李娟 陳菲 王偉

【摘 要】目的：探究黃芪甲苷對阿爾茨海默病小鼠筑巢行為的影響。方法：將ICR小鼠隨機(jī)分為6組（空白組，模型對照組，陽性藥物組，黃芪甲苷高、中、低劑量組），用5?g/?l的LPS溶液進(jìn)行側(cè)腦室注射，空白組小鼠側(cè)腦室注射等體積的生理鹽水，造模24h后灌胃給藥，LPS注射后第25天進(jìn)行筑巢實(shí)驗(yàn)，利用筑巢材料在小鼠飼養(yǎng)籠中進(jìn)行個(gè)體筑巢實(shí)驗(yàn)。結(jié)果：模型組小鼠的巢穴松散，面積大，不牢固;空白組和陽性藥組巢穴緊湊面積小，并且牢固;黃芪甲苷高、中、低劑量組的小鼠與模型組相比，隨著劑量的增加筑巢的面積越來越小，巢穴緊湊且牢固。結(jié)論：小鼠側(cè)腦室注射LPS成功地復(fù)制了AD小鼠模型，實(shí)驗(yàn)表明黃芪甲苷對阿爾茨海默病小鼠的筑巢能力有一定提高，可初步確定黃芪甲苷對阿爾茨海默病小鼠模型有一定的治療作用。

【關(guān)鍵詞】黃芪甲苷;阿爾茨海默病;筑巢實(shí)驗(yàn);效果影響

【中圖分類號】R286【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1005-0019（2019）23-0-01

阿爾茨海默?。ˋlzheimers disease， AD）是最常見的一種神經(jīng)退行性疾病，對患者的生活質(zhì)量產(chǎn)生嚴(yán)重的負(fù)面影響。隨著我國人口老齡化的加重，阿爾茨海默癥的發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢，受到了人們的重點(diǎn)關(guān)注。在研究中，如何方便直觀的判斷藥物對治療阿爾茨海默病是否有效尤為重要。筑巢行為實(shí)驗(yàn)研究方法簡便易行，且過程幾乎無創(chuàng)，可反映小鼠的社會(huì)行為和日常活動(dòng)能力，是研究AD動(dòng)物行為學(xué)的一種較好的手段[1]。本研究通過觀察AD小鼠的筑巢行為探討黃芪甲苷對AD小鼠筑巢行為的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雄性ICR小鼠72只，體重18-22g，由寧夏醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號：SCXK（寧）2015-0001。小鼠飼養(yǎng)在ICV籠具中，自由攝食和飲水。

1.2 實(shí)驗(yàn)分組及給藥 對ICR小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)10天后，進(jìn)行隨機(jī)分組，每組12只，隨機(jī)分為6組：空白組，模型對照（LPS）組，黃芪甲苷高、中、低劑量組（即黃芪甲苷80 、40 、20mg/kg組）和陽性藥鹽酸多奈哌齊5 mg/kg（Donepezil-5 mg/kg）組。用25?L無菌平頭微量注射器對各組動(dòng)物進(jìn)行側(cè)腦室注射，模型組、黃芪甲苷高、中、低劑量組和陽性藥對照組注射LPS溶液（5 ?g/?l，3 ?l/只），空白組小鼠注射等體積的生理鹽水，造模完成。造模24h后按照小鼠體重（0.2mL/10g）開始灌胃給藥，陽性對照組的小鼠每天灌胃鹽酸多奈哌齊溶液，黃芪甲苷高、中、低劑量組灌胃給予相應(yīng)劑量的黃芪甲苷溶液，空白組和模型組的小鼠每天灌胃給予等體積的生理鹽水。LPS注射后第25天進(jìn)行筑巢實(shí)驗(yàn)。

1.3 筑巢實(shí)驗(yàn)方法及評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)前將單只小鼠分籠飼養(yǎng)，使其適應(yīng)環(huán)境至少24h。在小鼠飼養(yǎng)籠（25×15×14 cm3）中放入約2cm 厚的新墊料，將6 塊正方形軟紙片（4 cm×4 cm）均勻平鋪于墊料上，作為小鼠筑巢材料。將小鼠放入籠內(nèi)，正常喂食飲水。筑巢實(shí)驗(yàn)時(shí)間為當(dāng)日 19：00 至次日 7：00。

2 結(jié)果

如上圖1所示，比較空白組、陽性藥組、給藥組與模型組小鼠發(fā)現(xiàn)，模型組小鼠的巢穴松散、面積大、不牢固、無淺坑形成;空白組和陽性藥組巢穴緊湊面積小，并且牢固，其中給藥組隨著黃芪甲苷劑量的增加筑巢的面積越來越小，巢穴緊湊且牢固，有可見的碎或整的紙片圍以墊料的淺坑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明側(cè)腦室注射LPS對AD小鼠的筑巢能力有損害作用，黃芪甲苷對阿爾茨海默癥小鼠模型有一定的治療作用，能使AD小鼠的筑巢能力提高。

3 討論

近年來炎性反應(yīng)在AD的發(fā)病機(jī)制中有重要作用日益受到重視。研究資料表明，AD患者腦內(nèi)持續(xù)存在著慢性炎癥反應(yīng)，并可能是其他病理特征形成和發(fā)展的誘發(fā)因素[2]，進(jìn)一步深入研究抗炎中藥成分對于篩選和研制安全有效的抗AD新藥具有十分重要的意義。本研究顯示黃芪甲苷對AD小鼠的筑巢能力有一定提高，可初步確定黃芪甲苷對AD小鼠模型有一定的治療作用，這可能與黃芪甲苷的抗炎作用有關(guān)。

此外小鼠筑巢行為的生物學(xué)基礎(chǔ)復(fù)雜，可能受到許多腦區(qū)和神經(jīng)遞質(zhì)活動(dòng)的控制[3]，目前文獻(xiàn)涉及AD小鼠模型筑巢行為的研究較少，其具體的作用機(jī)制還有待后續(xù)進(jìn)一步深入研究。

參考文獻(xiàn)

閔喆， 王淑楠， 吳軍等.Tg-SwDI小鼠的筑巢行為研究[J].神經(jīng)損傷與功能重建， 2014， 9（1）：1-5.

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王淑楠.阿爾茨海默病APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠的筑巢行為研究[D].華中科技大學(xué)， 2013.