武秀麗，候海玲

（內(nèi)蒙古烏海市檢驗(yàn)檢測(cè)中心，內(nèi)蒙古 烏海 016000）

0 引言

阿莫西林膠囊屬于半合成青霉素，也是廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素，對(duì)溶血鏈球菌、大腸埃希菌、肺炎鏈球菌、溶血鏈球菌、葡萄球菌等多種病原菌均有強(qiáng)效抑制作用[1]。阿莫西林對(duì)細(xì)胞膜穿透力強(qiáng)，酸性條件下穩(wěn)定，口服起效快，半衰期維持1 h，臨床主要用于治療呼吸道感染、消化道潰瘍、泌尿生殖道感染、皮膚軟組織感染等疾病的治療。阿莫西林的致敏原主要是它的二聚、三聚、四聚和五聚體，聚合度愈高，引發(fā)的過敏反應(yīng)愈強(qiáng)，因此嚴(yán)格控制阿莫西林膠囊中高分子聚合物的含量有著重要的意義[2]。目前市場(chǎng)上抽驗(yàn)的阿莫西林膠囊聚合物超限較多，因此對(duì)阿莫西林膠囊中聚合物進(jìn)行了專項(xiàng)抽驗(yàn)。

1 試藥儀器與方法

1.1 試藥儀器

試藥:水（超純水）；青霉素對(duì)照品:中國(guó)食品藥品檢定研究院，純度:94.1%；磷酸二氫鈉（天津市化學(xué)試劑研究所），磷酸氫二鈉（成都市科龍化工試劑廠）、無水碳酸鈉（天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司），均為分析純。

儀器:島津LC-20A 高效液相色譜儀，DAD 檢測(cè)器、賽多利斯BP211D 電子天平，KQ5200DV 型數(shù)控超聲波清洗器。

1.2 方法

色譜條件:檢測(cè)波長(zhǎng):254 nm，流速:1.5 mL/min，色譜柱:大連依利特Sephadex G-10 柱，規(guī)格:15 mm×300 mm，流動(dòng)相ApH 8.0 的0.05 mol/L 磷酸鹽緩沖液[0.05 mol/磷酸氫二鈉溶液-0.05 mol/L 磷酸二氫鈉溶液（95:5）]，流動(dòng)相B 為水。系統(tǒng)適用性試驗(yàn):量取0.2 mg/mL 的藍(lán)色葡聚糖2000 溶液100 μL，注入液相色譜儀，分別以流動(dòng)相A、B 為流動(dòng)相進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。按藍(lán)色葡聚糖2000 峰計(jì)算，理論板數(shù)均不低于500，拖尾因子均應(yīng)小于2.0.在兩種流動(dòng)相系統(tǒng)中藍(lán)色葡聚糖2000峰保留時(shí)間的比值應(yīng)在0.93-1.07 之間，對(duì)照溶液主峰和供試品溶液聚合物峰與相應(yīng)色譜系統(tǒng)中藍(lán)色葡聚糖2000 峰的保留時(shí)間的比值均應(yīng)在0.93-1.07之間。稱取阿莫西林約0.2 g 置10 mL 量瓶中，加2%無水碳酸鈉溶液5 mL 使溶解。用0.3 mg/mL 的藍(lán)色葡聚糖2000 溶液稀釋至刻度，搖勻。量取100 μL注入液相色譜儀，用流動(dòng)相A 進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。高聚體的峰高與單體與高聚體之間的谷高比應(yīng)大于2.0。另以流動(dòng)相B 為流動(dòng)相，精密量取對(duì)照溶液100 μL，連續(xù)進(jìn)樣5 次，峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于5.0%[3]。

對(duì)照溶液配制:取青霉素對(duì)照品2 mg 置10 mL量瓶中，加水溶解并定量稀釋制成每1 mL 含0.2 mg的溶液。

供試品溶液的制備:取阿莫西林膠囊內(nèi)容物，混勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于阿莫西林，按C16H19N3O5S 計(jì)0.2 g），置10 mL 量瓶中，加2%無水碳酸鈉溶液5 mL 使溶解并用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，立即取續(xù)濾液作為供試品溶液。

測(cè)定法:精密量取供試品溶液100 μL，注入液相色譜儀，以流動(dòng)相A 為流動(dòng)相進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖，另外精密量取對(duì)照溶液100 μL，注入色譜儀，以流動(dòng)相B 為流動(dòng)相，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以青霉素峰面積計(jì)算，并乘以校正因子0.2，阿莫西林聚合物的量不得過0.2%。

2 結(jié)果

本次抽驗(yàn)涉及全國(guó)多省20 批阿莫西林膠囊，20批的高分子聚合物檢測(cè)結(jié)果見表1，圖1-2。

表1 抽樣20 批阿莫西林膠囊高分子聚合物測(cè)定結(jié)果

圖1 樣品色譜圖

圖2 對(duì)照品色譜圖

3 討論

阿莫西林是臨床治療細(xì)菌性感染的常用藥物，主要通過干擾細(xì)菌細(xì)胞壁合成、抑制細(xì)菌自身酶活性，損傷細(xì)菌細(xì)胞膜，發(fā)揮滅菌作用。阿莫西林膠囊療效確切、起效快，臨床應(yīng)用廣泛，藥品質(zhì)量安全關(guān)系患者生命安全、醫(yī)院利益[4-5]。

阿莫西林臨床應(yīng)用廣泛，不同廠家、批次、生產(chǎn)方法藥品治療也有所差異，尤其是阿莫西林中的高分子聚合物是致過敏的主要成分，如果在生產(chǎn)中工藝不夠穩(wěn)定，則生產(chǎn)后的成品含致敏原的高分子聚合物較高，對(duì)患者的用藥安全造成極大的隱患，嚴(yán)重影響人民的生命安全。為了了解市場(chǎng)上流通的阿莫西林膠囊中所含高分子聚合物的真實(shí)情況，對(duì)市場(chǎng)上流通的阿莫西林膠囊進(jìn)行了專項(xiàng)抽驗(yàn)。按照《中國(guó)藥典》2015 年版二部阿莫西林膠囊項(xiàng)下的方法對(duì)20 批阿莫西林中阿莫西林聚合物進(jìn)行了檢測(cè)。

（1）阿莫西林在水溶液與純水流動(dòng)相中主成分締合，以締合物做對(duì)照；而阿莫西林在緩沖液作為溶劑與流動(dòng)相的情況下，相對(duì)不易聚合，因此在此條件下測(cè)定樣品中聚合物含量[6-7]。

（2）測(cè)定過程中，由于檢測(cè)的色譜圖峰型不符合2015 年版《中國(guó)藥典》的要求，進(jìn)行了條件摸索，發(fā)現(xiàn)為所用試劑有干擾，更換了試劑，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

（3）通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)阿莫西林膠囊在測(cè)定時(shí)，溶解性不是很好，使用了超聲溶解并對(duì)超聲時(shí)間進(jìn)行了考察，最終確定為超聲20 分鐘。超聲時(shí)水的溫度不易過高，否則容易使聚合物含量增高，經(jīng)考察，確定溫度為不超過30℃。

（4）結(jié)果顯示，所抽取的全國(guó)20 批阿莫西林膠囊高分子聚合物檢測(cè)結(jié)果均合格，有些廠家未檢出聚合物，結(jié)果較穩(wěn)定，國(guó)產(chǎn)阿莫西林膠囊生產(chǎn)工藝較穩(wěn)定。