)條件飼養(yǎng)，自由進(jìn)食、飲水，適宜溫度、濕度，人工黑暗／光照交替喂養(yǎng)。常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)飼料均購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。

儀器:7020型全自動(dòng)生化分析儀（日本Hitachi公司）；MC4000型大鼠無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)量系統(tǒng)（美國(guó)Harvard Apparatus公司）；5418R型離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf公司）。

試藥:異丙腎上腺素（華潤(rùn)雙鶴藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)為1102）；2%蛋氨酸（張家港市華昌藥業(yè)有限公司，批號(hào)為20145033）；阿托伐他汀鈣片（輝瑞制藥有限公司，批號(hào)為20151407）；馬來(lái)酸依那普利片（杭州默沙東制藥有限公司，批號(hào)為20160083）；葉酸片（常州制藥廠有限公司，批號(hào)為32023302）。

1.2 方法

分組與建模:60只大鼠隨機(jī)分為A組、B組和C組，各20只，均飲用含2%蛋氨酸水8周，以建立H型高血壓模型，大鼠血漿HCY＞10 μmol／L即為建模成功。取上述大鼠，腹部皮下注射異丙腎上腺素（30 mg／kg）1次，以建立H型高血壓并冠心病模型。建模成功后，A組和B組大鼠均灌胃阿托伐他?。刻?次，每次20 mg），馬來(lái)酸依那普利（每天1次，每次10 mg）；B組大鼠增加灌胃葉酸（每天1次，每次0.8 mg）；C組大鼠灌胃等體積0.9%氯化鈉溶液，每天1次，均連續(xù)2周。

觀察指標(biāo):取尾靜脈血2mL，4℃條件下靜置30min，3000 r／min離心10 min，采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血漿Hcy、炎性因子[血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素6（IL-6）]和心肌酶指標(biāo)[天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）和肌酸激酶（CK）]水平，試劑盒均購(gòu)自上海仁捷生物科技有限公司，按相關(guān)說(shuō)明書(shū)操作。采用大鼠無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)量系統(tǒng)測(cè)定大鼠血壓，將大鼠尾巴穿過(guò)尾套后將尾套連接換能器，36℃預(yù)熱15 min，待大鼠尾動(dòng)脈完全擴(kuò)張后給尾套加壓，待脈搏信號(hào)完全消失后緩慢放氣至脈搏信號(hào)恢復(fù)正常，連續(xù)測(cè)定3次取平均值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，行 χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以表示，行t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

與C組比較，A組和B組大鼠血漿Hcy，TNF-α，IL-6，AST，LDH，CK 水平及舒張壓（DBP）均顯著降低（P＜0.05）；與A組比較，B組大鼠上述指標(biāo)改善程度更優(yōu)（P＜0.05）。詳見(jiàn)表 1。

表1 3組大鼠檢測(cè)指標(biāo)水平比較（±s，n=20）

表1 3組大鼠檢測(cè)指標(biāo)水平比較（±s，n=20）

注:與 C 組比較，#P＜0.05；與 A 組比較，*P＜0.05。

組別A組B組C組CK（U ／L）156.69 ± 11.89#108.78 ± 8.05#*382.26 ± 12.77 HCY（μmol／L）10.12 ± 1.89#8.62 ± 1.15#*14.87 ± 3.22 DBP（mmHg）102.54 ± 12.78#88.45 ± 10.14#*129.72 ± 13.69 TNF- α（ng ／mL）3.24 ± 0.35#2.81 ± 0.28#*4.29 ± 0.25 IL-6（ng／mL）89.46 ± 6.58#78.21 ± 7.55#*110.78 ±9.45 AST（U ／L）21.15 ± 3.62#16.45 ± 3.87#*27.55 ± 3.06 LDH（U ／L）66.87 ± 7.22#43.65 ± 6.48#*97.22 ± 8.45

3 討論

HCY 異常升高（＞ 10 μmol／L）的原發(fā)性高血壓為H型高血壓[4]。血壓長(zhǎng)期異?？擅黠@影響患者的血管功能，導(dǎo)致冠心病等心腦血管疾病的發(fā)生，而其高HCY水平與動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)，因此，H型高血壓患者可出現(xiàn)心功能損傷和合并冠心病等心血管疾病，可進(jìn)一步加重其病情而影響預(yù)后[5]。本研究中，H型高血壓模型大鼠的心肌酶指標(biāo)異常升高，證實(shí)了H型高血壓可造成明顯的心功能損傷。

HCY是食物蛋氨酸衍生的含巰基氨基酸，亞甲基四氫葉酸還原酶基因單核苷酸多態(tài)性降低相關(guān)酶活性、B族維生素和輔助因子葉酸缺乏均可導(dǎo)致其生成的增加，而血液中HCY水平異常升高可增加動(dòng)脈粥樣硬化及腦卒中等腦血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，患者心血管功能可出現(xiàn)明顯損傷，心肌細(xì)胞亦可受到明顯影響[6-7]。研究認(rèn)為，HCY是蛋氨酸代謝中間產(chǎn)物，其高HCY水平與體內(nèi)葉酸缺乏密切相關(guān)[8]。因此，葉酸輔助治療H型高血壓可取得較好療效[9-10]。本研究結(jié)果顯示，葉酸輔助使用可更快速、有效地降低模型大鼠血壓及HCY水平，證實(shí)了HCY高水平與葉酸缺乏有關(guān)。

炎性反應(yīng)亦是高血壓疾病重要病理過(guò)程，與血管疾病密切相關(guān)[11]。本研究結(jié)果顯示，H型高血壓模型大鼠炎性細(xì)胞因子表達(dá)水平進(jìn)一步升高，提示高HCY水平可能加重炎性反應(yīng)，輔助使用葉酸可更快速、有效地降低其炎性因子水平。

綜上所述，輔助使用葉酸可降低H型高血壓并冠心病模型大鼠炎性因子水平。